Способ индикации возбудителя чумы

(51)5 С ГОСУДАРСТВЕ 1+ЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМПРИ ГКНТ СССР ИЕ ИЗОБ РЕТЕНИ П ЕТЕЛЬСТВ А 8 ТОРСКОМУ флуоресно р ощих антител Целью изобре тения является повышение чувствительности спссоба. Поставленная цель достигается тем что биопробным живо-ным ппдк ажно е сбласть спины вводят О 5-1.0 мл исследуг лей пробы. Исследуемый л зтериел вводят в одном шприце с равным объемом смеси гепэричизиоованной крови морской СВИНКИ, жЕЛтха КУРИНОГО ЯйЦа и КОРТИЗОНа. В месте введения делают мазок-отпечаток, которь,й фиксируют в хлороформе с последующей обработкой лю)линесцирующици антителами и учетом результатов Способ ПОЗЕС ЯЕт Е 1 ЯЕЛЯтЬ ОТДЕЛЬНЫЕ К "ЕЗКИ ЕОЗ- буди:л = е ееде ) ного био;1 оаб не )л ж,:еоным с тзб Ф 3вательский противочумза и Закавказья(54) СП ЧУМЫ 57) Из гии в ции б ретение относится к микробиоло стности к специфической индила ологических объектов методом Ю С Изобретение относится к микробиологии, в частности к специфической индикации биологических объектов методом флуоресцирующих антител. окрашивают ком)1 ерческими ющими им)луноглобулинами.Под люминесцентным мик рез сутки при просмотре 1 О- ния обнаруживают единичны клетки, а через 48 ч - в каждом обнаруживают 10-15 микробнП р и м е р 2, Приготавл гепаринизироеанной крови мо с желтко)л куриного яйца в соо в количестве 2 мл, К смеси до исследуемо о материала, сод микробных клеток возбудител и кортизон из расчета 6 мг н тное Приготоеленную смесь шприц и еепдят под кожу сп белым мышал поровну, Двеют через 24 ч, а дее д ста введения делаю ксируют в хлороформе ресциру Цель изобретения - повышение чувствительности способа.П р и м е р 1. Приготавливают смесь гепаринизированной крови морской свинки с желтком куриного яйца в соотношении 1:1 в количестве 2 мл, К смеси добавляют 2 мл исследуемого материала, содержащего 10 микробных клеток возбудителя чумы в 1 мл, и кортизон из расчета 5 мг на одно животное, Приготовленную смесь набирают в шприц и вводят под кожу спины четырем белым мышам поровну. Две белые мыши вскрывают через 24 я, а две другие - через 48 ч. С места введение делают мазки-отпечатки, фиксируют в хлороформе 10 мин и(56) Методическоеэпидемиологов и миздрав СССР, 1972, с роскопом че полей зрее микробные поле зренияых клеток иеают смесь рской свинки тношении 6,4 баеляют 2 мл ержащего 10 я чумь в 1 мл,одно живонабира от е ины четырел 1 белые мыши ругие - через т мазки-отпе 15 )лин и ок1707080 30 ФТаблица 1 Примечание. "+ - в каждом лоле зрения обнаружено 10-15 микробных кле;ок; "Ед. кл." - при просмотре 10-15 полей зрения обнаружены единичные микробные клетки; "-" - возбудитель не обнаружен. рашивают коммерческими флуоресцирующими иммуноглобулинами. Под люминесцентным микроскопом через сутки при просмотре 10-15 полей зрения обнаруживают единичные микробные клетки, а через 48 ч в каждом поле зрения обнаруживают 10-15 микробных клеток. П р и. м е р 3. Приготавливают смесь гепаринизированнойкрови морской свинки с желтком куриного яВИ в соотношении 7:3 в количетве 2 мл. К смеси добавляют 2 мл исследуемого материала, содержащего 10 микробных клеток возбудителя чумы в 1 мл, и кортизон иэ расчета 7 мг на одно животное. Приготовленную смесь набирают в шприц и вводят под кожу спины четырем белым мышам поровну. Две белые мыши вскрывают через 24 ч, а две другие - через 48 ч. С места введения делают мазки-отпечатки, фиксируют в холроформе 20 мин и окрашивают коммерческими флуоресцирующими иммуноглобулинами. Под л юминесцентным микроскопом через сутки при просмотре 10-15 полей зрения обнаруживают единичные микробные клетки, а через 48 ч в каждом поле зрения обнаруживают 1 О - 15 микробных клеток. Результаты биопробы представлены втабл.1 и 2,Таким образом, при использовании известного способа повышается чувствитель 5 ность биологической пробы приобнаружении возбудителя чумы прямым методом флуоресцирующих антител.Формула изобретенияСпособ индикации возбудителя чумы,10 включающий введение исследуемого материала животным с последующим взятиемпатологического материала, изготовлениеммазков-отпечатков, их фиксацией, нанесе нием флуоресцирующих иммуноглобулинов15 и учетом результатов при люминесцентномикроскопическом исследовании, о т л и ч аю щ и й с я тем, что, с целью повышениячувствительности способа, исследуемый материал предварительно смешивают с гепа 20 ринизированной кровью морской свинки ижелтком куриного яйца в соотношении1:1:1-1:7:3 соответственно, к полученнойсмеси добаеяют 5 - 7 мг кортиэона, введение осущсстеляют подкожно в области спи 25 ны в дозе 0,5-1 мл, патологическийматериал берут с места введения, а фиксацию мазков осуществляют хлороформом втечение 10-20 мин.1707080 аблица 2 Исследуемыйматс риал Количествомикробныхклетоквозбудителячумы в 1 мл Результаты индикации возбудителячумы методом фд через 24 и ч 8 чпосле постановки биопробы сгособом предлагаемым 48 М1010101010101 О1 О104101 О1010101 С1010 Возбудительчумы (монокультура) Ед. кл.+Ед, нл. П р и и е ч а н и е, + - в каждом л-е100 и,кробных клеток; зрения обнаружечо 10- "Ед .кл ." - при поосмо зрения обнаружень еди ки; "-" - воэбудител зреч я:бнеру;снов к,дом поле 15 микробнь х клеток; тре 10-15 г,олейницчье микробнье клеть не обнаружен Составитель А,ФедоровРедактор И.Дербак Техред М.Моргентал Корректор Н.Король Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101 Заказ 242 Тираж Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раушская наб;, 4/5