Способ прогнозирования течения воспалительного процесса

/5 51)5 6 01 ГОСУДАРСТВЕННЫЙПО ИЗОБРЕТЕНИЯМПРИ ГКНТ СССР ИТЕТКРЫТИЯМ ЗОБРЕТЕНИЯ ОПИСАНИ ТЕЛ ЬСТВ УС К АВТОР(56) Василюк М,Д. Хирургическое лечениепосттромбофлебитического синдрома нижних конечностей при изьязвлении и индурации тканей. Автореф, дис, д-ра мед. наук,Киев, 1984, с, 40,(54) СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ ТЕЧЕНИЯ ВОСПАЛИТЕЛЬНОГО ПРОЦЕССА(57) Использование: в медицине. в клинической и хирургической практике. Сущность изобретения: проводят диск-электрофорез Изобретение относится к медицине и может быть использовано о клинической ихирургической практике для прогнозирования течения воспалительного процесса при различных заболеваниях.Известен способ диагностики и прогнозирования воспалительного процесса при хирургическом лечении посттромбофлебитического синдрома нижних конечностей при изъязвлении и индурации тканей.Целью изобретения является повышение точности способа.Поставленная цель достигается тем, что определяют содержание иммуноглобулина 6 в фракциях сывороточного белка дискэлектрофореграммы в палиакриламидном геле, соответствующих лакал)лзации фракций с относительной электрофоретической подвижностью по трансферину равной 0,17, 0.20 и 0,23 и при снижении его содержания о ПААГ двух параллельных проб сыворотки крови, в первой пробе определяют локализацию фракций белка,.а во второй гелевый столбик разрезают на поперечные диски с учетом локализации отдельных электрофоретических фракций белка и помещают их в чашки Петри для определения содержания иммуноглобулина 0 по Манчини, а при снижении его содержания ниже 0,35,0,49 и 0,56 г/л в гелевых дисках, соответствующих локализации фракций с Ю подвижностью по трансферину, равной 0,17, 0,20 и 0,23, прогнозируют неблагоприятное течение воспа. лительного процесса, Положительный эффект. Использование изобретения позволит о 1,5 раза точнее прогнозировать течение воспалительного процесса, 1 табл. ниже 0,35, 0,49 и 0,56 г/л прогнозируют не- ЯблагоприятнЬе течение воспалительногопроцесса,Способ осуществляют следующим обра- -йзом, Проводят диск-злектрофорез двух параллельных проб сыворотки крови о (р7,5 оуь-ном полиакриламидном геле с длиной76 мм разделяющего и 8 мм концентрирую- Ощего геля и диаметром трубочек 6 мм прирежиме.2 мА и напряжении 600 УЧ на пробувтечение Зй мин с псспепуюпим увепичением силы тока до 5 мА в течение 1 ч, Послеэлектрофореза одну из проб фиксируют о10-ном растворе ТХУ в течение 10 мин,окрашивают в 0,1(-ном растворе амидочерного 10 В в течение 10 мин и промываютв 7-ном растворе уксусной кислоты,Столбик геля другой неокрашеннойпробы разрезают на 27-28 поперечных дисков, соответствующих локализации определенным фракциям белка диск-электрофореграммы 1-й окрашенной пробы. Отдельные диски помещают на расстоянии 20-25 мм друг от друга в пронумерованные лунки чашки Петри с агаром и заливают агаром с диспергированной моноспецифической антисывороткой иммуноглобулина О до полного покрытия дисков. После 48 ч инкубации во влажной камере при комнатной температуре производят фиксацию в 10/О ТХУ и промывку в 70/,-ном уксусной кислоте, В агаре вокруг дисков, в которых присутствует иммуноглобулин О, возникают кольца иммунодиффузии различных диаметров. Одновременно в отдельной чашке Петри определяют общее содержание иммуноглобулина О в исследуемой сыворотке крови по известному способу Манчини,Для расчета содержания иммуноглобулина О в отдельных дисфракциях измеряют диаметры колец иммунодиффузии всех дисков. При этом общее содержание иммуноглобулина в сыворотке крови, определенное по Манчини в г/л, соответствует сумме квадратов диаметров всех колец иммунодиффуэии в мм, На основании этого содержание иммуноглобулина 6 в отдельных диск-фракциях соответствует произведению величины общего содержания иммуноглобулина в сыворотке крови и отношения квадрата диаметра кольца иммунодиффузии отдельного диска к сумме квадратов диаметров колец иммунодиффузии всех диск-фракций.На основании наших исследований было установлено, что у больных с недостаточностью иммуноглобулина О отмечается резкое снижение его содержания особенно в 23-21 фракциях сывороточного белка диск-электрофореграммы в ПААГ, где локализуются иммуноглобулины относящиеся к. нормальным или естественным антителам, функция которых связана с индивидуальной устойчивостью организма к инфекциям. Поэтому снижение содержания иммуноглобулина О в фракциях 23-й ниже 0,35 г/л, 22-й - 0,49 г/л и 21-й - 0,56 г/л соответственно указывает на недостаточность иммуноглобулина О в организме и прогнозирует неблагоприятное течение воспалительного процесса,Такое состояние иммунитета встрецается при пиодермиях, фурункулезах, частых простудных заболеваниях и пневмониях, а также при системном аллергоэе и у больных, перенесших тяжелые оперативные вмешательства.Средние количественные данные содержания иммуноглобулинов О в фракциях сывороточного белка дис-электрофорег составило в 23 фракции диск-электрофореграммы 0,37 г/л, в 22 фракции - 0,56 г/л и в 50 21 фракции - 0,45 г/л.Таким образом, как видно из таблицы иконкретного примера, использование предлагаемого способа позволяет установить индивидуальную недостаточность 55 определенных фракций иммуноглобулина О ворганизме и повысить в 1,5 раза точность прогноза течения воспалительного процесса,Формула изобретения Способ прогнозирования течения воспалительного процесса, включающий про 5 1015 203035 4045 раммы в ПААГ у здоровых людей и больных с воспалительными процессами приведеныв таблице. Из таблицы видно, что у больных содержание иммуноглобулина 6 снижено особенно в 23-21 фракциях, что указывает на недостаточность естественных антител в организме по сравнению с группой здоровых лиц.Содержание иммуноглобулина 6 в фракциях сывороточного белка у здоровыхлюдей и у больных с воспалительнь 1 ми процессами представлено в таблице.В качестве конкретного примера использования способа служит следующий клинический случай; Больная Н.Д., 67 лет, поступила в клинику с диагнозом: рецидивирующий карбункул затылочной области, сахарный диабет в тяжелой форме. Больной проведено широкое костообраэное раскрытие карбункула с иссецением некротицеских тканей, с последующей антибиотикотерапией, общеукрепляющим лечением и коррекцией сахарного диабета. Однако, некротически-гнойный процесс не имел тенденции к ограничению и распространилсяпоцти на всю затылочнуюобласть. Содержание иммуноглобулина 6 в сыворотке кровипо Манчини составило 9,3 г/л, что соответствует таковому показателю у здоровь 1 х лиц,В то же время при исследовании иммунограммы сывороточного белка выявлено отсутствие иммуноглобулинов 6 в фракциях 21-23 диск-электрофореграммы и наличие их только в 19, 20 и 27 фракциях и в крупнопористом геле, На основании этого у больной была установлена недостаточность определенных фракций иммуноглобулина 6 в сыворотке крови. Многократные гемотрасфуэии свежей донорской крови, антистафилококковой плазмы, введение гаммаглобулина и антибиотиков и др, мероприятия позволили ограничить воспалительный процесс, Наступиловыздоровление.Показатели иммунограммы сыворотки крови при выписке указывали на наличие иммуноглобулина 6, содержание которого1781609 20 3 онер Фракции и электрофоретическал подлинность сыеороточного белка диск-электрсфорегранны а полиакрилаиндиои геле по отноюению к трансФеррину 0633 ее количестеоиннуноглобулиноаС а сыаоъотке кроен по Зьтйчини, г/л Иииуноглобулины С а Фрак цилх сыеороточного белка диск- электрофореграииы, г/л 24 27 26 380,350,39 17 16 28 21 20 190,29"0,31 250,090,1 23 0,140,15 0,220,41 0,44 О,ОЗ. 0,060,04 0,08 0,260,27 о,480,53 0,17 О,ТВ 0,190,20 5 1,22 6 0,14 6 0,27 6 0,08 1,520,12 У адороеык лю"дей,Трубченк кт аказ 4271 Тираж Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям 113035, Москва, ЖРаушская наб., 4/5 Н оизводственно-издательский комбинат "Патент", г, Ужгород, ул.Гагарина, 10 ведение диск-злектроореза двух параллельных проб сыворотки крови в 7,50 о-ном полиакриламидном геле, затем одну пробу фиксируют и прокрашивают для определения локализации фракций белка, а столбик геля другой пробы используют для определения иммуноглобулина 6, для чего его разрезаютна поперечные диски, соответствующие локализации отдельных фракций белка электрофореграммы, диски помещают на расстоянии 20-25 мм друг от друга в чашки Петри и заливают агаром с моноспецифической антисывороткой, инкубируют во влажной среде при комнатной температуре в течение 48 ч, фиксируют 10%-ным раствором ТХУ, промывают 77 ьным раствором уксусной кислоты и определяют диаметр колец иммунодиффузии для расчета количества иммуноглобулина 6 в отдельных диск-фракциях по формуле в виде произведения общего содержания иммуноглобулина 6 в сыворотке крови, 5 определенного по Манчини, на долю вели-чины квадрата диаметра одного кольца иммунодиффузии по отношению к сумме квадратов диаметров всех колец иммунадиффузии,отличающийся тем,что,с 10 целью повышения точности способа, определение иммуноглобулина 6 проводят в трех гелевых дисках, соответствующих локализации фракций белка с злектрофоретической подвижностью 0,17, 0,2 и 0,23 по 15 отношению к трансферрину, и при сниженли его содержания ниже 0,35, 0,49 и 0,56 г/л прогнозируют неблагоприятное течение воспалительного процесса.