Способ культивирования молочнокислых бактерий
Похожие патенты | МПК / Метки | Текст | Заявка | Код ссылки
Номер патента: 1677071
Авторы: Гаврилова, Гребеньков, Комарова, Фрыгина
Текст
(зцз С 21 й 1/20 ерментных Мол на среду тивиров Вас, зц щивают обычно ния мол деляют ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМПРИ ГКНТ СССР К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТ 21) 4496255/13(71) Вышневолоцкий завод фпрепаратов(56) Авторское свидетельство СССРВ 929546, кл. С 12 И 1 ЛО, 1983.(54) СПОСОБ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ МОЛОЧ НОКИСЛ ЫХ БАКТЕРИЙ Изобретение относится к биотехнологии, в частности к способам культивирования молочнокислых бактерий, предназначенных для биологического консервирования кормов.Цель изобретения - повышение выхода биомассы.Сущность способа заключается в следующем.Было установлено, что введение в среды для культивирования молочнокислых бактерий биомассы Васоз зцЬТ 3 265 ВКПМ Ь В, являющейся отходом производства рибоксина-субстанции и норизина, приводит к повышению выхода биомассы молочнокислых бактерий,очнокислые бактерии высевают , обычно используемую для их кульания, обогащенную биомассой Ьз 265 ВКПМ М В, и выра- в оптимальных условиях в течение принятого времени для выращиваочнокислых бактерий. Биомассу оти на ее основе готовят препаратыАХ 1677071 А 1 хноло- лочноых для ормов шение ования . ельной рода и едение В. рибоке 15(57) Изобретение относится к биоте гии и касается культивирования мо кислых бактерий, предназначенн биологического консервирования к Цельюизобретения является повы выхода биомассы. Способ культивир молочнокислых бактерий на питат среде, содержащей источники угле азота, включает дополнительное вв биомассы Вас 0 з зоЬз ВКПМ М являющейся отходом. производства сина или норизина в количеств 3,0 мас., 3 табл. для биологического консервирования кормов,Биомасса Вас. зоЬтз 265 ВКПМ МВобразуется как отход производст-. ва рибоксина-субстанции и норизина, предусматривающего переработки нативного раствора после отделения биомассы фильтрацией или сепарированием из скоагулированной культуральной жидкости.Биомасса Вас, зцЬт 3 265 ВКПМ В Вхарактеризуется содержанием следующих компонентов в пересчете на абсолютно сухой вес), мас,%:Сырой протеин 21,0-25.0 Жиры и липиды 6,0-8,6 Зола 30,0-42,0 Общий азот, мгl г 35,0-51,0 Нуклеиновые соединения 2,4-4,65 в том числе:Инозин 2,3-3,3 Гипоксантин 0,02-0,74 Гуаноин 0,06-0,56 Аминокислоты 2,84-3,79в том числе:Глицин 0,58 - 0,68 Валин 0,43 - 0.,45 фенилаланин 0,29-0,38 В соответствии с технологическими схемами производства рибоксина и норизина бактериальная биомасса рассматривается как побочный продукт, не утилизируется и подлежит вывозу и захоронению,При осуществлении предлагаемого способа биомасса Вас. зцЬт 1 Из 265 ВКПМ В Ввводится в состав сред для культивирования молочнокислых бактерий в количестве 1,5-3,0 мас.% (в пересчете на абсолютно сухое вещество).Влияние концентрации биомассы штамма Вас. зцЬШз 265 в питательной среде для культивирования молочнокислых бактерий на выход бактериальных клеток показано в табл. 1.Представленные данные показывают, что избыток биомассы Вас, зцЬ 13 265 ВКПМ М Вприводит к снижению выхода биомассы молочнокислых бактерий, а в ряде случаев вообще ингибирует их,рост.Исследованиями заявителя показано, что молочнокислые бактерии не могуа расти на среде, содержащей только биомассу Вас. зцЬтИз 265 ВКПМ К. Вв качестве единственного источника питания,Возможное повышение выхода клеток молочнокислых бактерий при осуществлении предлагаемого способа связано не с использованием биомассы Вас, зцЬбНз 265 ВКПМ М Вв качестве пищевого субстрата; а со стимулирующим действием на рост молочнокислых бактерий.Последнее подтверждается тем, что увеличение концентрации субстрата не приводит к значительному повышению выхода молочнокислых бактерий.Данные табл. 3 показывают, что увеличение концентрации гидролизата кукурузного крахмала приводит к приросту биомассы значительно меньшему, чем обеспечиваемый дополнительным введением биомассы Вас. зцЬбИз 265 ВКПМ ч. В. П р и м е р 1, Культуру РгоропЬас 1 егцгп зЬегаапИ культивируют на среде, содержащей, вес.%:Кукурузный экстракт (по а,с.в) 1,5 Глюкоза 2,0Кобальт хлористый 0,001 Сульфат аммония О,З Вода До 100 Культивирование осуществляют в ферментаторе объемом 250 л, заполненном 200 л среды при 29 С. Посевная доза состав 9 ляет 0,8 л культуры с титром 1,4 х 10 кл/мл. Длительность культивирования 18 ч при периодическом перемешивании.В описанных условиях параллельнокультивируют тот же штамм, однако выра 5 щивание его проводят на среде того же состава, дополненной 1,5 мас. (по абсолютносухому весу) биомассы Вас. зцЬ 11 з265 ВКПМ М В. Всего было внесено7,1 кг влажной биомассы.10 Выход клеток Ргороп 1 ЬастегцазЬеппапИ при выращивании на среде с биомассой Вас. зцЬЩ 1 з 265 ВКПМ Ь В составляет 3,1 х 10 клеток/мл а на средебез биомассы (контроль) 1,4 х 10 клеток/мл.15 Превышение выхода клеток в опыте по сравнению с контролем составляет 121,4%,П р и м е р 2. Культуру Ргороп 1 ЬастегцвзЬеппапИ выращивают в ферментаторе объемом 20 м, заполненном 10 м среды слез20 дующего состава, вес.о : гидролизаткрахмала кукурузного 3,5 (в пересчете наабсолютно сухой вес); кукурузный экстракт2,5 (в пересчете на абсолютно сухой вес);кобальт хлористый 0,001; сульфат аммония25 О,З; вода. Перед посевом среда содержитредуцирующих веществ 2,1 о , аминногоазота 61 о , начальный рН равнялся 6,9, Выращивание осуществляют при 29 С в течение 22 ч,30 Параллельно в аналогичных условияхвыращивают тот же штамм бактерий, но всостав среды дополнительно вносят биомассу Вас, зцЬтйз 265 ВКПМ М Ввколичестве 2,6 мас.% (по абсолютно сухому35 весу). Всего вносят 1080 кг влажной бактериальной биомассы.Выход клеток пропионовокислых бактерий на среде с биомассой Вас. зцЬИ 1 з 265составляет 1,91 х 10 клеток/мл, а на среде940 беэ добавления биомассы Вас. зцЬИз 265ВКПМ 1 ч. В(контроль) 0,87 х 10 клеток/мл. Превышение выхода клеток в опытепо сравнению с контролем составляет119,5 .45 П р и м е р 3, Культуру 1 астоЬассег 1 цтреп 1 оасебсца выращивают в ферментатореобъемом 250 л, заполненном 200 л питательной среды, содержащем, вес.о ; кукурузныйэкстракт 1,5 (по а.с,в,); сахарный песок 1,0;50 вода. Выращивание проводят втечение 24 чпри 31 ОС,Параллельно в аналогичных условияхвыращивают тот же бактериальный штамм,но в состав среды дополнительно вносят55 3,0 мас,о(по абсолютно сухому весу) биомассы Вас. зцЬИз 205. Всего вносят 14,7 кгвлажной биомассы,Выход клеток молочнокислых бактерийна среде с биомассой Вас. зцЬЮ 1 з 265 ВКПММ Всоставляет 1,61 х 10 клеток/мл, аЯ1677071 вышение выхода клеток в опыте по сравнению с контролем составляет 73,5,Таким образом, использование предлагаемого способа позволяет повысить выход биомассы молочнокислых бактерий разных родов при выращивании на средах различного состава.По сравнению с известным способом выход биомассы по титру жизнеспособных клеток молочнокислых бактерий при использовании предлагаемого способа в среднем повышается на 60,на среде беэ добавления бактериальной биомассы 1,05 х 10 клеток/мл, Превышение выхода клеток в опыте по сравнению с контролем составляет 53,3.П р и м е р 4. Культуру Зтгертососсоз 5 1 ас 11 з сПазтас 1 сцз выращивают в фермента- торе объемом 250 л, заполненном 200 л питательной среды следующего состава, вес.: гидролиэат кормовых дрожжей 2,0 (в пересчете на сухое вещество); гидролиэат 10 кукурузной муки 1,6 (по редуцирующим веществам); кукурузный экстракт 0,3; вода.Выращивание проводили при 36 С в течение 18 ч.Параллельно в аналогичных условиях 15 проводят культивирование того же штамма, но в состав среды дополнительно вносят 2,5 мас. (по абсолютно сухому весу) биомассы Вас. зиЬЮИз 265 ВКПМ М В.Выход клеток молочнокислых бактерий 20 на среде с биомассой Вас, зцЬсП 1 з 265 , ВКПМ М Всоставляет 1,96 х 10 клеток/мл, а на среде беэ добавления бактериальной биомассы 1,13 х 10 клеток/мл. Пре 25 Формула изобретения Способ культивирования молочнокислых бактерий на питательной среде, содержащей источники углерода и азота, отл и ч аю щ и й с я тем, что, с целью повышения выхода биомассы, в питательную среду дополнительно вводят биомассу Вас 1 оз зцЬтПз ВКПМ й В, являющуюся отходом при производстве рибоксина или нори- зина, в количестве 1,5-3,0 мас. на объем среды. Таблица 1 Выход биомассы молочнокислых бактерий (по титру жизнеспособных клеток, х 10 клетокмл к ль альной жи кости0,86 0,92 1,02 1,06 1,17 0,69 0,91 1,59 2,07 2,01 1,68 1,21 0,47 0,54 0,62 0,77 0,72 0,40 Таблица 2Накопление биомассы молочнокислых бактерий при различных концентрациях субстрата Выход биомассы молочнокислых бактерий (по титру жизнеспособных клеток), х 10 клеток/мл культуральной 9 жи костиКонцентрация субстрата (по редуцирующим веществам),отн. фЕ ремоасес 1- Е р 1 апсагцпз сит Зк асбз Рг. зЬегвапП 0,91 0,84 0,42 О;90 0,96 0,87 1,01 0,42 100 2,0 0,87 0,94 1,06 0,76 0,91 0,71 0,51 0,48 0,53 101 101,5 1022,02,032,04 П р и м е ч а н и е. Все молочнокислые бактерии выращивали на среде следующего состава, вес.;6: гидролизат кукурузного крахмала 4,0; кукурузный экстракт 2,5; аммоний сульфат 0,3; кобальт хлористый 0,001; марганец сернокислый 0,016; вода до 100,0. Выращивание осуществляли при 31 С в течение 24 ч,1677071 Продолжение табл, 2 реде, содержащеи, ммоний сульфат О,Э; Выращивание провогидролизат кукурузокислые бактерии выращивали на сахмала 4,0; кукурузныЙ зкстракт 2,5;ц сернокислый 0,016; вода до 100,0,понентом среды (субстратом) считала тнмулирующее влияние добавки биомассы Вас.ецьсП 1 е 26 в питательные среды разного составаасСоЫ сеьцш р 1 апсацш НН 11/16 ЬассоЬас еп.цшгепсоассдсцш; сгерсососце 1 асЫэ 1 аеСаЯсц Ргордоп- ЬасЪегхцтп еЬепаапь Гндролиэат картоФельного крахмала 2 (по редудирующим вещест" вамКукурузный экстракт 2,5 (йо сухим веществам) Кобальт хлористый 0,001 Сульат аммония 0,3 Вода до 100То же, с добавлением 2 Х (по абсолютно сухому несу) биомассы Вас. ецЪЪ 111 е 265Гидролнэат кукурузноймуки 1,5 (по редуцирующим веществам)Гидролизат кормовых дрожжей 2,0 (по сухому весу)Вода до 100То же, с добавлением 2 Я (по абсолютно сухому весу) биомассы Вас.ецЬ 111 е 265 Кукурузный экстракт 1,5 (по сухому весу)Сахарный песок 1,.0 Вода до 100То же с добавлением 2 Е (по абсолютно сухому весу биомассы Вас.ецЬЪ 111 е 265 0,84,8 82 нолочнокислые бактерии во всех случпри 31 С в течение 24 ч, Биомассу265 ВКЖ В Ввносили в видепорошка,Лрн аях выращивас. ецЬЪ 1 Басушенного Примечание,все молоч вес. : гидролизат кукурузного к кобальт хлористый 0,001; марган дили в течение 24 ч. Основным ко ного крахмала,ход биомассы молочнокислых бактерийизнеспособных клеток), х 10 клетокЯной жидкости
СмотретьЗаявка
4496255, 16.09.1988
ВЫШНЕВОЛОЦКИЙ ЗАВОД ФЕРМЕНТНЫХ ПРЕПАРАТОВ
ГРЕБЕНЬКОВ ВЛАДИМИР ИВАНОВИЧ, ФРЫГИНА АЛЛА ИВАНОВНА, КОМАРОВА ГАЛИНА ВАСИЛЬЕВНА, ГАВРИЛОВА НИНА НИКОЛАЕВНА
МПК / Метки
МПК: C12N 1/20
Метки: бактерий, культивирования, молочнокислых
Опубликовано: 15.09.1991
Код ссылки
<a href="https://patents.su/4-1677071-sposob-kultivirovaniya-molochnokislykh-bakterijj.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">Способ культивирования молочнокислых бактерий</a>
Предыдущий патент: Способ изготовления литых заготовок
Следующий патент: Способ подготовки твердого топлива к агломерации
Случайный патент: Способ получения материала на основе нитрида кремния