Способ анализа аминосахаров

СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛ ИСТИЧЕСНИХРЕСПУБЛИК О 9) Б,.122801 ЗОБРЕТДЕТЕЛЬСТВУ ПИ К АВТОРСКОМ ОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССРПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ(71) Всесоюзный научно-исследовательский институт биологического приборостроения(56) Огау В., Ьц Н., Сгасу Р, Разделение производных аминокислот методом высокоэффективной жидкостной хроматографии и их использование визучении строения пептидов и протеинов. - 1.СЬгошаСоаг., 1983, 270, р. 253-266;КМщ-Неап 8 Б., Наегй М. Применение высокоэффективной жидкостной хроматографии для определения аминокислот в природных водах.-1, 1 пГ.1, Епчгоп Апа 1. Селеш., 1983, ч. 15Кф 4, р. 309-318.(54) СПОСОБ АНАЛИЗА АМИНОСАХАРОВ(57 Изобретение относится к областианалитической химии, а именно к способу анализа аминосахаров. Цельспособа - повьппение его селективности. Способ осуществляют обработкойанализируемой пробы и -диметиламинобензальдегидом элюированием полученной смеси на хроматографической колонке, заполненной силикагелем с модифицированнойповерхностью. Элюирование ведут при рН 5-5,5. В качестве элюента используют следующийсостав, мас.Х метанол 66,0-77,0,додецилсульфат натрия 1,1-1,7, дигидрофосфат натрия 0,09-0,14, водаостальное. 3 ил.12280Изобретение относится к аналитической химии, в частности к высокоэффективной жидкостной хроматографии, и может использоваться в химических лабораториях при определенииаминосахаров в биологических и других объектах.Цель изобретения - повышение селективности анализа.На фиг,показана хроматограмма Оразделения аминосахаров на колонке.кислота 0,0004; вода остальное, расхоц элюента 1 мл/мин, давление200 атм: 1-п-диметилбензальдегид,2,3-маннозамин, 4,5-глюкозамин,б-галактозамин, 7-этаноламин. ЮНа фиг. 2 показана хроматограммаразделения аминосахаров с элюентомсостава, мас.%: метанол бб 0; додецилсульфат натрия 1,11; дигидрофосфат натрия 0,09; ортофосфорная кислота 0,0004; вода остальное (обозначения как на фиг. 1).На фиг, 3 представлена хроматограмма разделения аминосахаров сэлюентом состава, мас.%: метанол ЗО77,0; додецилсульфат натрия 1,7;дигипрофосфат натрия 0,14; ортофосфорная кислота 0,0004; вода остальное (обозначения как на Фиг. 1).Анализ проводят следующим образом;35Навеску и-диметиламинобензальдегида (п-ДМБА) 1 О мг растворяют в 1 млметанола. Анализируемую пробу илиотцельные навески аминосахаров маннозамина, глюкозамина, галактозамина и этаноламина (по 2 мг) смешивают и растворяют в 1 мл метанола.Кмл смеси добавляют 1 мл раствораи-ДБА в метаноле, выдерживают 20 минпри 100 С в термостате, после чегоохлаждают до комнатной температуры. Смесь п-ДМБА - производных аминосахаров и этаноламина разводят в 10 раз элюентом и вводят в хроматограф, проводят разделение на колонке 50 ультрасфер хр, длина колонки 25 см, внутренний диаметр 4,6 мм, зернение сорбента 5 мкм, привитая фаза аминопропил-силан, температура комнатная, давление 200 кг/см с элюентом, имею щим сс тав, мас.%: метанол 66,0-77,0; цодсцилсульфат натрия 1,11-1,7; дигидрофосфат натрия (ИаН РО) 0,0912 20,14; ортофосфорная кислота 0,0004;вода остальное. Элюент имеет рН=5,05,5, расход элюента 1 мл/мин, Детектирование разделенных компонентовосуществляют при длине волны 390 нм.Время анализа 18 мин.П р и м е р 1. Анализ проводят,используя в качестве элюента следующий состав, мас.%; метанол 71,50;додецилсульфат натрия 1-1,40; дигидрофосфат натрия (ИаН РО ) 0,11; вода остальное.Элюирование ведут при рН 5-5,5.Хроматограмма представлена нафиг. 1, из которой следует, что происходит полное и четкое разделениекомпонентов анализируемой смеси.П р и м е р 2. Анализ проводятс элюентом следующего состава, мас.%:метанол 66,0," додецилсульфат натрия1,4; МаН РО 0,11; вода остальное.Элюирование ведут при рН 5-5,5.На фиг. 2 приведена хроматограммаразделения аминосахаров и этаноламина,П р и м е р 3. Способ осуществляется также, как в примере 1, но состав элюента следующий, мас.% (максимальное соотношение компонентов элюента): метанол 77,0; додецилсуль. фат натрия 1,7; ЮаН РО, , 0,14; водо остальное.Элюирование ведут при рН 5-5,5. На фиг. 3 приведена хроматограмма разделения.П р и м е р 4. Способ осуществляется также, как и в примере 1, но элюент имеет или состав, мас,% (верхнее запредельное соотношение компонентов элюента): метанол 78,0; додецилсульфат натрия 1,8; ИаН РО. 0,15; вода остальное, или метанол 65,0;додецилсульфат натрия 1,0; БаН РО 0,08, вода остальное.Селективного разделения компонентов смеси в этом случае не происходит.формула изобретенияСпособ анализа аминосахаров путем обработки анализируемой пробы ароматическим альдегидом с последующим элюированием полученной смеси на хроматографической колонке, заполненной силикагелем с модифициро"0,09-0,14 Остальное при рН 5-5,5. ванной поверхностью, в потоке элюента, о т л,и ч а ю щ и й с я тем,что, с целью повышения селективностиспособа, в качестве ароматическогоальдегида используют и-диметиламинобензальдегид, в качестве элюентаиспользуют следующий состав мас,7: 1228012МетанолДодецилсульфатнатрияДигидрофосфатнатрияВодаи элюирование ведут1228012Составитель В, РезниковРедактор В. Ковтун Техред В.Кадар Корректор О. Луговая Заказ 2283/45Тираж 778 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССРпо делам изобретений и открытий113035, Москва, Ж, Раушская наб д, 4/5 Производственно-полигра 4 ическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4