Способ определения сенсибилизации лейкоцитов

О)ОЗ СОВЕТСКИХ ОЦИАЛИСТИЧЕСКИХРЕСПУБЛИК 3 А 1 М 33/4 ГОСУДАРС ПО ДЕЛА 1 П,ТЕННЫЙ КОМИТЕТ СССРЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИИ(71) Харьковский наутельский институт миакции и сывороток и вва(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СЕНСИБИЛИЗАЦИИ ЛЕЙКОЦИТОВ(57) Изобретение относится к иммунологии. Цель изобретения - повышениечувствительности способа. Образцыкрови с исследуемым аллергеном инкубируют, Затем готовят мазки крови:и окрашивают их. Подсчитывают содержание измененных лейкоцитов в опытном и контрольном мазках и определяют индекс сенсибилизации лейкоцитов.Способ позволяет диагностироватьаллергические процессы, связанныес инфекционными, неинфекционными иаутогенными аллергенами.1359743 10 15 20 35 Н- Н 100 50 Изобретение относится к медицине, а именно к иммунодиагностике аллергических состояний.Целью изобретения является повышение чувствительности способа.Способ осуществляется следующим образом.0,08 мл крови переносят стерильной пипеткой в две видалевские про" бирки, одна из которых служит контролем, а вторая - опытом. В опытную пробирку предварительно помещают 0,02. мл исследуемого аллергена на 5%-ном растворе цитрата натрия, а в контрольную - 0,02 мл 5%-ного раствора цитрата.натрия (стандартные аллергены смешивают с антикоагулянтом - 25%-ным раствором цитрата натрия в соотношении 4:1, нестандартные аллергены используются в дозах, соответствующих постановке тест-показателя повреждения нейтрофилов, Затем пробирки с исследуемыми образцами крови инкубируют в термостате при 45о46 С в течение двух часов, после чего готовят мазки и окрашивают их по Май-Грюнвальду Папенгейму или Романовскому-Гимза, Учет реакции проводят путем подсчета процентного содержания измененных лейкоцитов в опытном (Н,) и контрольном (Н) мазках. Индекс сенсибилизации лейкоцитов определяется по формуле Оценка результатов: отрицательные - индекс 0 - 0,05; положительные - индекс 0,06 - 0,3 резко положительные индекс более 0,3.П.р и м е р. Больной Х, Диагноз хронический декомпенсированный тонзиллит, частые ангины в анамнезе. Поступил в клинику ЛОР болезней для проведения тонзиллэктомии. В день поступления проведено определение сенсибилизации лейкоцитов крови к стрептококковому ( КНИИЭМ ) и тканево- му аллергенам,Кровь, полученную из пальца больного стандартным методом, переносили стерильной пипеткой в три видалевские пробирки по 0,08 мп, одна из которых служила контролем, две другие были опытными. В контрольную пробирку предварительно помещали 0,02 мл 5%-ного цитрата натрия, а в опытные -исследуемые аллергены ( в первую -0,02 мл стерптококкового аллергенана 5%-ном растворе цитрата натрия, вовторую - 0,02 мл тканевого аллергенана 5%-ном растворе цитрата натрия) .Затем пробирки с исследуемыми образцами крови инкубировали в термостаоте при 45 С в течение двух часов,после чего готовили мазки и окрашивали их по Май-Грюнвальду. При подсчете учитывали процентное содержаниеклеток с гомогенной базофильной цитоплазмой по отношению к лейкоцитамс неизменной цитоплазмой и ядром.В пробирке со стрептококковымаллергеном количество измененных лейкоцитов,составило 31%, в пробирке стканевым аллергеном - 47%, в контролькой пробирке 5%. Индекс сенсиби-лизации лейкоцитов определяли по форН - Н,муле в-- где Н - процентное100содержание измененных лейкоцитов в опытном мазке; Н- в контрольном. Индекс сенсибилиэации к стрептококковому аллергену составил 0,26, к тканевому - 0,42.Таким образом, полученный резуль" тат характерен для больных декопенсированной Формой хронического тон-. зиллита, Проведенный патоморфологический контроль подтвердил клинический диагноз.Из результатов сравнительной оценки эффективности предлагаемого и известного (прототип) способов, полученных при исследовании; 3 группбольных по 20 человек в каждой, сле 40 дует, что предлагаемый способ определения сенсибилизации лейкоцитовобладает существенно выраженными диагностическими преимуществами посравнению с известным, обеспечиваяпри турбекулезе повышение индексаповреждения лейкоцитов с турбекулином в 2,16 раза (0,268+0,0835 ИСЛ по предлагаемому и 0,124+0,0317 по.прототипу), при непереносимостистрептомицина - 2,2 раза (0,1034. 0,0294 и 0,0470,0122 соответственно), при непереносимости новокаина - в 1,35 раза (0,1680,0509 и 0,124+ 0,0373 соответственно). Представленные данные показывают,что предлагаемый способ определениясенсибилизации лейкоцитов универсально пригоден для диагностики аллергических процессов, индуктивно связан1359743 Составитель В,ЛитовченкоРедактор Т.Парфенова Техред Л.Сердюкова Корректор В.Бутяга Заказ 6151/48 Тираж 776 ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб д,4/5Подписное Производственно-полиграфическое предприятие, г,ужгород, ул.Проектная,4 ных с инфекционными, нейнфекционными и аутогенными аллергенами, характеризуется высокой степенью специфичности, выраженной диагностическойчувствительностью, позволяет выявлятьаллергические состояния не определяемые известными методамн. Таким образом, к перимуществам предлагаемого способа определения сенсибилизации лейкоцитов относится: повышение диагностической чувствительности предлагаемого способа в сравнении с прототипом в 1,2-2,16 раза; упрощение методики оценки результатов реакции и обработки мазков крови, что делает доступным проведение исследования в клинических лабораториях; проведение методики постановки и оценки результатов реакции в соответствии с патогенетически ведущими факторами аллергического воспаления, протекающего в условияхповышенной температурной реакции,позволяет регистрировать все участвующие в определении аллергическогостатуса клетки вне зависимости отстепени их специфичности. Формула изобретения10 Способ определения сенсибилизациилейкоцитов, включающий инкубацию лейкоцитов крови больных с аллергеном споследующим приготовлением мазков 15 крови и их окрашивание, о т л и ч аю щ и й с я тем, что, с целью повышения чувствительности способа, лейкоциты с аллергеном инкубируют при45-46 С, окраску мазков проводят 20 по Май-Грюнвальду и по наличию клеток с гомогенной базофильной окраской или их цитолиза определяют сенсибилизацию лейкоцитов,