Способ получения носителя иммуноглобулинов для обнаружения возбудителя чумы

(51 0 531 . ИС АВТОР ат ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ ССС ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТ У СВИДЕП.ПЬСТВ(56) Авторское свидетельство СССР Ф 1227006, кл. С 01 8 33(531, 1985. (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ НОСИТЕЛЯ"ИИЙУ. НОГЛОБУЛИНОВ ЛПЯ ОБНАРУЖЕНИЯ ВОЗБУДИ теля чуиы(57) Изобретение относится к м ской микробиологии, точнее к с гическим методам лабораторной ностики чумы. Цель изобретения мощение снособа получения носителяиммуноглобулинов и повышение качествацелевого продукта за счет ускорения обнаружения возбудителя чумы.Для этого в дистиллированной водерастворяют поливннилпирролидон, диоксан, акролеии, перемевивают, добавляют гидразин и конго красное в Мводы по отноаению ко всей реакционной смеси. СмесЬ перемеаиваютчдля заверщения роста полимерщжчастиц, доводят рй до 11,б добавлением раствора едкого натра я перемевивают еще 1 ч. Полимерну дисперсиюс частицами Ф 3 мкм осавдают центрифугированием и отмыв дистиллированной водой.И.-обретение Относится к медицинской м 51 кробе 5 олпги 51, я именно к серолог 5 еч 5 с 1551 м методам лабораторной йиаг 1 Ос Т 11 к 1 ц ум 11,Известен способ получений носителяе 1 мму 1 оглобулинон на основе зритроцитОБ баазия,Цельо 1 зобре 55 е 11 ее 1 является упрощение епособя получения носитЕля иммуноглобулинов и повышение качества целевого продукта за счет ускореяияОбнаружения Возбудителя чумЫ,П р и м е р 1, В б 9,6% дистилли"ронянной Воды растворяют 1% поливинилниррслицона, 4% диоксана и 21%якролеи 11 я. К раСте 5 ору при перемешива 1 ВЕи добявгеЕнот 0,2% гицразина и 0,2%1 Олго красного Б 4% ВОды по ОтеОшени 5 око.всей реяк 1551 онное 5 смеси. СмесЬ пере-О11 Е 1111111 Я 1 О 1Ч ДЛЯ ЗазерШЕНИЯ Ростаполимерных частиц, зятем доводят рНдо 1,О добеВлением 0,2 М раствораед 1 еого патря и перемешива 1 от еще 1 чПолим, р 51 у 1 о дисперси 1 о с диаметром час.- 25гетц 5 мкм Осаждают центрифугированиеми От 15 ьн 5 я 1 от дистиллированной водой.П р н м е р 2., Б 71,75% дистилли"ро 15 янной ВОды растворяют 1% поливинил-,пнрролидона, 4% диоксана, 19% акролеи 5 ЗО1иа, К раствору для полимеризации,цобднллют 0,15% гидразина и О, 1%конго красного В 4% воды. Далее поли-меризяц 51 ю проводят при рН 10,5. Диа 1метр частиц препарата 3 мкм.П р и м е р 3. Смесь 74, 1% дистйллирОБаьнои ВОды, 0,5% поливинилпирролкдОе 5 Я, 4% диоксяня и 17% аКролеина нолимеризуют, как в примере 1.Диаметр частиц препарата 2,5 мкм.П р и м е р 4. Приготовление диагностикумя.,Смесь 100 мг суспензии полимера и 0,25-1,0 мг иммуноглобулинав 3 мл забуФерене 5 ого Физиологеческого раствора хлористого натрия с рН 7,0.выдерживают при периодическом перемешивянии 18 ч при 4 С, Отмытый физиологическим раствором хлористого натрия препарат сус 11 ендируют в 8 мл этого раствора с 0,1% бычьего сывороточного альбумииа и используют для постановки реакции.П р е 5 м е р 5. Методика постановкиреакции. В лунки полистироловь 5 х Плас-,тие 5 разливают по 0,5 мл раствора1%-е 5 ОЙ нормальной кроличьей сывороткив физиологическом растворе хлористого натрия. В первую лунку добавляют0,5 млисследуемого материала в физиологическом растворе и путем последовательного переноса 0,5 мл смесииз лунки в лунку готовят последовательные разведений, Контрольные лункине содержат антигена. В каждую лункудобавляют по 1 капле сенсибилиэированной суспенэии,полимера, пластинкуосторожно встряхивают, оставляют иа1,5-2 ч, после чего производят учетреакции. При положительной реакцииобразуется агглютинат, равномерновыстилающий дно лунки. При отрицательном результате и в контроле пре парат собирается на дне лунки в видекомпактного осадка или колечка красного цвета11 редлагаемьей способ ероще, чемспособ-.-,рототип: полимеэизация проте. -кает в оде стадию., носитель пслучается окраее 5 енным, имеет готовые ревк"ционные группы и не нужпается в дополнительной хи 5 ической Обр,"ботке.Полученный на основе этого носитеЛя диагностикум позволяет обнаруживать вобъемных серолоеических 1 еакциях возбудитель чумы за 1,2что в 3-4 раза быстрее, чем с помощы 6диагностику 55 а, приготозленного поспособу-проеотипу.По чувствительности диагностикум,полученный на основе предпагаемого носителя, не уступает диагностик."му,описанному в прототипе и зритоцитафному чумному.диагностикуму,Диагностикум, 11,.5 лученный опиаывае"мым способом, был проверен на :пеци 4 ичность с 15 штаммами Т.рвеМойиЬегсц 1 ов 1 в, 11 - Е.со 11, 6 - Ч.сЬО 1 егае,10 - 7,йа, 4 Ч,е 1 йог, 5 - Аегошопав, Т " В.ша 11 е 1, 1 - В,11 веМоша 1 .1 е 1, 5 - Рвеце 1 ошопаа, 16 " Уг,йо 1 а"гепв 1 в,. 3 - В,апсгасоЫев, 4 - ЗЬ.дувепйег 1 ае, 5 - ВарЬ.апгеив, 5 -Сошшашопав.5С указанными микроорганизмами вконцентрации 10,мк./мП реакции былиотрицательны. формула йзобретеяияСпособ получения носителя иммуно" глобулииов для обнаружения возбудителя чумы, включающий полимеризацию мономера в водном растворе, о т л и " ч а ю щ и й с я тем, что, с целью упрощения способа и повьпвения качест" ва целевого продукта за счет усковаСоставитель Г.КрюковаТехред Н.Ходанич Корректор И.Иаксимивинец Редактор Л.Волкова Тираз 754 ПодписноеВНИИПИ Госъдарственного комитета СССРпо делам изобретений и открытий113035, Москва, Ж, Раущская наб д, 4/5 Заказ 2810 гПроизводственно-полиграфическое предприятие, г Уагород, ул, Проектная, 4 з 443578 4ния обнаружения возбудителя при поли,5-1,0 У. поливинилпирролидона, 4 Хмеризации использувт 17-213-ный вод- диоксана и О,"0,23 красителя конго. ный раствор акропеина, при этом его красного, а затем не менее 1 ч при .инкубируют сначала не менее 1 ч с рН 10,5-11,0,0,15-0,2 Х 1 гидразина .в присутствии