Способ прогнозирования характера течения саркоидоза

(19) 01 К 33/48 5 ГОСУДАРСТВ ВЕДОМСТВО (ГОСПАТЕНТ. ное ССР ССР) ЕНТНО НИЕ ИЗОБРЕТЕНИ ОПИ К АВТОР О МУ С В ИДЕТЕЛ Ь СТВУ 1.:,: 2(21) 4882331/14: имеет значение при определени (22) 16.11.90мости и характера терапии бол (46) 23,12;92. Бюл. Й 47, ность изобретения: определяют (71) Киевский научно-исследовательский ин-, способность лейкоцитов, рассч ститут фтизиатрии и пульмонологии ношение абсолютного числа им. акад. Ф.Г.Яновского . клеток к абсолютному числу кл (72) Н.А.Тышко, Е,Ф.Чернушенкои при значении полученного и А.Ф,Поддубный7,1) 0,8% прогнозируют прогре . (54) СПОСОБ ПРОТНОЗИРОВАНИЯ ХАРАК- течение, а при значении 3,7 ч.1,0 ТЕРА ТЕЧЕНИЯ СА КОИдОЗА .: сирующее течение сакоидоза. (57) Использование: в области медицины и зволяетповыситьточностьисокр может найти применение вофтизиатрии для (с 4 суток до 1 часа) прогнозиров прогнозйрования течения саркоидоза, что тера течения саркоидоза,и необходиьных, Сущадгезивную итывают отприлипаих еток взвеси показателя ссирующее- рвгресСпособ поатить времякИзобретение тносится к медицине и " в периферической крови (в реакции ЕАС (Д может найти применение во фтизиатрии РОК), у больных с прогрессиру)оьцим тече ) длл прогнозирования теченил.саркоидоза, наем саркондоза количество В-лимфоцитов Я . что имеет значение при "определении необ- не изменяется, тогда как у больных с регресходимости"и"харвктератерапии больных."сией патологического процесса количвствоИзвестен способ прогнозирования ха- В-лимфоцитов достоверно увеличиваегся. ф рактера течения саркоидоза, заключаю- Недостатками даннОГО СпОСоба являют- Д щийся в определении концентрасции ся; ОО иммуноглобулина А в сыворотке крови. У - недостаточная точность прогнозиробольных с.прогрессирующим тесГением за-":вайия характера течения саркоидоза;болевания уровеньиммуноглобулина А эна-- технологическая сложность осуществт чительно повышеатса по сравнени)о со. ленив методики,. ( ф здоровыми лицами и больными с ретрес . Известен способ прогнозирования ха.сией патологического процесса. рактера течения саркоидоза, заключающийНедостатквмиданногоспособаявллют. . сл:е проведении реакции бластной ыФь. сй.-трансформацнилимфоцитов(РБТП).Способ ) е. - недостаточная точность йрогнозйрео-основан на активации пролиферативной вания характера те ейия" саркоидоза; " " " способности лимфоцитов. У больных сарко - технологическая"сложностьосгущес)гв=" "идозом эта функция лимфоцитов значиления метдДики; . .: .тельно ниже нормальных величин. Однако у- длительность постановки реакции.." больных с прогрессирующим течением сар. Известен способ прогнозирования ха-коидоэа бласттрансформация лимфоцитов рактера течения саркоидоэа, заключающий- достоверно ниже (31,6 2,4 б), чем у болься в определении количества В-лимфоцйтов ных с регрессиел пато,)огического процесса(41,5+ 2,2 о , р 0,01) (см, в кн.: Е,Ф,Чернушенко, Л.С.Когосова Иммунология и имму.нопатология заболеваний легких. - К,: Здоровя, 1981, - с. 66-94).Этот способ является наиболее близким к предлагаемому по технической сущности и принят в качестве прототипа.Недостатками способа, выбранного в качестве прототипа, являются;- недостаточная точность прогнозирования характера течения саркоидоза,- технологическая сложность осуществления способа;- длительность постановки реакции (4 суток),Цель изобретения - повышение точности способа и сокращение времени исследования,Поставленная цель достигается тем, что в известном способе, заключающемся в исследовании функции лейкоцитов, согласно изобретению, определяют адгеэивную способность лейкоцитов, рассчитывают отношение абсолютйого числа прилипших клеток к абсолютному числу клеток взвеси и при значении полученного показателя 7,1+ 0,8 опрогнозируют прогрессирующее течение, а при значении 3,7 +1,0 о-"регрессивное течение саркоидоза,Способ прогнозирования характера течения саркоидоза осуществляется следующим образом,Гепариниэированную кровь (2 мл) центрифугируют при 1500 об/мин в течение 10 мин, Снимают белую пленку лейкоцитов и разводят до 1 мл средой 199. Подсчитывают количество лейкоцитов (нейтрофилов и мо. ноцитов) в этой взвеси в камере Горяева, окрашивая клетки раствором генцианвиолета (1 о ) на уксусной кислоте. 0,1 мл этой взвеси наслаивают на стекло с лункой и инкубируем в термостате при+37 С в течение 5 мин. Эритроциты и неприЛипшие клетки отмывают фосфатнь 1 м буфером. В лунку заливают 0,1 мл 0,2 -ного раствора ЭДТА, содержащего 5 осыворотки крупного рогатого скота и ставят в холодильник (+4 С) на 15-20 мин. За это время все прилипшие ранее клетки отлипают от стекла и их количество подсчитывают в камере Горяева, Показатель адгезивной способности лейкоцитов вычисляют по формуле;уб 5,р х - абс, число клеток во взвесиУ впервые выявленных больных с последующей регрессией заболевания показатели адгезивной способности снижаются(3,7+ 1,0%) по сравнению со здоровыми лицами (8,50,4 о ). У больных с последующим прогрессированием заболевания этот показатель не будет отличаться от нормальных величин (7,1 +0,8%).Ниже приведены конкретные примеры выполнения способа.П р и м е р 1, Больная Г., 34 г поступила в клинику КНИИФП с диагнозом - саркоидоз легких. Из анамнеза известно, что изменения в легких выявлены вдекабре 1987 г. после обращения по поводу простуды, Больная жалуется на одышку, боли в грудной клетке, сухой кашель. Аускультативно - дыхание жесткое, хрипов нет. На рентгенограмме от 14.06.88 г. - диффузное усиление легочного рисунка, мелкосетчатая. очаговая диссеминация легких. В корне правого легкого увеличены бронхопульмональные лим фоузлы, Общий анализ крови - лейкоциты -8,1 х 10 э, ю, п-б, с, лф, м, Общий9анализ мочи без особенностей.Иммунологическое обследование выполнено согласно методике, предлагаемой 25 в изобретении:определение адгеэивной способностилейкоцитов - 10,5 о(при норме - 8,5.1,4).Поскольку данный показатель достоверно не отличается от нормальных вели чин, что предполагает прогрессированиесаркоидоза, больной Г. с первых дней пребывания в стационаре назначен метилпредниэолон.П р и м е р 2. Больной Д., 32 гпоступйл 35 в клинику КНИИФП с диагнозом - саркоидоз внутригрудных лимфоузлов и легких, активная фаза. Изменения в легких выявленыпри профосмотре. Данные обследованияпри поступлении: общий анализ крови - 40 лейкоциты - 5,3 х 109, э, п, с, лф,м, СОЭмм/ч. Общий анализ мочи безособенностей, Рентгенография - билатеральная мелкоочаговая диссеминация, Корни легких расширены за счет выраженного 45 увеличения бронхопульмональных лимфоузлов.Иммунологическое исследование выполнено согласно методике, предлагаемойв изобретении:50 - адгезивная способность лейкоцитовсоставила 1,3%.Резкое снижение показателя адгеэиилейкоцитов свидетельствует о вероятнойспонтанной регрессии заболевания, поэто му в данном случае можно воздержаться отназначения гормональных препаратов. Приповторном обследовании больного через 6месяцев данные клинического и рентгенологического обследования подтвердили1783430 спонтанную регрессию патологического процесса,Всего обследовано 64 больных впервые выявленным саркоидозом, из которых у 49 процесс прогрессировал, у 15 - была в последующем установлена регрессия заболевания. В качестве контрольной группы обследовано 30 практически здоровых лиц,Приводим таблицу, которая дает сопоставительную характеристику метода прототипа и предлагаемого изобретения,Группы обследуемых РБТЛ ф) по прототипу)Адгеэивная способность лейкоцитово Здоровые лицаБольные саркоидозом с прогрессирующим течением заболеванияБольные саркоидозом соспоНтанной регрессией 61 7 й 3 5 30 Ой 1 6 8,5+1,4 7,1 +0,8 р00131,2 +4,90,001 р 0,13,7 +1,00,001 П р и м е ча н и е, р - достоверность различий с контрольной группой1. У всех больных активным саркоидозом отмечалось резкое угнетение РБТЛ,но в равной мере у больных с прогрессирующим течением заболевания и последу. ющей спонтанной регрессией патологического процесса, поэтому изменение РБТЛне может служить прогностическим признаком,2. У больных с последующей спонтанной регрессией заболевания показателиадгезивной способности лейкоцитов резко снижены, что дает возможность воздержаться от применения гормональной терапии,3, У больных с последующим прогрессированием саркоидоза адгезивная спо-собность лейкоцитов не изменяется. Составитель Й.ТышкоТехред М.Моргентал Корректор Л.Ливринц Редактор Т.Козлова Заказ 4512 . Тираж Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раушская наб 4/5 Производственно-издательский комбинат Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101 Способ прогнозирования характера течения саркоидоза находит применение у впервые выявленных больных данным заболеванием при определении терапевтической тактики, поскольку саркоидоз характеризуется возможностью спонтанной регрессии патологического процесса. Данный способ позволяет определить необходимость применения гормональных препаратов в случае прогрессирования заболевания или же не назначать их в случае спонтанной регрессии. Предлагаемый способ позволяет повысить точность и сократить время (с 4 суток до 1 ч) прогнозирования характера течения саркоидоза. Применение для этих целей определения адгезивной способности лейкоцитов исключает длительный и трудоемкий этап культивирования клеток в РБТЛ, а также 5 использование труднодоступных и дорогостоящих реактивов, используемых в споСобе прототипа. Учитывая простоту и доступность методики, способ прогнозирования характера течения саркоидоза может 10 найти широкое применение в практическомздравоохранении. Его использование возможно в иммунологических лабораториях учреждений фтизиопульмонологического профиля.ф 15 Формула изобретенияСпособ прогнозирования характера течения саркоидоза путем исследования функциилейкоцитов, отличающийся тем, что, с целью повышения точности способа и 20 сокращения времени исследования, определяют адгезивную способность лейкоцитое, рассчитывают отношение абсолютного числа прилипших клеток к абсолютномучислу клеток взвеси и при значении полученного показателя 25 7,1 й 0,8 опрогнозируютпрогрессирующее течение, а при значении 3,7+ 1,0 о - регрессив ное течение саркоидоза.