Способ получения протеина из суспензии микроорганизмов

О П И С А Н И Е 884ИЗОБРЕТЕНИЯ Союз Советских Социвлистическик Республик(31) Р 26 22 982.3 (33) ФРГ С 12 0 13/06 Чосударствеииый комитет СССР по делам изобретеиий и открытий(72) Авторы изобретен Иностранцы их Хайд (ФРГ), Михаэль Нельбек-Хохшт Готтхильф Нэер (ФРГ) и Гюнтер Вай71 Заявител Иностранная фирм Берингер Чаннхайм Гмб (ФРГ) 4) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРОТЕИНА ИЗ СУСПЕНМИКРООРГАНИЗМОВ микробиов частноссуспензиисодержаот, напри 5 енным по ем расщепоси тся кенности,теина иэпониженнымвых кислодновремидов путислоты,получения икроорганизмее теплово-20 с при 6агревания пдо 45-50 С я то чтоются 31ления ринем нуклеино0,2 вес.% см 5 -нуклеот1уклеиновой кстен способуспензии митковременнойв течение 2дующего ее нчение 20 мин7 11) .ко в процевысвобождаасщенляютнижению егное содержлот - кйА отеи в пу- обоС имерпри15 ссе обработются протеапротеин, что выхода. Пание рибонусоставляет и сусы, ко- привои этом леино- более обуся ис особ со из с е наполучения ержанием спенэии мик ревания прис последуюродукта - Данный споИзвестен также сппротеина с пониженнымнуклеиновой кислотыроорганизмов путем еопределенных значениях рщим выделением целевогопротеина и 5-нуклеотидов 25 Изобретение отлогической промышлти к получению прмикроорганизмов снием вмер долучениеления нИэвена иэ стем краработкии послено в терН 4,5 Однапензииторые рдит к состаточвых кис соб предусматривает обработку суспензии микроорганизмов при 60-140 С и при рН 8,0-11 Г 21.Недостатком его являетсв значительной мере образунуклеиотиды за счет расцепбонуклеиновых кислот.Цель изобретения - снижение содержания нуклеиновых кислот в протеине с одновременным получением 5 нуклеотидов в среде.Поставленная цель достигается тем, что нагревание суспензии осуществляется в течение 2-15 ч при температуре 63-67 оС и рН 7-8,5, после чего в нее вводят суспензию солодовых рост ков или их экстракт и смесь кипятят в течение 0,5-5 мин. Согласно предлагаемому спос нуклеиновая кислота расщепляет ключительно на 5 -нуклеотиды, при этом не образуется никаких 2 и/или 3 -нуклеотидов. При этом рещающее зн чение имеет соблюдение точных температурных границ 63-67 оС, преимущественно 65 оС. Необходимая длительность нагревания зависит от применяемого микроорганизма,в частности от содержания в нем эндогенных нуклеазе 884574нов и колеблется в основном от 20 мин до 20 ч.Способ преДусматривает использование всех видов микроорганизмов, т.е. дрожжей, бактерий, грибов и т.д,Так, в качестве дрожжей используют Ьассйагоаусеь сегеч 1 ь 1 ае, Сапс 11 да бо 1- 01 п 11, в качестве микробактерий Мосагс 11 а егу 1 горо 11 в, Аьрегд 111 ць п 19 ег для плесневых грибов.Микроорганизмы используются как обработанные, например высушенные 0 в мягких условиях или лиофилиэированные одноклеточные, либо необрабо-. танные. Согласно данному способу длительность нагрева снижают путем введения биологических препаратов, содер жащих рибонуклеаэу, например солодовые ростки трав и зерновых, в частности ростки солода или экстракты из них.1ФСнижение содержания ВМА в одноклеточном протеине достигает до 0,2. вес.потери протеина незначительны йвыход его практически достигает 90 и выше. Особое преимущество способа заключается в том, что рибонуклеиновая 25 кислота практически полностью расщепляется до 5 -нуклеотндов,. которые сами по себе являются достаточно ценными веществами. Кроме того, фильтрат, используемый для получения нуклеоти- З 0 дов после отделения протеина, можно снова использовать для выращивания микроорганизмов с получением нуклеиновых кислот , т.е. таким образом, получается практически циркуляционный цикл нуклеотидов. Одновременно микроорганизмы для нового роста используют имеющиеся в растворе составные части клеток, остатбчный растворимый протеин, и т.п., что приводит к снижению используемых при выращивании микроорганизмов добавок биотина и хпэожжевого экстракта. Получаемый протеин по предлагаемомуспособу более чистый, лучше усваивается, содержит детергенты солей илиВМА, не имеет запаха и может бытьиспользован в качестве пищевого продукта.П р и м е р 1. 200 л водной суспензии приведенных в табл.1 микроорганизмов с содержанием сухой массы15-20 нагревают до 65 С и 15 ч выдерживают гри этой температуре приперемешивании. рН поддерживают между 7-8,5 путем добавления МеОН. Затем смесь кратковременно кипятят исырой протеин отделяют и сушат.Выход составляет 25"32 кг сырогопротеина. Табл.1 показывает содержание ВМА в исходном материале идостигнутое при этом расщепление ВМА.Пример 2.а)3 кг солодовых ростков измельчают, добавляют 30 л НО и 40 мин выдерживают при 65 фС. Полученную суспензию непосредственно или после отделения нерастворимых элементов ростков солода на центрифуге применяютв следующем процессе.б)По 200 л суспензии таких жемикроорганизмов, как и в примере 1 стаким же содержанием сухих веществ,нагревают до 65 С, добавляют приготовленную суспенэию солодовых ростков или экстракт (пример 2 а) и затем смесь нагревают 2-15 ч при 65 С.Затем обработку проводят как в примере 1. Выход составляет 25-35 кг сырого протеина, среднее содержаниечистого протеина около 70,Табл.2 показывает достигнутоерасщепление ВМА, Выхбд 5 -нуклеотидовпри примерном 10-ном содержании РМАв сухом продукте 7-800 г каждого изчетырех различных 5 -нуклео=идов, применьшем содержании ВМА в исходном материале они были соответственно ниже.884574 ЮРо во ас М Р дРоо фЮ фЪ еЧ с с с й Оои1 11 1 1о с И оЯ й 1 1 1 1 а 99 Още оР аО Р У Е ВВ 1 1 1 1 1 1 1 1 Фц 1 11 1г 1 9 Н с Э О Р 1 с е З 1 1 1 1 1 1 1 з аоО О ое И884574 Таблица 2 Биомасса по примеру 2 Разложение ЯМАэкстрактом ростков солода гощусеь сегеч(ь 1 аесаг 1 ьЬегцепь 1 а 5 ассЬа 10090 Сап 01 с 1 а Ьо 141 п 11 (примерно возраст 14 мес.)йосагд 1 а егуйгоро 11 ьВас 111 цв сегець (возраст 1 год)51 гер 1 ососсць 1 асса 11 ьРьецдощопаь Г 1 цогеьгепь 26 100 30 100 70 ееформула изобретения 25 Составитель М.ЛаринаТехредЖ.Кастелевйч Корректор Н.Стец Редактор Р.Цицика Заказ 10272/89 Тираж 531 ПодписноеВНИИПИ ГосударсТвенного комитета СССРпо делам изобретений и открытий113035, Москва, Ж, Раушская наб., д.4/5Ю филиал ППП "Патент", г.ужгород, ул.йроектная,4 Способ получения протеина из суспензии микроорганизмов путем ее нагревания при определенных значениях рН с последующим выделением целевого продукта и 5 -нуклеотидов, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью снижения содержания нуклеиновых кислот в протеине с одновременным повышением выхода 5 -нуклеотидов, нагреваниесупензии осуществляют в течение 215 ч при температуре 63-67 оС и рН7-8,5, после чего в нее вводят суспенэию солодовых ростков или их экстракти смесь кипятят в течение 0,5-5 мин. Источники информации,принятые во внимание при экспертизе1. Патент США 9 3720585,кл. 260-112, опублик.1973.2. Патент Великобритании М 1372870, кл. С 6 Г, опублик.1974 (прототип).