Способ выявления аллергического воспаления при увеите

ОПИСАНИЕИЗОБРЕТЕНИЯК АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ Союз Советских Социалистических Республик(51)М. Кл.з с присоединением заявки Ио А 61 В 10/00 Госуларственный комитет СССР но делам изобретений и открытий(72) Авторы изобретения Второй Московский орпена Ленина государственный медицинскийинститут им. Н, И, Пирогова и Московский научно"исследовательский институт глазных болезней им. Гельмгольца( 54) СПОСОБ ВЫЯВЛЕНИЯ АЛЛЕРГИЧЕСКОГО ВОСПАЛЕНИЯ ПРИ УВЕИТЕИзобретение относится к медицине,а именно к офтальмологии,Известен способ выявления аллергического воспаления при увеите пу-тем определения в крови концентрации 5иммуноглобулинов 1.Однако этот способ имеет невысокуюстепень специфичности при оценке аллергического компонента воспаления,Поэтому параллельно с использованием 10названных показателей крови ставятвнутрикожные пробы, не достигая приэтом повьхаения степени специфичнос"ти аллергического компонента воспале"ния. 15Для повышения специфичности способа выявления аллергического воспаления при увеите в крови дополнительно определяют концентрацию адреналинасеротонина и 11-оксикортикостероидов 20и по уровню концентрации исследуеьыхвеществ выявляют аллергическое воспа"ление при увеите,Способ осуществляется следующт 4 мобразом. 25250 кроликов (500 глаз) разделяютиа две группы, Каждую группу иммуни"зируют отдельным, тканевым (хрусталик,сетчатая оболочка, сосудистая оболочка, лошадиная. сыворотка, бычий аль 2бумин) или микробным (стафилококк, стрептококк, кишечная палочка) антиге" ном по схеме в течение одного месяца, Спустя 10 дн, после окончания июунизации вводят в переднюю камеру глаза разрешающую дозу одноименного .антигена, У животных с полученной моделью увеита определяют клинико-офтальмологическую и морфо-химическую картину степени аллергического воспаления в оболочках глаза (с использованием) метода Нисселя и выявления конфигура-ции ДНК и РНК по Браше, общего белка по Гейеру,гликоген по Монтгомери и активности цикла ферментов гликолиза по Мильману с соавторами),Одновремен" но выполняют концентрацию абсолютного количества антител к провоцирующему увеит антигену и выделяют их в чистом виде с помощью белково-целлюлозных комплексов (иммуносорбентов), а также определяют концентрацию моноаминов (серотонин,адреналин) по Оксенкругу и 11-оксикортикостероидов по методу Панкова и Усватовой.- При иммунизации тканевыми антигенами с адъювантом фрейнда токсичноаллергический увеит выявляют тяжелее, чем без адъюванта фрейнда, Тяжесть клинико-офтальмологических и структуро-химических изменений в глазу при . пробу крови. Для исследования абсоувеите, характеризующаяся снижением лютной концентрации антител к 0 5 мпконцентрации ДНК, РНК, белков, глико" исследуемой сыворотки крови добавляютгена и активности ферментов цикла 0,2 мл иммуносорбента, содержащегогликолиэа, имеет прямую связь с уве- иммобилизированную лсыадиную сыворотличением концентрации антитела к про ку. Через 30 мнн инкубацин иммуновоцирующему увеит антигену и серотони сорбент отьывают от исследованныхна в крови с одновременным уменьше" " белков. С помощью 0,5 мп глицин НС 1- ,нием концентрации адреналина и 11" буфера РН 2,5 отделяют от иммуносор"оксикьртикостероидов. бента, связывавшиеся антител и йхПри иммунизации тканевыми и особен" о абсолютную концентрацию определяютйо микробными антигенами без адъюван- иммунодиффуэионным способом или мето.та фрейнда выявляют низкую концентра" дом спектрофотометрии. Концентрацияцию антител к провоцирующему увеит . антител 160-200 мкг/мп,антигену, Содержание серотонина, адре- Концетрация 11-оксикортикостерои- налина и 11-оксикортикостероидов у дов, определяемая по методу Панковаобъектов исследования было или неэна" 5 и УСватовой.чительно изменено или оставалось в Концентрация серотонина выявляепределах норовы, а клинико-морфологи- мая по методу Оксенкруга и Шатаповой,ческие проявления увеита были нечет" была повышена до 5-.10 мкг/мп, а адреко выражены. Отчетливую модель токси налина снижена до 0,004 мкг/мп, ко-.аплергического увеита получили 0 у животных при концентрации антитолько посл реиммунизации, при этом тел в крови после иммунизации лааадиопределяли заметное повышение кон-: ной сывороткой в пределах 75- центрации антител и серотонина в кро мкг/мп после введения Разрешающей .ви объекта исследования с бдновремен- дозы антигена, как правило, раэвиваным снижением содержания адренапина . 25 ется менее тяжелый .по клиническомуи 11-оксикортикостероидов; течению подострый экссудативный увеит.При иммунизации животных выявлены При этом в крови концентрация иммунаитигенныесвойства изучаемых веществ ных тел к провоцирующему увеит антигев убывающей степени хрусталик+сетча- ну в пределах 80-100 мкг/мп, серототая оболочкасосудистая оболочка гла- Зо нина до 3 мкг/мл, адреналина доЗа+лсааадиная .сыворотка-бычий аль-,- 0,009 мкг/мп, 11-оксикортикостероидов бумин+микробные антигены, до 10 мкг на 100 мп крови,Клинико-офтальмологические прояв" Проводят параллельные иммунологиления токсико-аллергического увеита ческие и биохимические исследования у животных с определенными иммунобио- З 5 у 120 больных с увеитами различнойхимическими изучаемыми показателями этиологии и доноровкрови сопоставлены с проявлениями Для диагностики аллергического увеита у человека. Одновременно у че- увеита проводят 350 иммунологических ловека исследована концентрация анти- исследований по выявлению антител к тел к предполагаемому провоцирующе- бактериальным антигенам в реакциях му увеит антигену и определено содер О микропреципитации (метод нефелометрии) жанне серотонина, адреналина и 11- . и бласттрансформации с бактериальны-оксикортикостероидов, Как правило, ми антигенами и фитогемагглютинином. при наличии аллергического компонен- Одновременнопроводят исследования та воспаления.прп увеите у человека, содержания 11-оксикортикостероидов в сопровсждающимся наличием антител 45 плазме крови: гидрокортизона и кортик провоцйрующему увеит антигену, костерона, адреналина и серотонина, выявляют повышение концентрации серо- а также активности ферментов углеводо тонина и снижение содержания адре- родного обмена. ,калина и 11-оксикортикостероидов в Результаты исследований покаэывакрови. 50 ют повышение иммунологической реакП р и м е р . Предварительно про" тивности у 10 больныхи понижение водят иммунизацию 20 кроликов лсиаа-. ее более чем в 50%, у остальных боль" диной сывороткой в количестве 0,1 мп ных выявлена нормальная реактивность, на 100 г веса животного по схеме с Установленб, что при-повышенной адъюВаитом фрейнда, после окончания 55 иммунологической Реактивности значийммунизации у животных при концентра- тельно снижено содержание свободного ции антител в крови. 150-200 мкг/мл ,гидрокортизоиа по сравнению с нормаль- введение разрещающей дозы антигена ной реактивностью (4,2-5, 5 при нормев количестве 0,1 мп в переднюю каме,2 мкг/100 мл плавуны) и повышено ру глаза способствует, развитию экссу- содержание кортикостерона (3,0-4,7 дативно"альтернативной форьы увеита 60 при норме 2,9 мкг/100 мп плазмы). с инволюцией токсико-аллергического Кроме того, при этом состоянии обнавоспаления в глазу на 35-40 день. На ружено также значительное повышение третий дейь после введения разрешаю- содержания белковосвязаиных форм г щей дозы антигена при максимальной гидрокортиэона и кортикостерона. Со воспалительной реакции глаза берут 65 держание адреналина было повышено764659 формула изобретения Составитель Л, СоловьевТехредН, Ковалева Редактор Т. Шагова Корректор В, СиницкаяЗаказ 6368/4 Тираж 673 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035) Москва( Ж, Раушская наб д, 4/5филиал ППП Патент Г. Ужгород, ул, Проектная, 4 до 50, а серотонина в 1,5"2 раза аосравнению с контропьной группой (доноры) . Активность ферментов сыворотки крови больных; с повышенной иммунологической рештивностью при этомбыла повышена по сравнению с нормальными показателями .При снижении иммунологической реактивности содержание гидрокортиэонабыло снижено до 50, а содержаниесвободного кортикостерона наоборотувеличено в 2 раза, показатели содер,жания адреналина и серотонина увели"чены в 2-4 раза и значительно возрас-,тала активность Ферментов углеводного обмена,Предлагаемый способ диагностикив сочетании с офтапьмологическимиданными позволяет судить о наличииаплергического воспаления глаза ислужит обоснованием прн выборе,методов иммунотропной терапии у больныхувеитами с различной иммунологической реактивностью.Экономическая. эффективность данного способа состоит в сокращении сроков диагностического обследованияс 10 до 5 дней и обосновании выбораэффективной терапии, На основе применения метода сокращаются сроки лечения, предупреждаются рецидивы и улучшаются функциональные исходы. Способ выявления аллергического воспаления при увеите путем определения в крови концентрации иммуноглобулинов, отличающийся тем,что, с целью повышения специфичности способа, в крови дополнительно определяют концентрацию адреналина, серо- тонина и 11-оксикортикостероидов и по . уровню концентрацииисследуемых веществ выявляют аллергическое воспаление при увеите. 20 Источники инФормации, принятые во внимание при экспертизе 1. Материалы 2-го Всероссийскогосъезда офтальмологов. 1968, с. 272"294.