Способ получения 9-(1, 3-диокси-2-пропоксиметил)гуанина

СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСНРЕСПУБЛИК4 С 07 П. 473/18 1.ОСУДАРСТЕ 1 ЕННЦЙ КОМИТЕТ СССРПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЬПИЙ йхнстицд И Н ПАТЕН 0 юл. 9 32ерхейден, В(72) Джульен ПС Мартин (08). (54) (57) 1 СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ в (1,3-ДИОКСИ-ПРОПОКСИМЕТИЛ) ГУАНИ ЧА общей формулы 1 или его солей с щелочными м заключающийся в том, что гид соединение формулы О:0 где Е - низщии алкил,с получением 9-(1,3-диокси-пропоксиметил)гуанина и при необходимостипреобразуют 9-(1,3-диокси-пропоксиметил) гуанинв соль щелочного металла или производят обмен катионащелочного металла в соли 9-(1,3-диокси-пропоксиметил)гуанина.1176Изобретение относится к способу получения 9-(1,3-диокси-пропоксиметил)гуанина, основанному на известном методе и его солей, щелочных металлов, обладающих противовирусной активностьюОы 1"2 Оно-ОН15Целью изобретения является получение нового соединения 9-(1,3-диок- си-. 2-пропоксиметил)гуанина, обладающего преимуществами в противовирусной активности по сравнению со структурными аналогами того же .действия,П р и м е р 1. (А) Получение И - -ацетил-(1,3-дибензилокси-пропоксиметил)гуанина.25М 9-диацетилгуанин (15,61 г, 66 ммоль), 2-0-ацетоксиметил,3-дибензилглицерин (19 г, 55 ммоль) и, бис- (и-нитрофенил)фосфат (0,5 г) перемешивают вместе со 150 мл ди- З 0 этилового эфира. Растворитель отгоняют и остаток нагревают при 175 С наомасляной бане в течение 1,5 ч в токе азота. Хроматография в колонке приэлюировании метанолом/метиленхлоридом (1:9) и последующая перекристаллизация из этипацетата дают 4,76 г 1 -ацетил-(1,3-дибензилокси-про 1 поксиметил) гуанина т.пл. 145-146 С,(Б) Получение Б -ацетил-(1,3- 40 -диокси-пропоксиметил)гуанина.К раствору 1 -ацетил-(1,3-дибензилокси-пропоксиметил)гуанина (4,62 г, 9,67 ммоль) в 150 мл метанола плюс 40 мл воды добавляют 20%-ную 45 гидроокись палладия на угле в виде суспензии в 10 мл воды, Смесь гидрируют в гидрогенизагоре. Парра при давлении водорода 4,2 кг/см в тече-, ние 38 ч затем фильтруют через целит 50 и концентрируют до белого твердого вещества. Перекристаллиэация из мег танола/этилацетата дает 1,4 г Б -ацетил-(1 3-диокси-пропоксиметил)о гуанина, т,пл. 205-208 С. 55Матсчный раствор затем восстанавливают 0% палладия на угле (1 г) в150 мл метанола плюс 50 мл воды при 841 г60 Фунт/кв. дюйм (4,2 кг/смг) в течение 47 ч, Общий выход Н -ацетилг(В) Получение 9-(1,3-диокси-пропоксиметил)гуанина.Б -ацетил-(1,3-диокси-пропокгсиметил)гуанин (721,9 мг, 2,4 ммоля)перемешивают с 50 мл метанольногораствора аммиака (метанол, насыщЕн оный аммиаком при 0 С) в течение 17 ч,при 21 С. Раствор концентрируют дообелого твердого вещества, а остатокперекристаллизовывают из метанола сполучением 582,3 мг 9-(1,3"диокси-пропоксиметил)гуанина, т.пл. 250 С,(с разложением),П р и м е р . 2 9-(1,3-диокси-пропоксиметил)гуанин растворяют вводном растворе, содержащем одинмоль-эквивалент гидроокиси натрия.Раствор затем лиофилизуют с получением натриевой соли 9-(1,3-диокси-пропоксиметил)гуанина в виде белого порошка: УФ: Ъ, = 265 мм; 1 = 11400.П р и м е р 3. Натриевую соль9-(1,3-диокси-пропоксиметил)гуанина растворяют в минимальном количестве воды и добавляют разбавленную хлористоводородную кислоту для доведениярН до 7. Иэ раствора кристаллизуют 9 в (1,3-диокси-пропоксиметил) гуанин.т,пл., 250 С,П р и м е р 4. В раствор натриевой соли 9-(1,3-диокси-пропоксиметил)гуанина (0,83 г, 3 ммоль) вводе (10 мл) добавляют хлористыйаммоний (0,48 г, 9 ммоль) и полученный раствор охлаждают до .0 С. Полученные кристаллы отфильтровывают исушат. Затем их растворяют в 100 млводы, содержащей КОН0,17 г,3 ммоль).Полученный раствор вымораживаютизатем лиофилизуют для получениякалиевой соли 9-(1,3-дигидрокси-пропоксиметил)гуанина.П р и м е р 5. К раствору натриевой соли 9-(1,3-диокси-пропоксиметил)гуанина (0,83 г, 3 ммоль) вводе (10 мл) добавляют хлористый аммоний (0,48 г, 9 ммоль) и полученныйраствор рхлаждают до 0 С, КристаллыОвыделяют фильтрацией, вакуумной сушкой и затем концентрируют из МЯ-диметилформамида (10 мл) остатокз 1176 формамиде (10 мл) в течение 5 ч с последующим добавлением пиридина 10 мл)и изобутилангидрида (10 мл).Полученный раствор перемешивают 18 ч. Затем добавляют метанол (20 мл)Раствор упаривают до объема приблизительно 15 мл, и продукт осаждают добавлением в соотношении 1:1 раствора диэтилового эфира гексана (50 мл).Осадок перекристаллизовывают из О смеси 2:1 метанол/сода, получая 9- -(1,3-диокси-пропоксиметил)гуанина.гП р и м е р 6 Раствор Б -ацетил-(1,3-диокси-пропоксиметил) 15 гуанина (0,89 г, 3 ммоль) в метаноле (40 мл) прибавляют в концентрирован-.3 ный раствор гидроокиси аммония (10 мл), перемешивают 24 ч при комнатной температуре, затем концентри О руют и осадок подвергают вакуумной сушке.Остаток затем растворяют в воде (100 мл), содержащий БаОН (0,12 г, 3 ммоль). Полученный раствор вымора живают и амофилизуют с получением натриевой соли 9-(1,3-диокси-пропоксиметил)гуанина.П р и м е р 7. Исключительная противовирусная активность соедине- . ния согласно изобретению иллюстрируется следующими данными.В клеточных культурах, НЕрподготавливают вирус Негрех з 1 пер 1 ех1штамм 6 для инфицирования. Вирус ад-; - сорбируют 1 ч, на клетки помещают свежую среду и все это инкубируют при 35 С до тех пор, пока не будутоинфицированы все клетки. Суспензию клеток замораживают при (-70).С от таивают и центрифугируют для удаления клеточных обломковБадосадочную жидкость сливают и хранят в за 841 4мороженном состоянии при-70)С до употребления, 1.0разведение над 6,7осадочной жидкости дает 503-ную инфицирующую дозу 503-ной клеточной культуры (ССЩ ) в клетках НЕр;1,га 10разведение дает 50 Х-ный летальный; исход ( С .,) на мьппах.Группы по 20 мышей самок Зю 1 ээ ИеЪз 1 еч (15-17 г) заражают " .внутрибрюшинно с использованием 0,2 мл ЕМЕМ, содержащего вирус в количестве 10 с 1) жппь. Мьппей заражают количеством вируса в 1 Оц раз боль-. ше ипи меньше, чем доза 10(,Р 0ослужащая в качестве контроля вирулент. ности, что сделано для обеспечения работоспособности модели.Лечение испытуемыми соединениями начинают через 6 ч после заражения. Мьппам поделенным на группы по 20 особей, вводят соединения в соленом растворе в количестве 5 мг/кг, 10 мг/кг и 20 мг/кг, Одна группа из 20 особей используется как контроль и получает солевой физиологический раствор. Лечение повторяют спустя 24, 48, 72 и 96 ч после заражения; Испытуемые соединения: соединение согласно изобретению и три соединения, описанные в патенте СШАР 4199574, имеющие частичное структурное сходство с соединением согласно изобретению (таблица),Приведенные результаты наглядно демонстрируют сравнение между числом выживших животных, получавших соединение согласно изобретению, и числом выживших животных, получавших три иэ" вестных соединения, что дает ясное представление об исключительно высокой противовирусной активности опи" сываемого соединения.-2-пропок 20 9-. (1,3-Дибензокси-пропоксиметил)-6-меркаптопурин 0 10 0 2 0 9-(1-Гидрокси-этоксиметилгуанин 9-(1,3-Дигидрокси-пропоксиметил)гуанин 14 5 0 Редактор М, Келе Заказ 5380/56 Тираж 384 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений-.и открытий 3035, Москва, Ж, Раушская наб., д. юисло выкивппи особей из 20 сут. после заражения