Способ количественного определения углеводородов в биомассе дрожжей, выращенных на углеводородах

(89) /219 (21) но к способу определ углеводородов в биом ращенных на нефтяных Цель изобретения - п верности определения дрожжей гидрализуют щелочью при кипении дильником, смесь про углеводороды экстраг ном, циклогексановый вают, остаток раство или смеси равных объ и и-гексана и провод Швед дова ле- елковых(72)Л,А.хабе в), ль- инс и Са (53) хроматографию на окиси алюминия пользованием,в качестве элюента 54)ЛЕНИЯЖЕЙ,57) ат после колонвают до постоянрактеризует ков в пробе биое раствор и упарива ой массы,елен. Эл и высуши оторая х еводород л личество углмассы. 1 та иоло СУДАРСТ 8 ЕКНЫЙ НОМИТЕТ СССРДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИИ ВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВ 00 /16 1 И/15,77. 0777236 / 116.04.8223.04.88. Бюл. У 15ФЕБ Петролхемишес Комбинат(РР) и Всесоюзный научно-иельский институт биосинтезавеществ (Я 1)Юргин Лангнер, Герт Генг (ОЗюкова (ЯУ), Энгельберт ФауСигфрид Маршин, Фолькер Ринс Креше (РР)663.18(088,8) ПОСОБ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕУГЛЕВОДОРОДОВ В БИОМАССЕ ДРОЖЫРАЩЕННЫХ НА УГЛЕВОДОРОДАХзобретение относится к микроической промьппленности, а именния количества ссе дрожжей, в дистиллятах, вышение достоСухую биомасс течение 3 ч обратным холо мывают водой, руют циклогекс экстракт упари яют в бензоле мов хлороформа т колоночнуюИзобретение относится к микробиологической промышленности, а именнок способу определения углеводородовв биомассе дрожжей, выращенных с использованием углеводоров в качествеисточника углерода.Известен способ определения углеводородов в биомассе дрожжей (1 ЦРАС1 пГогш. Вц 11 ег 1 п ТесЬпо 1, Керогг, 1 О1974, 9 12, р, 20),Цель изобретения - повышениедостоверности определения.Способ осуществляют следующим образом. 15Сухую биомассу дрожжей, выращенных ца углеводородах, предварительно очищенную от основного количествауглеводородов экстракцией, гидролизуют щелочью в течение 3 ч при кипении с обратным холодильником, После гидролиза углеводороды экстрагируют многост,пенчато циклогексаном.Полученные циклогексановые фракциипромывают дистиллированной водой исушат. Остаток растворяют в небольшом количестве бензола или смесихлороформа и н-гексана (1:1) и хроматографируют на колонке с окисьюалюмцния с использованием в качествеэлюента указанных растворителей, После хроматографии раствор упариваютдо постоянного веса, по которому судят о количестве остаточных углеводородов,35П р и м е р 1, В круглодоннойколбе объемом 500 мл при помощи сильного встряхивания смешивают 20 г сухих кормовых дрожжей, выращенных нанефтяном дистилляте и экстрактивноочищенных, 20 г гидроокиси калия,20 мл дистиллированной воды и 200 млэтанола, значение рН среды 12. Полученную смесь кипятят 3 ч с обратнымхолодильником, После гидролиза добавляют 100 мл дистиллированной водыи многоступенчато экстрагируют,200 мл циклогексана, Циклогексановыефракции промывают дистиллированнойводой и сушат сульфатом натрия, После отделения сульфата натрия углеводородсодержащий циклогексан сушат в вакууме до остаточного объема 1 мл. Остаток растворяют в небольшом количестве бецзола и хроматографируют в стеклянной колонке длиной 20 см и диаметром 2 см с окисью алюминия первой ступени активности, Элюацию ведут 125 мл бензола, Прошедший колонку раствор упаривают до постоянного веса в вакууме с помощью очищенного и высушенногогазового потока. Результаты представлены в таблице,П р и м е р 2, Способ осуществляют согласно примеру 1, но в качестве растворителя при хроматографии используют смесь, состоящую Изравных объемов хлороформа и н-гексана. Содержание углеводородов составляет 2,31 г/кг дрожжей, При анализеаналогичных проб известным методомполучают суммарное количество ароматических углеводородов и ц-алкацов,равное 1,15 г/кг дрожжей,Таким образом, описанный способпозволяет выделять все виды углеводородов и, следовательно, болеедостоверно проводить их определение.Формула изобретенияСпособ количественного определения углеводородов в биомассе дрожжей, выращенных на углеводородах, предусматривающий щелочной гидролиз биомассы, экстракцию углеводородов, очистку полученного экстракта колоночной хроматографией ца окиси алюминия с последующим установлением количества углеводородов, о т л ич а ю щ и й с я тем, что, с целью повышения достоверности определения, щелочной гидролиз ведут в течение 3 ч при кипении, экстракцию углеводородов осуществляют циклогексаном, в качестве элюента при колоночной хроматографии используют бензол или смесь хлороформа и н-гексана, взятых в соотношении 1;1, а установление количества углеводородов проводят гравиметрическим методом.1390530 Содержание углеводородов по способу,г/кг дрожжейПроба предлагаемому известному Ароматические н-Алканы Ароматические углево углеводороды дороды ин-алканы(сумма) 1,68 0,47 0,13 0,60 15,90 0,51 3,00 3,51 Составитель ГСмирноваТехред М.Ходанич Корректор А.Обручар Редактор С,Пекарь Заказ 1760/42 Тираж 520 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб д, 4/5