Способ консервирования спермы человека

4 А 0 ПИСАНИЕ ИЗОБРЕТ ИДЕТЕЛЬСТВУ ВТОРСКОМ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ ССС ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТ(46) 30. 11.87. Бюл. О 44 (71) Институт проблем криобиологии и криомедицины АН УССР.(56) Авторское свидетельство СССР Иф 1103837, кл. А 01 В 1/00, 1982. (54) СПОСОБ КОНСЕРВИРОВАНИЯ СПЕРМЫ ЧЕЛОВЕКА(57) Изобретение относится к медицине, предназначено для ниэкотемпературного консервирования спермы человека для искусственной инсеминации. Цель изобретения - повышение выжива" емости спермы человека. Для этого.БОИ 55212 сперму помещают на.25-30 мин в термостат (37 С) для разжижения. Затем к сперме добавляют в соотношении 1:1 консервирующую среду со следующими компонентами, мас. Х; глюкоза 3,7- 4,3; натрий лимоннокислый 1, 1-1,4, желток куриного яйца 24,0-30,0; 20 Х-, ный р-р холинахлорида 1,6-2,4, глицерин 4,6-6,0; вода дистиллированная - остальное. Затем сперму разливают в подключичные катетеры после 45-60 мин эквилибрации при комнатной температуре. Замораживают с на" чальной скоростью 0,5 град/мнн до +2 - +5 С, затем 90-100 град/мин до температуры от -180 до -190 С, переносят в жидкий азот для хранения. Втабл.1, 1-1,4 20 25 50 13552Изобретение относится к медицине и может быть использовано при ниэкотемпературном консервировании спермы человека с целью искусственной инсе 5 минации.Целью изобретения является повышение выживаемости спермы человека.Способ осуществляют следующим образом. 10Сперму помещают на 25-30 мин в термостат (37 С) для разжижения. После этого к сперме в соотношении 1:1 добавляют консервирующую среду, содержащую следующие компоненты, мас,7,: 15Глюкоза 3,7-4,3Натрий лимоннокислыйЖелток куриногояйца 24,0-30,020 -ный растворхолинахлорида 1,6-2,4Глицерин . 4,6-6Вода дистиллированная ОстальноеПосле 45-60 мин эквилибрации при комнатной температуре сперму разливают в подключичные катетеры.Замораживание осуществляют сначала со скоростью 0,5 град/мин до 2 - 30 5 С, а затем со скоростью 90 100 град/мин до температуры от -180одо -190 С, после чего переносят в жидкий азот для хранения. Размораживание осуществляют в водяной бане при 40 С в течение 5-7 с.П р и м е р 1. Для опыта взяли сперму со следующими показателями; объем эякулята 2,4 мл, общее количество сперматозоидов 136 млн в 1 мл, 40 иэ них активно подвижных 65 Х, подвижных форм 713, нормальных форм 807, лейкоцитов 1-2 в поле зрения, простатические тельца изредка, вязкость нормальная. 45К 2 мл спермы после ее разжижения добавили 2 мл среды, содержащей,мас,Е:Глюкоза 4,0Натрий лимоннокислый 1,2Желток куриного яйца 26,0Глицерин 5,0203-ный растворхолинахлорида 2,0Вода дистиллированная ОстальноеЧерез 45 мин после этого спермой заполнили подключичные катетеры диаметром 1,4 мм по 0,3 мл и заморозилиСкорость охлаждения на 11 этапе Подвижность спермов после размораживания, 7 замораживания,С/мин90 48,81+1,48 100 46, 13+3,42 Приведенные примеры свидетельствуют о том, что применение глицеринав концентрации 4,6-67. и ведение замораживания на 11 этапе со скоростью90-100 град/мин способствует повышению выживаемости спермы после размораживания, что является весьма существенным для последующей инсеминации.Формула изобретенияСпособ консервирования спермы человека путем двуступенчатого замораоживания до -180 -190 С в криокон 12 2ее сначала со скоростью 1 град/мин до +2 С, а затем "со скоростью 90 град/мин до -180 С, после чего образцы перенесли для хранения в жидкий азот. Размораживание осуществляли через 3 недели хранения в водяной бане при 40 С в течение 5 с.Данные сперматограммы: рН 7,4, общее количество спермиев в 1 мл 62 млн, подвижных спермиев 55%, активно подвижных 433, спермиев нормальной формы 727.П р и м е р 2, Для опыта взяли 2 пробы спермы по 2 мл и добавили к ней по 2 мл среды, содержащей,мас,7:Глюкоза 4,0Натрий лимоннокислый 1,2Желток куриногояйца 26,0Глицерин 5,0207-ный растворхолинахлорида ОстальноеПосле расфасовки спермы по 0,3 мл в подключичные катетеры ее заморозили: сначала обе пробы заморозили со скоростью 1 град/мин до +5 С, а затем одну пробу замораживали со скоростью 90 град/мин, другую - со скоростью 100 град/мин. После того какобе пробы заморозили до -180 С, ихперенесли для хранения в жидкий азот. Через три недели разморозили в водяной бане. При этом получены следующие результаты:Заказ 5731/4 Тираж 628 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб д. 4/5Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная., 4 серванте, содержащем глицерин, со скоростью замораживания на первом этапе 0,5-1,0 град/мин до температуры не выше +5 С, о т л и ч а ю - щ и й с я тем, что, с целью повышения выживаемости спермы, замораживание осуществляют в глюкозо-желточ 12 4но-цитратном консерванте, концентрация глицерина в котором составляет4,6-67., а отношение объема последнего к объему замораживаемой спермысоставляет 1:1, при этом замораживание на втором этапе ведут со скоростью, 90-100 град/мнн.