Способ получения регенерантов картофеля in viтrо

СОЮЗ СОЕЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИХРЕСПУБЛИК(11) А 0 1 Н 4 /00 ГОСУДАРСТВЕННЫПО ИЗОБРЕТЕНИЯМПРИ ГКНТ СССР КОМИТЕТ ОТКРЫТИ ИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕН аучное по кар ернозем" Юааб ридиз акова к биотехься в геней, а также микроклорусных раско е и со та образомСтебрастениищают нщую 11 Н 4)150 мг15 мг/ллаеждоузлия проеля вычленяюную Среду,мг/лСаСТ15 мг/л, Б8000 мг/л,ют при 24 С,чныхпом арто ти есодержа109АП 10воду доосвещен, пита ИОз 4 л, 11 Уага инку б тель0 60К 8 левые экспла сорта Смеиру СКОМУ СВИДЕТЕЛЬ(71) Институт общей генетикиим,.Н,ИВавилова АН СССР и Нпроизводственное объединенитофелеводству Агропрома Нечной зоны РСФСР(56) Сидоров ВА, Глеба ЮСытник.К.М, Соматическая гиция пасленовых, - Киев: Наудумка, 1985,Изобретение относитсянологии и может применятичесой инженерии растенив сельском хозяйстве принапьном размножении безвтений картофеляЦелью изобретения являрение получения регенерахранении их генетическойности б осуществляется следующим(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ РЕГЕНЕРАНТОВКАРТОФЕЛЯ ХБ Ч 1 ТКО(57) Изобретение относится к биотехнологии и может применяться в генетической инженерии растений, а такжев сельском хозяйстве при микрокпональном размножении безвирусныхрастений картофеляЦелью изобретения является ускорение получения регенерантов при сохранении их генетической стабильности, Способ предусматривает предварительное культивирование на агаризованной среде, содержащей макроэлементы и ряд фитогормоновс последующим переносом ткани на модифицированную среду Мур асиге-Скугадля получения регенерантов. 2 табл. ности 4000 лк и 16 часовом. фотопериоде в течение 20-30 ч Затем эксплантаты переносят на модифициро ваннупитательную среду Мурасиге-Скуга,содержащую сахарозу 1000-1500 мг/л,маннит 3000-5000 мг/л, ИУК 0,0050,3 мг/л, БАП 2-3 мг/л, агар О0,8000 мг/л и культивируют при техже условиях в течение 6-8 сут, Затемэксплантаты переносят на модифицированную среду Мурасиге-Скуга, содержащую 12000-20000 мг/л сахарозы, 23 мг/л БАП, .3-6 мг/л гибберелловойкислоты и 0 8000 мг/л агара, и культивируют в течение 2(-22 сут притех же условиях до получения регенер анто в,При глер 1, Стеб Нффтаты растений картофеля1644830 Таблиц а 1 1тстЧи сло егене актов ббеой предс о спо ты на е о 4 неде культи вирова немкульто овани 18 н ния в сред,на экспл,) н о по м 1 ать вСм Й, 45 Не получен20 84-2 по- ено+ Способ артофеля адку сте ательную 5 луч 15+ на" вычленяют и помещают на среду, содержащую ИН.Ю 9 40 мг/л, СаС 1 г 100 мг/л, ИУК 8 мг/л, БАЛ 10 мг/л, агар 8000 мг/л. После инкубации на данной среде в течение 20 ч при 24 С, освещенности 4000 лк и 1.6-часовом Фотопериоде культивирование продол жают при тех же условиях на модифи цированной среде Мурасиге Скуга, со О держащей 1000 мг/л сахарозы, 3000 мг/л маннита, 0005 мг/л ИУК и 2 мг/л БАП После культивирования в течение 6-8 сут растительный материал перено сят на модифицированную питательную 5 среду Мурасиге-Скуга, содержащую сахарозу 12000 мг/л, БАП 2 мг/л, гибберелловую кислоту 3 мг/лНа 20-е сутки образуются регенеранты, которые в дальнейшем укореняют и 20 адаптируют к условиям открытого грунтаП р,и м е р ы 2, 3 осуществляют аналогично примеру 1, при этомэксплантаты помещают на питатель" 25 ные среды, содержащие компоненты в ко нцентрациях, соответствующих верх ним и средним значениям заявленных интервалов, в исследования включают гибрид 184-2 и гибрид 750. Регенеран" 30 ты получают на 22-е сутки после помещения на последнюю модифицирован ную среду, Результаты представлены в табл, 1, 2 вленных материалов видб является очень эффективным: большое число регенера получают в течение 4-6 недель обычном их получении через 13 дель культивированияКроме то при отсутствии стадии недиффер рованного роста клеток возможн чение генетически стабильного риала, который можно использов генетической инженерии растени ормула изобретен получения регенерантов1.п чхго, включакщий поевых эксплантатов на пиреду и культивирование до получения регенерантов, о т л нч ающий ся тем, что, с цельюускорения получения регенерантов присохранении их генетической стабильности, культивирование осуществляютв следующей последовательности: сначала эксплантаты помещают на 20-30 чна питательную среду следующего состава, мг/л:ВН,ЯО, 40 60Сас 1 100".150ИУК 8 15БАЛ 10 15Агар 0-8000Вода дистиплированная До 1 лзатем культивируют в течение 68 сут на модифицированной питательной среде Мурасиге-Скуга, содержащей сахарозу в количестве 0001500 мг/л, маннит 3000-5000 мг/л,ИУК 0,005-0,3 мг/л, БАП 2-3 мг/л,после чего переносят на модифициро"ванную питательную среду МурасигеСкуга, содержащую сахарозу в количестве 12-20 г/л, БАП 2-3 мг/л игибберепловую кислоту 36 мг/л, накоторой осуществляют получение реге"нерантов,1644830 Таблиц а 2 Не обнаружено50 60 Нр едлаг ае алый Из ве стные Со ставитель В,Демкин Редактор . М,Циткина Техред М,Дидык Корректор Т,МалецЗаказ 1301 Тираж 362 ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям прй ГКНТ СССР 113035, Москва, 3-35, Раушская наб., д. 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г.ужгород, Ул. Гагарина, 101