Способ получения средства, обладающего радиозащитным действием

)5 А 61 К 35/84 ГОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНОЕВЕДОМСТВО СССР,Ф.К иданты в нном росзащитное держащих инила на 88, т,28, в,ТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВ(71) Институт радиобиологии АН Бститут микробиологии АН БССР(56) Бурлакова Е.Б, и др. Биоокслучевом поражении и злокачествете, М,: Наука, 1975.Виленчик М,М. и др. Радиодействие природных каротинсопрепаратов, исследование каротбелых крысах. Радиобиология, 194, с. 542-544. Изобретение относится к медицине, а именно к радиопротекторам природного происхождения, и может найти применение в радиобиологических экспериментах, клинической и сельскохозяйственной практике на территориях с радиоактивным загрязнением.Согласно изобретению в способе получения средства, обладающего радиозащитным действием, включающем культивирование мицелия гриба на питательной среде. обработку его экстрагентом и получение конечного продукта, из грибов используют Ясп)горЬуНое соаглцпе, а в качестве экстрагента - этиловый спирт, Полученное таким образом средство обладает выраженным радиоэащитным действием, не уступающим известному синтетическому препарату - ионолу,Гриб Бс)пгорпуИ 0 п сопппцпе образует макроскопические, достаточно крупные плодовые тела (1-5 см в диаметре), отлича(54) СПосоБ ПОЛУЧЕНИЯ СРЕДСТВА, 0 БЛАДАЮЩЕГО РАДИОЗАЩИТНЫМ ДЕЙСТВИЕМ(57) Использование: в медицине, а именно в радиобиологических экспериментах, клинической и сельскохозяйственной практике на территориях с радиоактивным загрязнением. Сущность изобретения: способ включает экстракцию грибов, при этом в качестве гриба используют Ясп)горЬуПогп согпгпипе, а в качестве экстрагента - этиловый спирт, 1 табл. ется активным ростом мицелия, что позволяет легко поступать его мицелиальные культуры. Плодовые тела сидячие до почти распростертых с отогнутым краем, часто подвешенные, прикрепляющиеся к субстрату суженным основанием, вееровидные, половинчатые до почти округлых, срастающиеся боками или черепитчатые, реже одиночные, тонкие, сухие, мягкокожистые. Поверхность радиально-бороздчатая, от войлочной до щетинисто-волосистой, от беловатой до серой, Край лопастный, тонкий, обычно подгибающийся или заворачивающийся вниз, Ткань очень тонкая, слегка желатинозная, на разрезе заметная в виде темной линии, примыкающей к опушению шляпки, Пластинки вееровидные, радиально расходящиеся от суженного основания шляпки, с опушенными закругленными краями, от сероватых до серовато-розовых и бледно-фиолетово-розоватых. Базидии удлиненно-булавовидные. 2- 4-споровые, 182419550 55 20-25 х 7 - 8 мкм. Споры цилиндрические, тонкостенные, гладкие, малиновые с розоватым оттенком, 3 - 4,5 х 1-1,5 мкм, Споровый порошок розоватый.Мицелиальные культуры, полученные из плодовых тел гриба, имеют следующие культурально-морфологические особенности; на суспо-агаре колонии белые, пушистые, быстро растущие; на среде с таннином положительная реакция на экстрацеллюпозные оксидазы, как правило, не проявляется. Генеративные гифы бесцветные, 2 - 4 мкм в диаметре, с небольшими выростами на клеточных стенках. Конидии, хламидоспоры и оидии отсутствуют, Перечисленные признаки позволяют легко идентифицировать мицелиальные культуры при получении их из плодовых тел,Предложенный способ осуществляется следующим образом,Из плодовых тел гриба 5, сощщцпе, собранных в природе, выделяют мицелиальную культуру на твердой питательной среде. Далее мицелий гриба выращивают на жидкой питательной среде в глубинной культуре, Мицепий отделяют фильтрованием, промывают водой и экстрагируют этиловым спиртом, Спиртовой экстракт концентрируют под вакуумом, разводят дистиллированной водой. Полученное таким образом средство было испытано на облученных животных дпя питья при свободном доступе. ,Применение средства позволяет значительно (в 2 раза) увеличить средний срок жизни облученных животных и обеспечивает их 100-ное выживание на 30-й день после облучения.П р и м е р, Выбирают наиболее крупные плодовые тела гриба 3. сотвцпе и скальпелем удаляют с их поверхности частички почвы и растительные остатки. После механической очистки плодовые тела обтирают вначале сухой стерильной ватой, а затем ватой, смоченной этиловым спиртом, Разрезают плодовое тело стерильным скальпелем и переносят части ткани в чашки Петри на поверхность агариэованной питательной среды - сусло-агара. Чашки помещают в.термостат при температуре 26-28 С. На 5 - 7-е сутки появившийся мицелий микроскопируют с целью идентификации культуры. Мицелий из эоны роста пересевают в следующую чашку с сусло-агаром для изучения культурально-морфологических свойств и уточнения видовой принадлежности гриба, Затем мицелиальную культуру 5. соапщпе пересевают в пробирки со скошенным сусло-агаром и выращивают в течение 6 суток, Культуру засевают смывом в жидкую глюкоза-пептон 5 10 15 20 25 30 35 40 45 ную среду следующего состава: глюкоза - 10 г, пептон - 3 г, КНР 04 - 1 г, 0,5 г, кукурузный экстракт - 2 г, Н 20 - до 1 п, Глубинное культивирование проводят в колбах на качалке в течение 4-5 суток при температуре 26-28 С. Выросший мицелий измельчают путем встряхивания в колбе со стерильными бусами и используют для посева глюкозо-пептонной среды аналогичного состава. Культивирование проводят в течение 3-х суток при тех же условиях,Мицелий отделяют фильтрованием, промывают водой и экстрагируют этиловым спиртом при гомогенизации в ступке с кварцевым песком. Этиловый спирт берут из расчета 25 мл на 1 г мицелия, при этом экстракцию проводят трехкратно в течение 30 мин, Спиртовой экстракт концентрируют в 100 раз под вакуумом при температуре не выше 35-40 С и далее разводят дистиллированной водой до содержания сухих веществ О.1 мгlмл. Остаточное содержание этилового спирта не превышает 1-2 ф.Полученное таким образом средство было испытано на мышах линии СВА, с начальной массой 18 - 20 г, подвергнутых внешнему гамма-облучению 6,0 Гр (мощность дозы - 0,055 Гр/с) на установке УГУ (фСо). Средство давали мышам для питья при свободном доступе по 1-1,5 мл в сутки в течение 28 суток после облучения, Для сравнения параллельно группе мыШей, получавшей такую же дозу облучения, давали известный антиоксидант, обладающий радиопротекторным действием в такой же дозе,Как видно иэ результатов, приведенных в таблице, применение средства обеспечивает 100-ное выживание мышей на 30-й день после облучения, а также значительно увеличивает средний срок жизни по сравнению с контролем. По своему радиозащитному действию средство не уступает" известному антиоксиданту-радиопротектору - ионолу. По сравнению с известным (прототип) предложенный способ позволяет расшйрить сырьевую базу и использовать в качестве исходного сырья гриб Я. согпвцпе, образующий макрбскопические плодовые тела, что упрощает его идентификацию и выделение в чистую культуру.Формула изобретения Способ получения средства, обладающего радиоэащитным действием, включающий культивирование мицелия гриба на питательной среде, обработку его экстрагентом и получение конечного продукта, о т и и ч а ю щи й с я тем, что иэ грибов используют ЯсЫгорпуИцгп согпвцпе, а в качестве экстрагента - этиловый спирт.1824195 Составитель А. КапичТехред М,Моргентал Редактор Л. Павлова Корректор Г. Кос Заказ 2204 Тираж Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раушская наб,. 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г, Ужгород, ул.Гагарина, 101