Способ определения микроколичествгербицидов производных фениламидав растительных тканях

1118 И 42 СПИСАНИЕИЗОБРЕТЕНИЯК АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ Союз Советских Социалистических Республик(43) Опубликовано 07.03.81. Бюллетень9 51) М. Кл.б 01 Х 31/06 Государотвеннмк комитет СССР Ро делам изобретений53) УДК 543.8(088,8 и открыт 45 Дата опубликован СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ МИКРОКОЛИЧЕСТРБИЦИДОВ ПРОИЗВОДНЫХ ФЕНИЛАМИДАВ РАСТИТЕЛЬНЫХ ТКАНЯХ для массовых 15 тв гербицидов окой точности вышение е трудовленная гербици ль достигается от растительных м, что игменИзобретение относится к способам химического анализа гербицидов производныхфениламида в растительных тканях, содержащих значительные количества хлорофилла и каротиноидов и может быть использовано учреждениями агрохимслужбы и токсикологическими лабораториями для контроля за качеством кормов и продуктовурожая.Известен способ определения микроколи Очеств гербицидов в растительных тканях,включающий экстракцию гербицида из ткани и количественное определение гербицида 1.Однако он мало пригоденанализов остаточных количесиз-за длительности и невысопределения.Известен также способ определения микроколичеств гербицидов производных фениламида в растительных тканях, включающий экстр акцию гербицида из ткани,очистку гербицида от растительных пигментов, извлечение очищенного гербицида растворителем и количественное определение 25гербицида 2,Способ предус..бицидов из проб12 - 18 ч при 25 С матривает экстракцию геры хлороформом в течение , высушивание и сжигание сухого остатка Н,ЯО 4 (й=1,84) в течение30 - 60 мин для удаления растительных пигментов, нейтрализацию и подщелачивание50% -ным раствором ХаОН, извлечение очищенных гербицидов и-гексаном и последующее их хроматографирование в тонком слоеокиси алюминия,Однако способ не обладает достаточнойточностью и связан с значительными трудозатратами. Это обусловлено следующимипричинами: длительная экстракция препарата из пробы органическим растворителем(12 - 18 ч); при очистке от растительныхпигментов в течение 30 - 60 мин происходитсильное разогревание пробы, приводящее кгидролизу гербицидов до их метаболитов.При этом невозможно выделить имеющиесяв пробе и возможно образовавшиеся в процессе очистки мета болиты; улетучиваниеимеющегося и образовавшегося метаболитапрн нейтрализации 50% 1 чаОН.При этом теряется 50 - 60% токсикантов,что снижает оценку их уровня содержанияв объекте.Целью изобретения является поточности определения и сокращенизатрат.Поста це теочистку да п811142 Таблипа 1 Содержание гербицидов в растительных тканях Анализируемый объект Введено, мкг Соединение предлагаемый способ по прототипу 93,4 3,0 93,0 3,3 92,0 4,2 57,015,4 85,0 12,0 85,0 12,0 100 ВодорослиМорковьМорковь ПропанидЛинуронАрезин 100 100 тов проводят на хроматографической колоноке с цеолитом 4 А (щелочная форма), а в качестве растворителя для извлечения очищенного гербицида истользуют смесь и-гексан: диэтиловый эфир в соотношении 3: 1 - 4: 1. Цеолит 4 А обладает избирательным поглощением по отношению к хлорофилло- икаротиноидоподобным пигментам. Кроме 10отого, цеолит 4 А необменно поглощает ароматические амины, как возможные метаболиты гербицидов, так и природные амины,содержащиеся в растительных тканях, чтодает возможность определять только гербициды.П р и м е р. В пробу водорослей или корнеплодов моркови добавляют заданное количество стандартного раствора гербицидов(например, 100 мкг пропанида, линуронаили арезина) и основных метаболитов этихгербицидов (20 в 2 мкг 3,4-дихлоранилина или 4-хлоранилина) и выдерживают втечение 1 ч,30 г водорослей, зеленой массы или корнеплодов моркови предварительно измельчают, помещают в колбу на 250 мл, затемдобавляют 150 мл смеси н-гексан: ацетон(9: 1) и экстрагируют гербициды встряхиванием в течение 1 ч. После экстракции содержимое колб фильтруют, и остаток нафильтре промывают смесью растворителей(ЗХ 15 - 20 мл). Полученный экстракт дляобезвоживания фильтруют через безводныйсернокислый натрий и упаривают досуха.Для отделения от растительных пигментовсухой остаток, содержащий гербициды, заливают 25 - 30 мл и-гексана и пропускаютчерез колонку (20 - 25;х,40 - 50 мл) с цеоли 40том 4 А (щелочная форма), используя фракцию 0,1 - 0,5 мм,Как видно из табл. 1, относительная ошибка при 1 = 0,95 предложенного способа меньше, чем в известном способе, что 45 свидетельствует о более высокой его точности.Существенным моментом предложенного способа является экспериментально подобранная элюирующая смесь н-гексан: диэти ловый эфир 3: 1, позволяющая количест 4Причем, колонку с цеолитом 4 А перед анализом не промывают.Гербициды элюируют из сорбента 50 - 55 мл смеси растворителей н-гексан: диэтиловый эфир (3: 1),При этом элюант упаривают досуха на роторном испарителе. Затем в колбу к сухому остатку добавляют 5 мл 50%-ной серной кислоты, тщательно перемешивают и кипятят в течение 5 мин с обратным холодильником (для гидролиза фениламида до анилинов). В охлажденные колбы после гидролиза (содержащие 3,4-дихлоранилин (3,4-ДХА) или 4-хлоранилин (4-ХА) приливают 10 мл дистиллированной воды и 5 мл 10 н. 1 чаОН, охлаждают до комнатной температуры, раствор количественно переносят в мерные колбы на 50 мл, окрашивают по реакции диазотирования - азосочетания с 1-нафтолом. Для этого в мерные колбы добавляют 1 мл 2%-ного водного раствора Иа 1 чО, и тщательно перемешивают, Через 2 мин прибавляют 1 мл 10%-ного водного раствора сульфаминовой кислоты, после чего колбу в течение 10 мин периодически встряхивают до полного разложения избытка кислоты. Прибавляют 1 мл 0,2%-ного спиртового раствора 1-нафтола и тщательно перемешивают, Для развития окраски азосоединения добавляют 4 мл 10 н. 1 чаОН и доводят до метки дистиллированной водой, В зависимости от содержания гербицидов в анализируемой пробе окраска растворов будет изменяться от бледно-розовой до ярко-малиновой. Экстинкцию растворов измеряют на фотоэлектрокалориметре с зеленым светофильтром или на спектрофотометре при Х = 510 - 515 нм.Данные сведены в табл. 1,Способ очистки, М определения венно (на 92 - 93%) выделить гербициды. При использовании смеси 4: 1 получены идентичные данные.При соотношении и-гексан: диэтиловый эфир (2: 1) - происходит неполное вымывание гербицидов (на 82%), а при (5; 1) - происходит вымывание из сорбированной смеси (гербициды + метаболиты + растительные пигменты) не только гербицидов811142 бицидов позволяет повысить точность и воспроизводимость, эффективное разделение гербицидов от их метаболитов и растительных пигментов, а также сократить время 5 проведения операций (табл. 2). Таблица 2 Сравнительное хронометрирование основных операций при определении микроколичеств гербицидов в растительных тканяхВремя основных операций способ Основные операции способа известный предлагаемый Экстракция гербицидов растворителямиФильтрация и упарпвание растворителейОчистка от растительных пигментовНейтрализация и подщелачивание 500, МаОНЭкстракцпя очищенных гербицидов н-гексановУпаривание растворителей 12 - 18 ч 5 - 10 мин30 - 60 мин10 - 15 мин10 - 15 мин 5 - 7 мин 1 ч 5 - 10 мин 1 О - 15 мин 5 - 7 мин Общее 13 ч 2 ч (учитываявремя на подготовку операций) Использование предложенного способа определения содержания микроколичеств гербицидов в растительных тканях обеспечивает по сравнению с существующим способом следующие преимущества: эффектив ную очистку пробы от растительных пигментов и достаточно полную элюцию соединений (92 - 94%); сокращение продолжительности операции очистки до 10 - 15 мин; полное разделение исходных гербицидов от их 15 основных метаболитов и растительных пигментов; более высокую точность и воспроизводимость определения; сокращение общего времени проведения операций по определению гербицидов в растительных объ ектах в 6,5 раз. Ф о р м у л а изобретенияСпособ определения микроколичеств гербицидов производных фениламида в расти тельных тканях, включающий экстракцию гербицида из ткани, очистку гербицида от Составитель Т. РоденковаРедактор Н. Тимоиина Техред Л, Куклина Корректоры: Т, Трушкина и О. Гусева Заказ 92471 Изд. М 175 Тираж 915 Подписное 1.1 ПО Поиск Государствепиого комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, К, Раушская иаб., д. 4 у 5Типография, пр. Сапунова, 2 51 на 92 - 93%), но и пигментов, затрудняю 1 цих дальнейшую идентификацию этих гербицидов.Следовательно, предложенный способ определения содержания микроколичеств геррастительных пигментов, извлечение очищенного гербицида растворителем и количественное определение гербицида, о т л ич а ю щ и й с я тем, что, с целью повышения точности определения и сокращения трудозатрат, очистку гербицида от растительных пигментов проводят на хроматографическойоколонке с цеолитом 4 А (щелочная форма), а в качестве растворителя для извлечения очищенного гербицида используют смесь я-гексан: диэтиловый эфир в соотношении 3:1 - 4:1,Источники информации,принятые во внимание при экспертизе 1, Мотузинский Н. Ф, и др. Остатки фенурона в разных средах. Химия в сельском хозяйстве, 1972, т. 10, Мв 9, с. 49 - 53.2. Методы определения микроколичеств пестицидов в продуктах питания, кормах и внешней среде, М., Колос, 1977, с. 173 - 178 (прототип),