Способ получения белкового кормового продукта

2 4П р и м е р 1, Воздушно-сухие измельченные обрезки (размеры 0,5-2,0х 3,0-100 мм) виноградной лозы увлажняют водопроводной водой в соотношении 1 г : 2,5 мл. Влажный субстрат (3-5 г по сухому весу) помещают в колбы (объемом 100 мл) и стерилизуют 30 мин при 0,5 атм. Затем вкаждую колбу вносят 1 мл (или 2) 5 суточного инокулята гриба В 1 ег 1 апйегаайияеа ВКМ РЙД и инкубируют при28-30 С,В течение 20 сут культивированиянаблюдается потеря веса субстрата,интенсивное разложение целлюлозы илигнина, накопление белка и образование Ферментов целлюлозного комплекса.На чертеже представлена динамикапроцесса биоконверсии.Из чертежа видно, что в течениевсей Ферментации по мере разложениялигнина и целлюлозы происходит увеличение содержания белка, Например,через 10, 15 и 20 сут содержание бел"ка составляет 7,7 11,0 и 15,1 Ф соответственно.Полный биохимический состав полуценного продукта через 20 сут культивирования гриба В,а.цала представленв табл. 1. Как видно из данных табл.1,происходи г глубокое разложение лигнинового и целлюлозного компонентов изначительное накопление белка. Продукт содержит также растворимые сахара, липиды, а также Ферменты целлюлазного комплекса и пектиназы. Продукт имеет низкое содержание нуклеиновых веществ и хорошую перевариваемость, В табл, 1 представлена суммаактивности каждого Фермента, зкстрагируемого водой и адсорбированногона опилках.годержание аминокислотного состава продукта в процентах к сухому продукту представлено в табл, 2,Фракционный состав липидов представлен в табл. 3. Несмотря на то,что содержание липидов в продуктеневысокое, Фракционный состав их свидетельствует о хорошем качестве.Баганс веществ при биоконверсииобрезков виноградной грозы представлен в табл.Экономический коэФФициент определен по белку, поскольку в твердойФазе определение биомассы методичес"ки невозможно. Энергетический обментакже рассчитан на основании коли 3 1 5.1 1 2 7Р9 3Д и и н куби руют п р и 2 8 - 3 0С втечение 2 0 сут .Приготовление и но куля та . С т е р и л ь -на я среда , с оде ржаца я , г / л : глюкоза1 0 ; пе птон 3 , 0 ; КН РО П11; Иа С 1 05 ;МАЗО0 , 5 , рН 5 , 5 - 5 , Ьза се в а е т с я мел- .кими кусочками а га ра с г р ибом ( 0 , 20 , 5 см ) и гриб выращивается н а качалоке при 28 С, По истечении 1-5 сут 1 Остерильно измельченная на магнитноймешалке биомасса используется в качестве инокулята.Штамм соматических структур грибаВ,1 егЕапйега айцва ВКМ "-293 чД выделен из плодового тела гриба, растущего на сухом стволе тополя на Апшеронском полуострове Аз,ССР.Грибная культура поддерживается наскошенном сусле-агаре, на котором белый воздушный мицелий состоит из хорошо развитых гифов,Иногда на высохшем агаре (через30 сут) обнаруживается образованиеплодового тела (гимениальный слой),Итамм имеет следуюцую характеристикуКолония гриба (мицелиальная Форма)на сусле-агаре в чашке Петри придО28 С за 5 сут дает полныи рост (диаметр 9,.5 см), Ког 1 ония белая., при старении. на поверхности образует тонкуюпленку из спгетения мицелия, обесцвечивает среду (обратная сторона колонии белая), сстоит из хорошо развитых генеративных и скелетных гиФов.Генеративные гиФы (толщина 2,0,2 мкм) тонкостенные, септированныеи разветвленные, Почти во всех. перегородках имеются пряжки (размерь 1 1,0- 40р 0 х 5 -Я мкм)Скегетные гиФы тол""тые (6,0-8,0 мкм), почти без перегородок, ооычно неразветвленные и почтибез пряжек, В старых культурах иноггавстречаются хг,амидоспоры и цистиды. 45Гриб хорошо размножается из генератлвных гиФов и не образует спор, Вжидких и на плотных средах гриб хорошо ус.ваивает глюкозу, ксллозу, сахарозу,Фруктозу, маннозу, целлюлозу икрахмал,. В качестве источника азота ис-.пользуют; ИаНО, МН ИОЗ, ЫБ,НРД,(ИН 4);ВО,мочевину,пептон и аспарагин.ИдентиФикацию гриба провсдят поопределителю "Трутовые грибы г.вропейской части СССР и Кавказа",1953.Гриб лепонирован во Всесоюзнойколлекции микроорганизмов и имеетномер ВМ. 1-2934 ДТабли ца 1Биохимический состав продукта, полученногопутем твердофазной ферментации обрезковвиноградной лозы (субстрат) грибом В.айцягаВКИ РД (время выращивания .20 сут) Содержание, 4 Показатели исходного субстрата получен- инокулированного субстрата ногопродукта О,О 0,0 2,6-3,0 3,5 0,6-0,750,0 00 .4,0-4,2 4,5-5,0 0,7-0,8 71,3 71,0 15, 19,71,6 0,24 0,13 7,0 Разложение лигнинаРазложение целлюлозыБелокСырой протеинРастворимые сахараНуклеиновые веществаНуклеиновые кислотыЛипидыПеревариваемость;п ч 1 гго1 п ччоф 4,0 63,7 59,6 31,8 5 15112чества образуемого Ьелка, Полученныеданные свидетельствуют об относительно высоком конструктивном обмене посравнению в известными дереворазруша-,ющими грибами,П р и м е р 2. Пшеничную солому(5-10 мм длины) увлажняют водопроводной водой, засевают гриЬом В.айцэгаВКМ РМ и культивируют по примеРУ 1После 20 сут ферментации наблюдается разложение целлюлозы на 64,94и лигнина на 71,5 Ф, обогащение белком 10,5, 15Таким образом, предлагаемый штаммпозволяет в значительной степени обогащать растительные субстраты, интенсивно разлагая лигноцеллюлозный комплекс как одревесневших, так и травянистых растений (гриб В.адцэга ВКИРД обогащает опилки из виноградной лозы до 15,1 В, разлагая при этом71,0 и 71,3 Ф целлюлозы и лигнина соответственно; обогащение соломы составляет 10,54 при разложении 64,9целлюлозы и 71,53 лигнина),При этом упрощается процесс получения белкового кормового продуктаза счет исклюцения приемов ввода дополнительных истоцников питания (мик.роэлементов) к основному субстра гуи принудительной аэрации воздухом.Кроме того, более сбалансированноосуществляется процесс разложения35 72 Ллигноцеллюлоэного комплекса с одновременной непрерывной трансформациейпродуктов разложения в белок за счетиспользования нового штамма грибаВ 1 еЖапйега айиэгя ВКИ РД, Так,в течение 10, 15 и 20 сут выращивания по предлагаемому способу накопление Ьелка составляет 7,7; 11,0 и15,13, а по известному через 10 сутбелок составляет 4,5 и дальнейшеекультивирование (через 15 сут) неприводит к увеличению содержания белка, несмотря на интенсивное разложение лигноцеллюлозы грибом Рапцв г.дг 3.лцзр ВКИ РД,формула изобретения Способ получения белкового кормового продукта, предусматривающий культивирование культуры дереворазрушающего гриба в условиях твердофазной ферментации на увлажненных растительных отходах при 28-30 Г и влажности 65-703 до максимальной деструкции лигнина, о т л и ц а ю - щ и й с я тем, цто, с целью улучшения кацества и удешевления процес- Ъса, в качества растительных отходов используют иэмельценные обрезки вино- градной лозы или пшеничную солому, а в качестве культуры дереворазрушающего гриба штамм В 1 ег 1 апйега ас 1 цэга ВКИ РД,1511272 Продолжение табл. 1 Содержание,Показатели исходно го суб" получен- инокулированного субстрата ногопродукта страта Ферменты;Целлюлоза по ФБЦеллюлоза по КИЦЭндоглюканазар-ГлюкозидазаПектиназа 124 3891,4 49,8 30,1 ФИсходный субстрат очень грубый и не поедается животным, поэтому перевариваемость исходного субстратап чиччо не определена,Т а б л и ц а 2 Содержание аминокислотного состава белка в биомассе (продукте) после твердофазной ферментации виноградной лозы грибом В.абазина ВКМ ГД через 20 сут)Со е жание 3 к ФАО Аминокислоты д рсухому продукту 1г/100 гбелка Исходный Просубстрат дукт 3,5 2,82,8 ЛизинГистидинАргининАспарагиновал кислотаТреонинСеринГлутаминовая кислотаПролинГлицинАланинЦистинВалинИзолейцинЛейцинТироэинФенилаланин 0,04 0,03 и,45 0,10 0,050,04 0,08 0,09 0,10 0,18 0,15 0,48 0,01 0,09 0,03 0,05 0,38 0,07 0,72 0,41 0,31 0,28 0,19 0,28 0,32 0,22 0,21 0,12 0,29 О,ОЯ 0,1210 1511272 Количество,В от суммылипидов Состав 19,й 3,1 272ч е Таблица 4 Баланс веществ при твердоФазной Ферментации обрезковвиноградной лозы грибом В.ас 1 цяа ВКМ РчД. Потери веса Содеожаниесубстрата белка(разложен,) Продолжи- тельность Абсолютный сухой вес .субстрата, г Эконоопыта,сут в концеФерментации в началеФерментации Р 3 3 0.,176 7,7 2 й,1 75,60 0,2 Й 5 15,1 28,Й 71,96 О 72 2 1,05 35 2,28 1,95 1020 д,е 4 г Составитель И,Болотина Редактор М.Петрова Техред И.Верес Корректор Н.КороЗаказ 5863/28НИИПИ Государств1 ж 501 одп рытиям прн ГКНТ СССР 4/5 ениям и кая наб обрРауш ного комитета по 035, Москва, Жтвенно-издательский комбинат "Патент", г, Ужгород, ул. Гагарин роиз ь 4 М р