Препарат для индикации оксидазы микробов

(51)4 ЭОБРЕТЕН ИСА блас ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССРПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ Н А ВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТ(71) Кишиневский государственныймедицинский институт(56) Патент Англии У 1565675,кл. С 1 В, опублик, 1980.Андреева З.М, Система индикаторнаябумажная для идентификации энтеробактерий. - Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунологии, 1983, В 4,с, 20-23,(54) ПРЕПАРАТ ДЛЯ ИНДИКАЦИИ ОКСИДАЗЫМИКРОБОВ(57) Изобретение относится к о тимикробиологии, а именно к препаратам 801364636 А 1 для индикации оксидазоположительных групп микробовС целью повышения качества препарата для индикации оксидазы микробов препарат в качестве основы пчелиный воск, используемый как твердофазный носитель, консервант и стабилизатор, при следующем соотношении компонентов, мас.%: и-аминоэтилоксиэтиланилинсульфат,или М,И,Хф И -тетраметил-п-фенилендиамин, или М, И-диме тип-и-фениленди амин 7, 27- 10,91; пчелиный воск 89,09-92,72. Преимущество изобретения заключается в увеличении срока годности препарата, сохранении его чувствительности. Использование пчелиного воска обуславливает пишущие свойства препарата и снижает его себестоимость, 4 табл,1 - 13646Изобретение относится к микробиологии, а именно к препаратам для индикации оксидазоположительных групп микробов,Цель изобретения - повышение качества препарата.Предлагаемый препарат имеет формукарандаша для многократного примененения, обладающий пишущими свойствами на различных поверхностях (стекла,пластмассы, бумаги, полимера, фарфора и пр.), Нанесение штриха позволяет использовать минимальное количество и-аминоэтилоксиэтиланилин 15сульфата или Н,Н,Н,Н -тетраметил-и-фенилендиамин или Б,Ю-диметил-пфенилендиамина (0,00005 г 1, достаточное для индикации оксидазы микробов.В пределах указанных граничныхзначений ингредиентов получены препараты, позволяющие определить оксидазу микробов, составы которых приведены в табл,1.Препараты, полученные вне пределах 25граничных значений ингредиентов, имеют более низкую чувствительность,В качестве ингредиентов использованы п-аминоэтилоксиэтиланилинсуль"1 (фат или Н,Н,Ы ,М -тетраметил-и-фенилендиамин или М,М-диметил-п-фенилендиамин, представляющие собой порошки светло-коричневого цвета и пчелиный воскв твердом состоянии, растворимый в жирных маслах, т.пл, 62-64 С.Воск вносят в препарат в количестве 89,09-92,73 мас.7. как твердофазныйноситель, консервант и стабилизатор,что обуславливает пишущие свойства,обеспечивает увеличение срока "одности, сохранение его чувствительности табл,2. и позволяет использоватьминимальные количества реактива безпотерь, а следовательно, снижает се.бестоимость препарата.П р и м е р. В фарфоровую ступкуберут навеску воска 1 г и расплавляют над пламенем горелки. В расплавленный воск вносят навеску порошка иаминоэтилоксиэтиланилинсульфата 0,1 г,тщательно перемешивают, растирая пес- б 0тиком до получения карандашной массы.Полученной массе придают форму карандаша. После этого карандаш надписывают и используют для работы. Препаратдля индикации оксидазы микробов хранят при комнатной температуре неограничено долго.Для индикации оксидазы на поверхность стекла, бумаги, пластмассы,36 2фарфора, полимерной пленки делаютштрих карандаша, Затем бактериальную петлю изучаемой микробной культуры, снятую со скошенного агара, иликолонию смешивают со штрихом карандаша. При наличии оксидазы через 1 Ь 30 с происходит покраснение штрихаи культуры, а через 1 мин цвет меняется от синего до черного. При отсутствии оксидазы у микробов штрих неменяет свою первоначальную окраску(светло-коричневый цвет).Результаты сравнительного изучения чувствительности препарата дляиндикации оксидазы и СИБ-оксидазыв зависимости от сроков храненияприведены в табл.З.Из табл.З видно, что с увеличением сроков хранения чувствительностьпрепарата для индикации оксидазыьщкробов на протяжении 5 лет не меняет свои свойства, а при использовании СИБ-оксидазы ее чувствительность снижается, что статистическидоказано (Р ( 0,01 и Р ( 0,001),Результаты чувствительности препарата для индикации оксидазы микробов в зависимости от количественного содержания ингредиентов приведены в табл,4,Из табл,4 видно, что чувствительность препаратов с количественным соотношением ингредиентов в диапазонепредельных, включая и граничные зна"чения (препараты 1-9) превышает чувствительность препаратов, содержащихингредиенты вне диапазона граничныхзначений их количественного содержания (препарат А,Б,В,ГД,Е), что статистически достоверно (Р ( 0,05-Р (0,001).Препарат позволяет четко разграничивать группу оксидазоположительныхмикробов родов ЯЬгьо, Рзеийошопаз,А 1 са 1 гиепз, Аегошопаз, Юедззега отэнтеробактерий и других микроорганизмовПреимущество предлагаемого прела"рата заключается в длительном срокегодности, сохранении чувствительности при хранении, упрощении индикацииоксидазы микробов и удешевлении препарата.за счет минимального использования реактива. Формула из о бр ет ения Препарат для индикации оксидазымикробов, включающий и-аминоэтил364636 и-Аминоэ тил- оксиэтиланилинсульфатили Я,11,11,М -тетраме- тил-и-фенилендиамин, илиО,Н-диметили-фенилендиамин ОстальноеТаблица 1 Пчелиный воск, г Препарат и-Аминоэ тилоксиэ тиланилинсульфат или Б,Б,Я,Н - тетр аметил-и-фенилендиамин или Н, Я"диме тил-п-фенилендиамин, г абс. Х абс. 7. 1,02 7,27 0,08 7,73 1,015 0,085 0,09 8,18 1,0 8,63 0,095 1,005 9,09 0,1 1,0 0,105 9,56 0,995 0,990 0,985 10,0 0,11 10,45 10,91 0,115 89 09 0,12 0,98 70 70 0 0 1 г 19 20 614 2 года 1 О ода 268 . 100 6 год 268 100 261 ь реакции - резая;- положительнположительная Прим н и е, Интенсивно положнтель слаб рицательнаяоксиэтиланилинсульфат, или 0,11,Н , Н -тетраметил-п-феннлендиамин, или Я,Б-диметил-п-фенилендиамин и основу, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью повышения качества препарата, в качестве основы он содержит пчелиный воск при следующем соотношении входящих в нее ингредиентов, мас.Х:Пчелиный воск 89,09-92,73 10 9273 92,27 91,82 91,36 90,91 90,46 90,00 89,551364636 Т а б л и ц а 3 Статическиепоказатели Интервалынаблюдений Из них положительных Число испытаиных оксндазоположительныхмикробов СИБ-оксидаз а Препарата для индикации оксидазы микробовабс, Х+ш абс. 0 а 119 86,23+3 16 2,08 с 0,01114 66284,43 7,61 с 0,00116 9,301726 12,49 с 0,001 100,0+0,0 100,0+0,0 138 138 172 172 100,0+0,0 172 172 100,0+0,0 0 198 198 100,0+0,0 217 0 О 217 268 0 0 100,0+0,0 1000+00 268 268 268 Таблица 4 и-Аминозтилоксиэ тип анилин сульфатнли ЮЫН Нтетраметил-и-фенилендиамин илиЯМ-диметил-п-.фенилендиамин, г Пчелиный воск, г Препарат Количество испытанныхоксидазоплохительныхмикробов Статистические показатели ниХ полоки"тельных Х абс. Х абс. 94,55 32 65,30+8,41 4,13 с 0,001с 0,05со 05 49 1,04 А 0,06 5,45 Б 0,07 6,36 93,64 38 77,55+6,77 2,32 1,03 42 85,71+5,40 2,65 93,18 49 1,025 Е 0,075 6,82 100,0+0,0 100,0+00 1 ООВ 727 2 0,085 7,73 Э 009 8,18 4 0,095 8,63 92,73 1,02 49 1,015 49 1000100 1,0 1005 49 1000+0,0 100,0 фо,о 5 0,1 49 1,0 9,09 100,010,0 6 0,105 9,567 О 11 1 О О8 0,115 10,45 0,995 0,990 0,985 49 90,00 89,55 49 49 1 Оа,ата,а100,0+0,0 1 ОО,ОФО,О 49 49 9 О,2 10,9 1 Г 0125 11,37 0,98 89,09 49 88,63 49 88,18 4987,27 49 0,975 39 79 5916 45 Э,6 35 7143 т 764 3,74 28 5714 й 935 4,58 с 0,01 (0,00 с 0,00 Д О 131 82Е 014 127 0,97 0,96 1 мес 6 мес 1 г.од 2 года 3 года 4 года 5 лет 92,27 49 91,8149 91,36 49 90,91 49 90,46 49 ВНИИПИ Заказ 6539/20 Тираж 520 Подписное 1 роизв.-понигр, пр-тие, г. Ужгороц ул. Проектная 4