(22r)-3, 5-цикло-5 -холестан-6, 24-дион-22-ол, проявляющий фиторостостимулирующую активность и способ его получения

СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИХРЕСПУБЛИК 76 15)5 С 07 .) 9 К 35 ПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕН К АВТО У СВИДЕТЕЛЬСТВУ а -ХОЛЕСТАНЛЯЮЩИЙ ФИИРУЮЩУЮ ЕГО ПОЛУЧЕА естве фиторостоущность изобре а,5-циклос выход 8100, т, пл.-изоксазолинил олестан-б-он. Рер, Условия реакРенея, в спирте в ксусной кислоты. сти мул и рую щую и. ф-лы, 4 табл. вский, Фс, 497. Изобретени номусоединени лоа -холеста фито ростост жет накати пр и способу его одные фито гетероауксин оторый проявляет щую активность и мо ельском хозяйстве,Известны при иббереллин (И) (1) ик новом о (22 В)-3 22-олу ф ероид-цикулы (1): имулирую- лменение в полученигормонь (1 И) (2): ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМПРИ ГКНТ СССР(71) Институт биоорганической химии Н БССР(56) Муромцев Г. С. Агнистикова В, Н. Гиббереллины - Москва, 1984, с. 208,Гэлстон А. Девис П. Саттер Р, Жизнь зеленого растения. Москва, 1983, с. 262.Либберт Э. Физиология растений. Москва, 1976, с, 361,Абагп 6, Магц 1)або К Рпусоспеп), 1986, Ч.25, р. 1787.Мог 1 К. ЯаКаКИЬага М. ОКаба К. ТетгаЬеб гоп 1984, Ч. 40, р, 1797.Жирмунская Н. МЗубкова Н. Ф, Овсянникова Т, В, Методические рекомендации по проведению лабораторного скрининга синтетических регуляторов роста растений - Черкассы 1985 с. 28.Кп 119 И В. Е. Апп. Арр. В 1 б, 1965, Ч. 63, р. 211.Шабельская Э. Ф. Санько А. Н., Индивидуальные задания по физиологии растений на полевой практике, Минск,1982 с, 126.Физер Л. Физер М. Стероиды,Москва, 1964, с, 330.В. Б. Прозоро армакология и токсикология, 1978(54) (22 Й)-3 а,5-ЦИКЛО6,24-ДИОН-ОЛ, ПРОЯВ ТО РАСТО СТИ МУЛ АКТИВНОСТЬ И СПОСОБ НИЯ(57) Использование: в кач регулирующего средства, С тения; продукт (228)- -холеста н-б,24-дион-ол, 152 - 154 С. Реагент 1: 20 (228)-3 а,5-циклоа -х агент 2: водород - газооб ции: в присутствии никеля присутствии борной или у Продукт повышает росто активность на 15 - 6400. 2 с.НО",НО" О ОК 5-цикла вызываета длинуастений ф проявляющий фиторостостимулирующую активность.Однако применение гиббереллина на зерновых и зернобобовых, хлопке, овощных культурах не дает устойчивых результатов (1). Гетероауксин быстро разрушается под действием ИУК-оксидазы. При этом при окислении гетероауксина могут включаться процессы торможения роста (3). Кроме того, корни более чувствительны к ауксину, чем стебли, Так, обработка ауксином интактных стеблей, как правило, не вызывает их дополнительного прироста (2).Известны также природные фиторостостимуляторы, являющиеся аналогами описываемого соединения по структуре, наиболее активный из которых - брассинолид (И) (4). НО Брассинолид проявляет активность в отношении многих сельскохозяйственных культур (4), однако исключительно низкое содержание его в природных источниках и сложность многостадийного синтеза (5) делает его недоступным для широкого применения в практике.Цель изобретения - новый фиторостостимулятор, обладающий более высокой активностью по сравнению с известными препаратами, и способ его получения.Цель достигается (22 Я)-3 а,5-циклоа -холестан.24-дион-олам формулыи способом его получения.Указанное соединениеполучают путем восстановительного расщепления в присутствии борной или уксусной кислоты 20 - изоксазолинилстероида (Ч) по следующей схеме: Показано, что (228)-3 а холестан,24-дион-олмулирующее действие н междоузлия и общую длину 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 ли и превосходит стимулирующее воздействие (6), вызываемое гиббереллином на 10 - 15% (по отношению к контролю 23 - 38%).В тесте на проростках пшеницы (7) исследуемое вещество (1) оказывает стимулирующее воздействие на рост корней, превосходящее действие гиббереллина на 3 - 5% (по отношению к контролю 15%), Найдено, что в тесте на прорастание семян томата (8) вещество (1) оказывает стимулирующее воздействие на энергию прорастания семян, превосходящее действие гетероауксина на 12% (по отношению к контрол ю 67%).Сущность изобретения подтверждается примерами конкретного выполнения.П р и м е р 1. Синтез соединения , Стероидный изоксазолин (Ч) (0,26 г, 0,0005 моль) в 40 мл этилового спирта и 0,3 г (0,005 моль) борной кислоты добавляют к активированному никелю Ренея (каталитические количества). При комнатной температуре в реакционную смесь пропускают водород в течение 6 ч. Никель отфильтровывают, упаривают спирт. Полученный продукт растворяют в эфире, промывают водой, сушат Ма 2304, Растворитель упаривают, хроматографируют на силикагеле, Получено 0,21 г (81%) (22 В)-3 а,5-цикло 5 а -холе- стан,24-дион-ола . Т, пл. 152-154 С (гексан-эфир). ИК-спектр ( ю, см ): 3460, 1700, 1690. Масс-спектр (тй): 412 (М), 394 (М-Н 20), 352, 327, 284, ПМР-спектр (СОС 3, д, м.д.): 0,76 с (ЗК 18-Ме), 0,96 д(ЗН, 21-Ме), 1,01 с (ЗН, 19-Ме), 1,13 д 6 Н, 26 и 27-Ме) 2 42 м (2 Н, с Н), 2,48 м (2 Н, с Н), 2,63 м(1 Н, С Н),4,12 м(1 Н, С Н).П р и м е р 2. Синтез соединения , Стероидный изоксазолин (Ч) (0,09 г) в 15 мл этилового спирта и 0,1 мл уксусной кислоты добавляют к активированному никелю Ренея (каталитические количества). В реакционную смесь пропускают водород в течение 5 ч, Никель отфильтровывают, спирт упаривают. Полученный продукт растворяют в эфире, промывают раствором ИаНСОз. Сушат над МагЯ 04. Растворитель упаривают, хроматографируют на силикагеле. Получено 0,73 г (84%) (22 В)-3 а,5-циклоа -холестан,24-дион-ола . Т. пл, 152- 153 С (гексан-эфир),П р и м е р 3. Испытание биологической активности соединения ,Изучалась биологическая активность (фиторостостимулирующая) (228)-3 а,5- циклоа -холестан,24-дион-ола. Исследования проводили в лабораторных условиях на растениях фасоли, пшеницы и семенах томата, Использовалась системабиотестов для определения фиторосторегулирующей активности, эталоном служилифитогормоны гиббереллин и гетероауксин.Тест на проростках фасоли (6). 5Сосуды набивают почвой, высаживаютпо 5 семян фасоли в каждый сосуд, Через3 - 4 дня после появления всходов отбираютодинаковые растения фасоли, Условия выращивания; освещение 4 - бтыс,люкс, световой день - 16 чтемпература 20 - 23 С.Обработку проводят тогда, когда 2-емеждоузлие(между первой парой листьев ипервым тройчатым листом) находится в самом начале роста и не превышает 1 - 2 см., Учет проводят через 2 недели после обработки препаратами.Результаты исследований представлены в табл. 1. 20Как видно из полученных данных, (22 В)3 и,5-цикло а - холестан-б,24-дионол вызывает стимулирующее воздействиена длину 2-го междоузлия и общую длинурастений фасоли и превосходит стимулирующее воздействие, вызываемое фитогормоном гиббереллином.Тест на проростках пшеницы,Тест на проростках пшеницы (7) предназначен для обнаружения ретардантов для 30однодольных, но одновременно дает возможность выявить стимуляторы роста надземной массы и корней,Семена пшеницы равномерно раскладывают в кюветы на влажную фильтровальную бумагу, покрытую писчей бумагой,накрываютстеклом и выдерживают втермостате 3 суток при 24 С, Одинаковые проростки пшеницы высаживают в отверстиявинипластовых крышек на сосуды с водопроводной водой объемом 500 мл. Через3 - 4 суток воду в сосудах заменяют питательным раствором с добавлением препарата.Контроль - питательный раствор без 45препарата. Питательный раствор готовят наводопроводной воде с добавлением следующих солей; г/л: Са(МОЗ)2 - 1,33; КН 2 РО 4 -0,33; М 9504 - 0,17, В каждый сосуд высаживают 10 проростков, 2 сосуда на вариант, 50Условия выращивания; освещение 4 - б тыс,люкс, световой день - 16 ч, температура22 - 24 С, Измерения проводят через 20дней от начала опыта, Полученные результаты приведены в табл, 2. 55В результате исследований установили,что в тесте на проростках пшеницы исследуемое вещество оказывает стимулирующеевоздействие на рост корней. Тест на прорастание семян томата (8).На дно чашек Петри (диаметром 9,5 см) на кружок фильтровальной бумаги помещают по 20 семян томата в каждую чашку и приливают по 10 мл исследуемого вещества, накрывают и ставят в теплое место. Спустя б дней смотрят энергию прорастания семян (табл. 3).На основе полученных данных видно, что исследуемое вещество оказывает стимулирующее воздействие на энергию прорастания семян томата,Данные по сравнению ростостимулирующего действия гиббереллина и эпибрассинолида.Таким образом, из таблицы видно, что гиббереллин и эпибрассинолид действуют практически одинаково, а значит фиторостостимулирующее действие изученных соединений выше, чем брассинолида и эпибрассинолида,Таким образом установлено, что: 1) (22 В)-3 а,5-циклоа -холестан,24-дион - 22-ол повышает ростостимулирующую активность по сравнению с контролем на 15 - 64.2) (22 В)-3 а,5-циклоа -холестан,24-дион-ол проявляет фиторостостимулирующую активность, превосходящую на 5 - 15% активность природных фитогормонов гиббереллина и гетероауксина,Показатель .о;, определенный по таблице Прозоровскогоо.,=870 (420 - 320) мг/кг при р0,05,Формула изобретения 1. (22 В)-3 а,5-циклоа -холестан,24-дион-ол формулы0 оОпроявляющий фиторостостимулирующую активность.2, Способ получения (22 В)-3 а,5-циклоа -холестан-б,24-дион-ола, о т л и ч аю щ и й с я тем, что(22 В)-20-(3-изопропилизоксазолин-ил)-3 а,5-циклоа -прегнан-бон подвергают васс- эновительному расщеплению на никеле Ренея в присутствии борной или уксусной кислоты с последующим выделением целевого продукта.1761761 Таблица 1 Таблица 2 Таблица 3 Табл ицэ 4 Составитель И.федосееваТехред М.Моргентал Корректор М.Ткач Редактор Т.Иванова Заказ 3233 Тираж Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раушская наб., 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул,Гагарина, 101