Средство для определения продуктов реакции перекиси водорода с пероксидазой

СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛ ИСТИЧЕСНРЕСПУБЛИК 09) (11)(1)Е)Гютляйн,ХансХанс К, К или различны и олидин, тетра н, замещенныйбензилом,н ик инаковыначают овительных редству для акции пере- азой, кото- медицинской гидрохинол метилом ил рвделения продуктов си водорода с перокс е можно использовать и остато диагн Цел бильнтике ышение ста ь изобретения сти хранения. яделеводоПос предла ния пр идроксил, аминогру ногруппа, амино-(д слота, амино-этансу о-этанфосфоновая ки)-ук- льфоки диме тилами сусная ки лота, амиР и К означают рода с произв ислота, личны и трет-бу одинаковы илиодород, метокс мК,иК значать одновременно неолидин или тетранный метилом или р Юдроениолин, замещ з шеи мере огидроксил,по мезначае кал К ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМПРИ ГКНТ СССР(71) Берингер Маннхайм Гм(56) Заявка ФРГ У 2735690кл. С 07 Э 233/64, 1975. Изобретение относитс рам окислительно-восста реакций, в частности к вленная цель достигае ему средством для оп уктов реакции перекис ероксидазой, содержащим ное имидазола общей ф где К - водород, метил, оксибутнл тетрагидрофуранил,(54) СРЕДСТВО ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕН 1 Л ПРОДУКТОВ РЕАКЦИИ ПЕРЕКИСИ ВОДОРОДА СПЕРОКСИДАЗОИ(57) Изобретение относится к инди.каторам окислительно-восстановительных реакций и может быть использовано в медицинской диагностике. Цельизобретения - повышение стабильности хранения средства. Средство содержит производное имидазола, которое наносят на носитель. Стабильность средства до 10 дн (прототипа - 3 дн). 2 табл.3гидрохлорид и добавку из числа . твердых и жидких носителей при сле дующем соотношении компонентов,мас.Х:Производноеимидазола общейформулы (1) илиего гидрохлорид О, 01-1Добавка иэ числатвердых и жидких носителей ОстальноеПредлагаемое средство приготовляют простым смешиванием ингредиентов. Производные имидаэола общей формулы (1), содержащиеся в предлагаемом средстве, являются новыми соединениями. Их получают известными методами, например, тем, чтоа) Ы -дикетон общей формулы0 Р2в которой К и К имеют указанное значение, подвергают конденсации с альдегидом общей формулы 1496644 4Целевой продукт выделяют в свободном виде или в виде соли. В примерах используют следующиепроизводные имидазола Мг 1 " ХХХ 1:1 гидрохлорид 2-(3,5-диметокси-оксифенил)-4-(5) -(4-диметиламино-фенил)-5-(4)-метил-(1 Н)-имидазолаоФ 1 О .т,нл, 215-219 С (разложение),Ъ макс =(л),гв которой К и К имеют указанноезначение,подвергают взаимодействию с альдегидом формулы (ЕТТ) и аммиаком и получаемое при этом соединение формулыЗ 2 -Ям 0(7) подвергают восстановлению, или в) ацнлбромид общей формулы(711) в которой К имеет указанное эна(чение и с аммиаком в кислом растворе, илиб) Ы -кетоксим общей формулы К - СО - СНКВгав которой К и К имеют указанноезначение, подвергают взаимодействиюс амидином общей формулы-(5) -(фенил-амино-И-бис-этан-сульфокислота), Кй = 0,28 (силикагель, элюент: изопропанол/простойн-бутиловый эфир/вода в соотношении532) % макс = 610 нм (Я = 28,400) .Взятые в скобки в названии соединений Иг Т-ХХХ 1 цифры 4, и 5 соответственно означают соответствующееположение заместителя таутомерной50формы.П р и м е р 1. Фильтровальную бумагу пропитывают водным или метанольным раствором, содержащим 0,01, 0,1. или 1,0 мас.производного имидазола,сушат и разрезают на куски, одну55 часть которых используют для определения продуктов реакции перекиси во-дорода с пероксидазой сразу же, вторую часть - после хранения при темспературе 35 С и относительной влаж 1496644 8ности воздуха 507 в течение 3 дн, а третью часть - после хранения в указанных условиях в течение 10 дн. Для осуществления опыта пропитанную раст 5 вором производного имидазола бумагу увлажняют раствором 0,5 г перекиси водорода и 0,1 г пероксидазы в 100 мл воды и по истечении 5 мин при помощи фотометра определяют окраску бумаги в 7 отражения при 550 нм по сравнению с контрольной бумагой (т.е. бумагой, не увлажненной водным раствором перекиси водорода и пероксидазы) .15Результаты опыта сведены в табл.1. 50 Сравнение данных табл. 1 свидетельствует о том, что предлагаемоесредство проявляет лучшую стабильность хранения, выражающуюся в меньших потерях отражения.П р и м е р 2. Реактивная пленкадля обнаружения перекиси водорода.К сырой массе реактивной пленки 25(около 99,5 мас.7), состоящей из18 г дисперсии пластмассы сополимераиз винилацетата и винилпропионата,1,38 г альгината, 69 г буфера трисцитрата с рН 7,5 (0,45 моль/л),0,025 г 1-(3-хлорфенил)-полукарбацида, 0,025 г 11 дК эапц 2 Н О, 0,05 гтритона Х 100, 0,6 г гексанола и200 медно-аммиачной пероксидазы,добавляется 0,47 г (около 0,5 мас,7)2-(3-диметокси-гидроксифенил)-435(соединение формулы 1),Этот состав для покрытий нано 40сится толщиной мокрой пленки 200 Цшна прозрачную пленку и высушивается.На этот полученный таким образомслой наносится второй слой в качестве оптически белого фона составас ,толщиной слоя 200 ш и вы 45сушивается: 52 мп 0,1 м буфератрисцитрата с рН 7,0, 5,5 г двуокиси титана, ,2,7 г диатомовой земли,0,4 г альгината, 1,4 г дисперсиипластмассы добавки сополимера извинилацетата и винилпропионата, атакже 0,2 г тритона Х 100,Полученная таким образом набухающая и всасывающая реактивная пленкаОбрабатывается для испытания. Дляобнаружения перекиси водорода назону Дозирования наносится 301опытного раствора. Через 1 мин реак Формула изобретения Средство для определения продуктов реакции перекиси водорода с пероксидазой, содержащее производное имидазола и добавку из числа твердых и жидких носителей, о т л и ч аю щ е е с я тем, что, с целью повышения стабильности хранения, в качестве производного имидазола оно содержит соединение общей формулы (1) где К - водород, метил, оксибутил,тетрагидрофуранил,К и Р. - одинаковы или различныи означают юлолидин, тетрагидрохинолин, замещенный метилом или бензилом, или остаток Где К,1 Гидроксил аминогруппа диметиламиногруппа, амино-(ди)-уксусная кислота,амино-этансульфокислота,амино-этанфосфоновая кислота,К и К - одинаковы или различны и5означают водород, метоксил,трет-бутилпричем К и К одновременно не могут означать юлолидин или тетрагидрохинолин, замещенный метилом или бензилом, и по меньшей мере один раДикал К 4 Означат ГИДроксил или его гидрохлорид при следующем соотношении компонентов, мас.7,:Соединение формулы (1) или егогидрохлорид 0,01-1,0Твердый или жидкий носитель Остальное тивныйклапан прижимается, а еще через 2 мин полученный цвет измеряется фотометром диффузного отражения. С установленной ранее эталонной кривой считываются данные концентрации перекиси водорода.В табл. 2 приводятся данные для эталонной кривой1 О 1496644 причем в качестве твердого носителяприменяют фильтровальную бумагу илинабухаемую, соответственно всасыреактивную пленку, а в кажидкого - воду илиметанол. вающую честве б л ица 1 Е отражения при содержании производного имидазоларавном, мас. Х, через время, дн Производноеимидазола,содержащеесяв средстве,Иг средстве,Т 1 0,13 1,0 3 0 3 10 10 10 29 29 30 ЗО 30 32 29 30 30 32 33 29 29 30 30 31 33 А - известное соединение 2,4-ди-(4-диметиламино,5-диметоксифенил)-5-(4-оксифенил)-имидазолБ - гидрохлорид известного соединения А%Ф - отражение нельзя измерить из.-за сильной собственной окраски. 1111111 ЧЧЧ 1Ч 11Ч 111 ХХХ 1Х 11Х 111Х 1 ЧХЧХЧ 1ХЧ 11 фХЧП 1Х 1 ХХХХХ 1ХХ 11ХХ 111ХХ 1 ЧХХЧХХЧ 1ХХЧ 11ХХЧ 111ХХ 1 ХХХХХХХ 1АБ 45 45 45 46 46 46 45 45 46 46 47 47 45 46 45 45 47 47 48 48 47 48 46 46 45 45 47 48 46 46 48 48 46 46 47 47 47 47 48 49 45 45 46 46 47 47 46 46 48 48 47 47 46 46 45 45 46 46 46 46 47 48 48 - 58 48 58 47 47 48 46 48 49 47 47 49 50 50 48 47 50 48 51 48 49 49 51 47 48 49 48 50 50 48 47 48 48 51 62 63 33 34 33 34 34 35 33 34 34 35 35 35 33 34 34 34 35 35 37 37 36 37 34 34 33 34 35 37 33 34 36 37 .34 35 34 35 34 35 38 38 35 35 34 35 35 35 33 34 38 38 35 36 34 34 34 34 33 34 33 34 38 39 42 54 42 54 36 36 37 36 37 38 36 36 38 40 40 37, ЗЬ 39 36 40 37 37 37 41 38 37 38 36 40 38 37 Зб 36 36 41 61 62 28 28 29 28 29 30 28 29 30 34 35 29 28 32 28 32 29 30 30 35 ЗО 29 30.30 35 30 30 29 28 28 35 38 38 36 36 30 29 33 29 33 30 31 31 36 30 30 ЗО 30 35 31 30 29 29 29.37 50 50 38 38 32 30 35 31 Зб 32 33 33 39 33 32 33 32 38 33 32 31 31 31 40Заказ 4290/59 Тираж 789 ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям.и открытиям при ГКНТ СССР113035, Москва, Ж, Раушская наб д. 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г,ужгород, ул. Гагарина, 101 4,2 7,3 12,4 18,4 53,0 40,3 35,0 19,8