Способ микроклонального размножения раувольфии

СОЮЗ СОВГ ТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ РЕСПУБЛИК 12 й 5/ 5 ГОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНОЕВЕДОМСТВО СССР(71) Институт молнетики АН УССР(73) Институт молнетики АН Украин(56) Авторское свиМ 1566722, кл. С М 1 куля й биологии и ге й биологии и гекулярн 1детель тво ССС О, 1988,Изобретение относится гии и может применяться дл размножения растений с их ным оздоровлением от фи микроорганизмов. Целью изобретения явля ка способа микроклонального разных видов раувольфии, в дов, являющихся источником лоидов, используемых в медибиотехнолоускоренного одновремен- опатогенных ется разработразмножения том числе виценных алкацине,ые из однолетних участком побега лизации перенох на простерилиеду следующего е-Скугу 1/3, миккугу;5 мл/л 3-50,3-0,0,01-030-50 П р и м е р, Вычлененнпобегов пазушные почки спосле поверхностной стерсят в асептических условиязовэнную питательную срсостава,мг/л:Макросоли по Мурасироэлементы по Мурасиге-СРе-хелатГлицинАскорбиноваякислотаИУКБАПГумат натрия(54) СПОСОБ МИКРОКЛОНАЛЬНОГО РАЗМНОЖЕНИЯ РАУВОЛЬФИИ(57) Использование: биотехнология, медицина, фармакология, Сущность изобретения; растения различных видов раувольфии рэзмнокают с высоким коэффициентом размножения путем введения в культуру пазушных почек и пассировэния на питательные среды специально подобранного состава. 1 табл. Сахароза 15-20 г/л Агар 5-7 г/лПробирки с высаженными пазушными почками помещают в термостатировэнные С условия (22-28 С) с 12-16-часовым световым а днем ис освещением 1000-2000 люкс.Через 30-50 дней из почек вырастают стебельки, которые в асептических условиях а отделяют от остатка стебля исходного рас-, "р тения. В дальнейшем стебельки либо укореняют, либо размножают далее, С целью размножения стебельки разрезают на фрагменты с одной пазушной почкой и культиви- СГ руют в тех же условиях.Дальнейшее размножение выросших изф пазушной почки растений проводят либо на среде указанного выше состава, либо же на среде следующего состава, мг/л:Макросоли по Мурасиге-Скугу 80%, микроэлементы по Мурасиге-Скугу,Ре-хелэт 5 мл/лАденин 5 Кинетин 1 а- НУК 0,5 Тиамин 1 Аскорбиновая кислота 3-5Гумат натрия 30-50Сахароза 20 г/л Агар 5-7 г/л Укореняют растения на питательной среде следующего состава, мг/л:Макросоли по Уайту, микроэлементы по Мурасиге-Скугу,Ее-хелат 5 мл/л Глицин 2Аскорбиноваякислота 3ИУК0,5Гумат натрия 50Сахароза 10 г/л Агар 5-7 г/л Укорененные растеньица высаживают в почву и выращивают, как это принято для тропических растений.По изложенному способу были размножены, укоренены, высажены в почву и выращены до взрослого состояния раувольфии змеиная йацаоЛа зегрепбпа, раувольфия мутовчатая Йавдо 01 а чейса 1 а, раувопьфия седоватая Ваиччойа сапезсепз, раувольфия рвотная ВаваоНа чов 1 тога, раувольфия китайская Йавчойа сЫпепзз, раувольфия кафрская йацчюойа са 1 тга, Все размноженные и ч 11 го растения нормально развивались, цвели и плодоносили, отличались здоровым внешним видом. Других отличий по сравнению с исходными растениями не установлено. В таблице даны результаты микроклонального размножения разных видов раувольфии на основе культивирования пазушных почек стебля,Наиболее легко по изложенному способу размножается раувольфия рвотная, относительно трудно - раувольфия китайская и раувольфия седоватая, Последние два вида для эффективного размножения необходимо выращивать попеременно на приведенных составах питательных сред,Таким образом, предлагаемый способпозволяет размножать разные виды раувольфии. Это особенно важно для тропических, фармакологических ценных видов как 5 при их выращивании в теплице, так и дляускоренного размножения ценных форм с одновременным их оздоровлением от фито- патогенных микроорганизмов. 10 Формула изобретенияСпособ микроклонального размноженияраувольфии, включающий эксплантацию пазушных почек на модифицированную питательную среду Мурасиге-Скуга, получение 15 растительного материала, культивирование его до получения растений-регенерантови ихукоренение, отличающийся тем, что эксплантацию осуществляют на питательную среду, содержащую макросоли 20 по Мурасиге-Скугу в концентрации, равной1/3 указанной в прописи, микроэлементы по Мурасиге-Скугу, 5 мл/л Ее-хелата, 2 мг/л глицина, 3-5 мг/л аскорбиновой кислоты, 0,3-0,5 мг/л ИУК, 0,01-0,1 мг/л БАП, 30-50 25 мг/л гумата натрия, 15-20 г/л сахароэы, 5-7г/л агара, культивирование растительного материала осуществляют на питательной среде того же состава или на питательной среде, содержащей макросоли по Мурасиге Скугу в концентрации, равной 80 от указанной в прописи, микроэлементы по Мурасиге-Скугу, 5 мл/л Ее-хелата, 5 мг/л аденина, 1 мг/л кинетина, 0,5.мг/л а-НУК, 1 мг/л тиамина, 3-5 мг/л аскорбиновой кис лоты, 30-50 мг/л гумата натрия, 20 г/л сахарозы, 5-7 г/л агара, и укоренение осуществляют на питательных средах того же состава или на питательной среде, содержащей макросоли по Уайту, микроэлементы по 40 Мурасиге-Скугу, 5 мл/л Ее-хелата, 2 мг/лглицина, 3 мг/л аскорбиновой кислоты, 0,5 мг/л индолилуксусной кислоты, 50 мг/л гумата натрия, 10 г/л сахарозы, 5-7 г/л агара.Укореиаиие побегов Ьид растению На среде 1а На средесреде г ффффф 2На среде 3биса ио по бегов3 исака ио по беговЬисаае ио покоре пилось, 3 Укореиилось,3 ФЬориро и по аее- пок,ет коренилось, 3 и,В 3.саггте Фреде 1, среда 2, среда 3 - номеР сфедипорюдке поиеедеиию ее состава а текст заюак Корректор П.Гереш Составитель В,Куна едактор Л. Волкова Техред М,МоргенталЗаказ 1394 Тираж Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ С 113035, Москва, Ж, Рауаская наб., 4(Б Производственно-издательский комбинат "Патент". г. Ужгород, ул.Гагарина, 101. сЫпепа 1 а 41 61 53 62 365247 35 Оь 46 561 з)3 9 Ь,41,6 49 16 9 95 гзг 7 37 30 35 54 ют е0 Э 5 0 37 739166 76,559и,6 4 32,44,4 2 63,363 2 Э 95,333,2 ) 52,27,3 3 96,232,6Число кизиеглособиихиоррологичесо иориальиыкРастеиид Растаил а иОкав ЬсеГозисе" пеио, ет