Способ получения анионообменника

Союз СоветскикСоциалистическикРеспублик ОП ИСАНИ ЕИЗОБРЕТЕН ИЯК АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ 1 1753458 ФЬ(51) М КзВ 01,1 19/04 Государственный комитет Опубликовано 07.08.80. Бюллетень29Дата опубликования описания 15.08.80по делам изобретений и открытий(72) Авторы изобретения В. К, Каграманова, С. Н. Бубенщикова и Л. А. Баратова Московский ордена Ленина и ордена Трудового Красного Знамени Государственный университет им. М. В, Ломоносова(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ АНИОНООБМЕННИКА 10 1Изобретение относится к способам получения ионообменных сорбентов и может быть использовано в химии, биохимии, молекуляр ной биологии, в микробиологической и медицинской промышленности.Известны способы получения ионообменных пелликулярных сорбентов и сорбентов с контролируемой поверхностной пористостью 1.Сорбенты, получаемые при этом, обладают малой емкостью и непригодны для разделения сложных смесей высокомолекулярных природных соединений. Наиболее близким к описываемому изобретению по технической сущности и достигаемому результату является способ получе ния анионообменника, заключающийся внанесении соли четвертичного амина (триметилоктиламмонийхлорида) на гранулы хлортрифторполиэтилена в хлороформе с последующим растиранием суспензии для получения мелкодисперсной и однороднойфазы с диаметром частиц до 10 мкм 2,Указанный способ характеризуется необходимостью использования дефицитных реагентов и сложностью операции получе 2ния мелкодисперсных частиц сорбента. Кроме того, этот способ не позволяет получатьанионообменники, обладающие длительнымсроком службы, поскольку в процессеэксплуатации происходит постепенное вымывание жидкого амина с поверхности частицсорбента. Последнее обстоятельство обуславливает изменение емкости сорбента иухудшение других характеристик, что приводит к получению невоспроизводимых результатов,Целью изобретения является получениеанионообменника с длительным сроком службы, повышение экономичности и упрощениеспособа.Поставленная цель достигается тем, чтогидрофобизированный инертный носитель,например, силилированного силикагеля обрабатывают твердой солью триметилцетиламмонийбромида в хлороформе в количестве 19 - 29% от веса носителя в течение 20 -24 с.2 о Отличительным признаком способа является обработка гидрофобизированного силикагеля твердой солью триметилцетиламмонийбромида. Другое отличие заключаетсяв том, что силикагель обрабатывают т,иметилцетиламмонийбромидом в концентрации его 19 - 29% от веса силикагеля в течение 20 - 24 ч.Технология способа заключается в следующем,Силикагель силилируют триметилхлорсиланом в смеси с гексаметилдисилазаномв течение 1 - 2 ч при комнатной температуре, Далее силикагель обрабатывают твердой солью триметилцетиламмонийбромида,причем соотношение амина к силикагелю может быть различным в зависимости от тре- фбований, предъявляемых к емкости получаемого анионообменника, Оптимальным является использование триметилцетиламмонийбромида в концентрации 19 - 29% от весасиликагеля, так как при меньшем количестве анионообменного покрытия получаютсясорбенты, обладающие малой емкостью, непригодные для разделения сложных многокомпонентных смесей. Так, попытка использования этих сорбентов для разделения смеси, содержащей более трих олигонуклеотидов, не привела к успеху,При большем же, чем 29%, весовом содержании три метил цетиламмонийбромидав смеси толщина слоя анионообменного покрытия получается слишком большой, в результате чего значительно увеличиваетсяпуть диффузии молекул анализируемых веществ и их сорбция. Это приводит к размыванию зон сорбции, увеличению времениудерживания веществ на колонке и удлинению самого процесса разделения, ЗОПродолжительность обработки силика.геля триметилцетиламмонийбромидом определяется составом реакционной смеси и должна быть тем больше, чем меньше соотношение амин:силикагель. При 19%.ном содержании амина в смеси оптимальное время об 33работки составляет 24 ч, при 29%.ном содержании - 20 ч. Меньшая продолжительность обработки приводит к неполному покрытию частиц силикагеля анионообменнымслоем, большая же продолжительность прак- юфтически не влияет на свойства получаемогоанионообменника и нецелесообразна из-заувеличения затрат времени на производствосорбента. Пример 1. Суспензию 25 г силикагеля (тип Н, 40 мкм, фирма Мерк, ФРГ) в 75 мл толуола обрабатывают 2,5 г триметилхлорсилана и 2,5 г гексаметилдисилазана и перемешивают в течение 2 ч при комнатной температуре, После этого силилированный силикагель фильтруют, промывают хлороформом и метанолом и высушивают в течение 10 ч при 100 С и 1 мм рт. ст.К 25,6 г силилированного силикагеля приливают раствор 6 г триметилцетиламмонийбромида (фирма Хемапол, ЧССР) в 60 мл хлороформа и энергично перемешивают в течение 20 ч до загустения массы. Для полного удаления хлороформа сорбент высушивают в вакуум-эксикаторе при 25 С.Пример 2. Суспензию силикагеля в хлороформе обрабатывают триметилхлорсиланом и гексаметилдисилазаном по режиму, описанному в примере 1. Затем к 14,7 г силилированного силикагеля приливают раствор 6 г триметилцетиламмонийбромида в 60 мл хлороформа и энергично перемешивают в течение 24 ч, после чего дальнейшие операции проводят согласно примеру 1.Предложенный анионообменник был применен для разделения различных смесей олигонуклеотидов. В таблице приведено изменение величины времени удерживания олигонуклеотида д(рТ-А-б-Т) и величины стандартного отклонения при количественном определении этого олигонуклеотида на колонках (2,4 мм Х 25 см) с известным и полученным анионообменником в условиях элюции градиентом концентрации ацетатаммонийного буфера (0,1 - 0,8 М, рН 5,0),Результаты испытания свидетельствуют о том, что хроматографические характеристики полученного анионообменника практически не изменяются после шестимесячной его эксплуатации, в то время как известный сорбент оказывается непригодным в указанных условиях уже после трех месяцев его использования.Условные обозначения, принятые в структурных формулах олигонуклеотидов, приведены на стр.5753458о,г ФЦ бО яо уа4 иИ фиг ч Р,10005 1 Рслактор Л Курасов3 аьаз 4954ЦНИИпо113035,Филиал П 1 Составитель О а Техред К. ШУфр Тираж 809 ПИ Государственного ко делам изобретений и Москва, Ж - 35, Раушск 1 П Патент, г. Ужгород