Способ получения пектинатов, обладающих антимикробным действием

ОЮЗ СОВЕТСКИХ ОЦИАЛИСТИЧЕСКИ ф( ) ЕСПУБЛИК 39) С 08 В 37/ Е ИЗОБ ЕНИЯ,И К А и и н скии институт на, Н.Ш.Кай ревсерег Чегайгеп чегЫпбцпдеп д. СЬеп). ЕЫ. Е КТИ НАТОВ БНЪМ ДЕЙбласти химик получению ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИ.ПРИ ГКНТ СССР РСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТ(56) Ог. 90 ГЫ 3 еуа и Ог. ВоИ Веюг НегсеПцпд чоп МетаПре 3 апгог ЙегареЮзсЬеп чепмепбцп1953, 124, М 46, 7867.Патент СССР М 886750,кл. С 08 В 37/06, 1981.(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПОбЛАДАЮЩИХ АНТИМИКРОСТВИЕМ(57) Изобретение относится к оческой технологии, конкретно Изобретение относится к области химической технологии, конкретно к получению препаратов, обладающих противомикробной активностью.Известен способ получения пектинатов для терапевтического применения, заключающийся в том, что пектин обрабатывают раствором щелочи, смесь выдерживают при комнатной температуре, добавляют хлорид или сульфат алюминия и водный раствор этанола и выделяют целевой продукт.Недостатками способа являются; низкое содержание металла, длительность способа, низкая антимикробная активность,Известен способ получения комплексов металлов и полигалаптуроновых кислот обработкой пектина водным раствором соли металлла. репаратов на основе пектина, обладающих ротивомикробной активностью, Изобретеие позволяет повысить выход и специфическую активность целевого продукта и упростить процесс за счет того, что в способе получения пектинатов, обладающих антимикробным действием, пектин предварительно обрабатывают солянокислым буферным раствором с рН 1,2-2,1 в количестве 120 - 200 мл раствора на 1 г пектина, затем обрабатывают водным раствором, содержащим ионы металла в течение 20 мин при массовом соотношении пектинаи ионов металла 1:0,23-0,26 с последующим осаждением целевого продукта этанолом, фильтрацией, промывкой и сушкой. 3 табл,Смесь выдерживают 2 ч, затем подкисляют, вводят этиловый спирт и осаждают целевой продукт. Его гомогенизируют с дистиллированной водой, рН 4,5 й 0,5, и оставляют его на ночь. Все стадии повторяют 4 раза. Полученный продукт отделяют, центрифугируют, промывают водой, спиртом и эфиром.Недостатками способа являются невысокие выход и специфическая активность целевого продукта, большая длительность процесса и его сложность.Целью изобретения является повышение выхода и специфической активности целевого продукта и упрощение процесса.Поставленная цель достигается тем, что в способе получения пектинатов, обладающих антимикробным действием, обработ 1776656кой пектина водным раствором, содержащим ионы металла, осаждением этанолом, фильтрацией, промывкой и сушкой целевого продукта, пектинпредварительно обрабатывают солянокислым буферным раствором с рН 1,2-2,1 в количестве 160- 200 мл раствора на 1 г пектина в течение 5 мин., обработку водным раствором, содержащим ионы металла, проводят 20 мин. при массовом соотношении пектина и ионов металла 1:0.23 - 0,26, а осаждение целевого продукта проводят этанолом.Способ осуществляют следующим образом: к 0,25 г пектина приливают 100 мл дистиллированной воды, раствор перемешивают и добавляют солянокислый буферный раствор с рН 1,2-2,1 в количестве 160-200 мл раствора на 1 г пектина, после чего прибавляют водный раствор соли ме.талла при массовом соотношении пектина и ионов металла 1:0,23 - 0,26. Через 20 мин осахсдают пектинаты добавлением этанола, осадок отфильтровывают, промывают водой и сушат при 40 С до порошкообразного состояния,Изобретение иллюстрируют примеры, П р и м е р 1. Отвешивают 0,2500 г свекловичного пектина, приливают 100 мл дистиллированной воды. растврр перемешивают на магнитной мешалке в течение 5 мин. Затем к раствору пектинэ добавляют 40 мл буферного раствора с рН 1,8 (160 мл буферного раствора на 1 г пектина) (для приготовления буферного раствора с рН 1,8 к 8,3 мл 0,2 н,раствора хлороводородной кислоты приливают 25 мл 0,2 н. раствора хлорида калия, раствор разбавляют водой в мерной колбе до объема 100 мл), после чего приливают 5,4 мл стандартного раствора молибдена (20 растоор молибдатэ аммония). Массовое соотношение пектина и иона молибдена 1:0,25. Через 20 мин осаждают пектинаты добавлением к раствору 20 мл 96 этанола, осадок фильтруют через смоченный водой бумажный фильтр, осадок на фильтре промывают водой до отрицательной реакции промывных вод на ион молибдена (по реакции с роданидом аммония), Осадок сушат при 40 С в сушильном шкафу около 30 мин. до порошкообразного состояния и затем растирают в ступке до образования однородного порошка. Выход пектината молибдена - 0,3090 г с содержанием молибдена 94,51%.Целевой продукт - пектинат молибдена - представляет собой порошок серого цвета, без запаха, слизистого вкуса. Нерастворим о воде, в хлорводородной кислоте, в серной кислоте, в щелочах.20 40 45 50 либдата (по реакции с роданидом аммония).Осадок сушат при 40 С о сушильном шкафу около 30 мин, до порсшкообразного состоя 55 5 10 15 25 30 35 П р и м е р 2, Отвешивают 0,2500 г свекловичного пектина, приливают 100 мл дистиллированной воды, раствор перемешивают на магнитной мешалке в течение 5 мин. Затем к раствору пектина добавляют 30 мл буферного раствора с рН 1,2 (120 мл буферного раствора на 1 г пектина) (для приготовления буферного раствора с рН 1,2 к 32,25 мл 0,2 н раствора хлороводородной кислоты приливают 25 мл 0,2 н. раствора хлорида калия, раствор разбавляют водой о мерной колбе до объема 100 мл), после чего приливают 5,4 мл стандартного раствора молибдена (20 раствор молибдата аммония), При массовом соотношении пектина и иона молибдена 1:0,23, Через 20 мин осаждают пектинаты добавлением к раствору 20 мл 96 этэнола, осадок фильтруют через смоченный водой бумажный фильтр, осадок на фильтре промывают водой до отрицательной реакции промывных вод на ион молибденэ,(по реакции с роданидом аммония) Осадок сушат при 40 С в сушильном шкафу около 30 мин до порошкообразного состояния и затем растирают в ступке до образования однородного порошка. Выход пектината молибдена - 0,3050 г с содержанием молибдена 88,12%.П р и м е р 3, Отвешивают 0 2500 г свекловичного пектина, приливают 100 мл дистиллированной воды, раствор перемешивают на магнитной мешалке о течение 5 мин. Затем к раствору пектина добавляют 50 мл буферного раствора с рН 2,1 (200 мл буферного раствора н 1 г пектина) (для приготовления буферного раствора с РН 2,1 к 4,3 мл 0,2 н раствора хлороводородной кислоты приливают 25 мл 0,2 н раствора хлорида калия, раствор разбавляют водой о мерной колбе до объема 100 мл), после чего приливают 6,0 мл стандартного раствора молибдена (2 раСтвор молибдата аммония), Массовое соотношение пектина и ионов молибдата 1:0,26. Через 20 мин. осаждают пектинаты добавлением к раствору 20 мл 96 этанола, осадок фильтруют через смоченный водой бумажный фильтр, осадок на фильтре промывают водой до отрицательной реакции промывных вод на ион мония. и затем растирают в ступке до образования однородного порошка, Выход пектината молибдена - 0,3076 г с.содержанием молибдена 92,170 .П р и м е р 4. Отвешивают 0.2500 г свекловичного пектинэ, приливают 100 мл дистиллированной волы. Р зстоор :,еремешиваат на магнитной мешл, к ..и. 55 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 мин. Затем к раствору пектина добавляют40 мл буферного раствора с рН 1.8 (160 млбуферного раствора на 1 г пектина), послечего приливают 4 мл стандартного растворавольфрама (20 раствор оксида вольфрама).Далее получение пектината вольфрама проводят аналогично получению пектината молибдена при массовом соотношениипектина и ионов вольфрама 1:0,25(специфическая реакция на вольфрам - с хлоридом,олова (И) в кислой среде). Выход пектинатавольфрама - 0,3060 г с содержанием вольфрама 90,10%,Целевой продукт - пектинат вольфрама - представляет собои порошок серого цвета без запаха, слизистоговкусы, Нерастворим в воде, в хлороводородной кислоте, в серной кислоте,щелочах.П р и м е р 5. Отвешивают 0,2500 гсвекловичного пектина, приливают 100 млдистиллированной воды, раствор перемешивают на магнитной мешалке в течение 5мин, Затем к раствору пектина добавляют40 мл буферного раствора с рН 1,8 (160 млбуферного раствора на 1 г пектина), послечего приливают 8,8 мл стандартного раствора хрома (2 раствор дихромата калия),Массовое соотношение пектина и ионовхрома 1;0,25, Далее получение пектинатахрома проводят аналогично получению пектината молибдена (см, пример 1) (специфическая реакция на хром - с пероксидомводорода в кислой среде).Выход пектината хрома - 0,3076 г с содержанием хрома 92,15%,Целевой продукт - пектинат хрома -представляет собой порошок серого цвета,без запаха, слизистого вкуса, Нерастворимв воде, в хлороводородной кислоте, сернойкислоте, щелочах.П р и и е р 6, Огвбшивают 0,2600 гсвекловичного пектинэ, приливают 100 млдистиллированной воды, раствор перемешивают на магнитной мешалке в течение 5мин. Затем к раствору пектина добавляют40 мл буферного раствора с рН 1,8 (160 млбуферного раствора на 1 г пектина). Послечего приливают 12,3 мл стандартного раствора меди (2 раствор сульфата меди).Массовое соотношение пектина и ионов меди 1:0,25, Далее получение пектината медипроводят аналогично получению пектината. молибдена (см. пример 1) (специфическаяреакция на медь - с гексацианоферратом(П)калия). Выход пектината меди - 0,3046 г; . с содержанием меди 87,46 ,Целевой продукт - пектинат меди -представляет собою порошок серого цвета,без запаха, слизистого вкуса. Нерастворим в воде, в хлороводородной кислоте, в серной кислоте, щелочах,П р и м е р 7, Отвешивают 0,2500 г свекловичного пектина, приливают 100 мл дистиллированной воды. раствор перемешивают на магнитной мешалке в течение 5 мин, Затем к раствору пектина добавляют 40 мл буферного раствора с рН 1,8 (160 мл буферного раствора на 1 г пектина), после чего приливают 13.4 мл стандартного раствора цинка (20 раствор сульфата цинка). Массовое соотношение пектина и ионов цинка 1:0,25. Далее получение пектината цинка проводят аналогично получению пектината молибдена (см. пример 1) (специфическая реакция на цинк - с ферроциэнидом калия). Выход пектината цинка - 0,3063 г с содержанием цинка 90,18%.Целевой продукт - пектинат цинкэ - представляет собою порошок серого цвета, без запаха, слизистого вкуса. Нерэстворим в воде, в хлороводородной кислоте, в серной кислоте, в щелочах,П р и м е р 8. Отвешивают 0,2500 г свекловичного пектина, приливают 100 мл дистиллированой воды, раствор перемешивают на магнитной мешалке в течение 5 мин. Затем к раствору пектина добавляют 40 мл буферного раствора с рН 1,8 (160 мл буферного раствора на 1 г пектина), после чего приливают 15,5 мл стандартного раствора никеля (2 раствор нитрата никеля). Массовое соотношение пектина и ионов никеля 1:0,25. Далее получение пектината никеля проводят аналогично получению пектината молибдена (см, пример 1) (специфическая реакция на никель - с диметилглиоксимом в аммиачной среде), Выход пектината никеля - 0,3035 г с содержанием никеля 85,630 .Целевой продукт - пектинат никеля - представляет собою порошок серого цвета, без запаха, слизистого вкуса. Нерастворим в воде, в хлороводородной кислоте. в серной кислоте, щелочах:Данные сравнительного анализа заявленного и известного способов представлены в табл.1-3.Иэ табл.3 видно, что пектинаты меди, цинка, никеля, хрома, молибдена, полученные заявленным способом, оказывают анти- микробное действие в более низкой концентрации (2000 мкг/мл), чем дека- и полигалактуронаты цинка, никеля, хрома. молибдена (4000 - 8000 мкг/мл), полученные известным способом, следовательно, исследуемые комплексы, полученные по заявленному способу, проявляют более вы1776656 раженный антимикробный эффект, чем дека- и полигалактуронаты, которые получены известным способом. Более выраженное антимикробное действие пектинатов по сравнению с дека- и полигалактуронатами, возможно, связано с более высоким содержанием металлов в комплексах,Заявленный способ по продолжительности занимает 1-1,5 ч. Известный - около 10 дней, он осуществляется в одну стадию, в то. время как известный способ требует многостадийности.Известный способ требует проведения работ с щелочами, концентрированными кислотами, эфиром, а также требует дорогостоящего оборудования. Таблица 1 20 Исхо ные ве ества Выход целевого прдукта,г Выход целеаого продукта, Ок общей массе исходных веществ Способ общая масса исходных веществ, г 17,5-286 18-250 8,88-1549,9 29,88-1 7999 15,55-69,8 0,25 0,309 0,1140 0,080,3640 84,89 0,306 0,25 0,33 92,72 72,23 0,176 0,25 0,426 0,3076 0,3046 0,3063 0,3035 0,246 0,25 0,496 61,41 0,25 0,27 0,52 58,90 54,20 0,25 0,31 0,56 Таблица 2 Данные по содержанию металлов в целевом продукте,полученном известным и заявляемым способамиИзвестныйЗаявляемыйпектинатмолибденапектинатвольФрамапектинатхромапектинатмедипектинатцинкапектинатникеля пектин или соль металла, дека- или пол- в г игалактуроно.вая кислота, г Формула изобретения Способ получения пектинатов, обладающих антимикробным действием. обработкой пектина водным раствором, содержащим 5 ионы металла, осаждением этанолом, фильтрацией, промывкой и сушкой целевого продукта, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью повышения вь 1 хода и специфической активности целевого продукта и упрощения про цесса, пектин предварительно обрабатываютсолянокислым буферным раствором с рН 1,2 - 2,1 в количестве 120-200 мл раствора на 1 г пектина, обработку водным раствором, содержащим ионы металла, проводят в течение 15 20 мин при массовом соотношении пектина иионов металла 1;0,23-0,26.177(1 б:76 Табднца 3Резуяьтатм сравнительного научения актннмкробного действию целевого продукта, полученьюгоизвестньм и заявление слособюьи Образец Тест-культурн Концентрация вене. став в Гц, нкгlнл знтеообактерни патогеннме старитюкоккн порогеннме культура зсЬе- Е.со 11 Е.ря е (сЬ(а гасо з о 1 з 11 сур 1 п вот (юз ЕсарЬ. 5 сарЬ. аосаоз ер(аеттуре ,1 а(зчоодОсарлу 5 сзрЬ 7 . 1 ососсов 1 ососсоз дцсечв аятецв 209-р (дзкаров) с. алЕЬс 61 аевае 1 Ъ. Вас.ов зптдтяиЪ 1- со(аеасзз 1.з 96 541 Ое 11 а5 опле(157 6000 4000 2000 6000 4000 2000 6000 4000 2000 6000 4000 2000 6000 4000 2000 1000 6000 4000 2000 6000 4000 2000 1000 8000 6000 4000 6000 4000 2000 1000 6000 4000 а) декагалзктуронзт нели+ д р н н е ч а н и е: - отсутствует рост колоний; Ь растут отдельние колонии; ь сплоезюй рост колощй, СоставительТехред М.Моргентал Редактор Корректор А.Мотыль Производственно-издательский комбинат "Патент", г, Ужгород, ул.Гагарина, 101 Заказ 4099 Тираж Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раушская наб 4/5