Способ определения невынашивания беременности

СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИХРЕСПУБЛИК 9 4 С 01 И 33/98 ЕНИЯ ПРЕДЕЛЕНИЯ НЕВЫ здоров аль- чнос 1983 ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССРПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ ОПИСАНИЕ ИЗОБ АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ(71) Всесоюзный научно-исследовательский центр по охране ьматери и ребенка(56) Баграмян Э.Р. и др, Гормонные методы диагностики недостатоти фетоплацентарной системы. М.:с. 23-31.(57) Изобретение относится к акушерству. Для повышения точности способав лимфоцитах определяют активностьщелочной фосфатазы и при увеличенииэтого показателя более 1,3 ммоль на2,5 10 лимфоцитов определяют невынашивание беременности. Активностьфермента определяют по формулейА/мин 5460, где А - оптическая плотность раствора.45 50 55 Изобретение относится к медицине,а именно к акущерству, и может бытьиспользовано для определения невынашивания беременности.Целью изобретения является повышение точности способа за счет определения активности щелочной фосфатазы в лимфацитах крови больного.Способ осуществляют следующим образом.Лимфоциты выделяют иэ 3-5 мл гепаринизированной крови путем центрифугирования в градиенте плотностификолла, Кровь или лейкоцитарнуювзвесь в количестве 2-3 мл наносятна предварительно подготовленныйраствор фиколла (8 объемов 9%-ноговодного раствора фиколла и 2 объема767-ного верографина), доведенногодистиллированной водой до плотности1,077 г/мл. Пробирки с образцами центрифугируют в течение 40 мин при 20и 600 С. После центрифугирования отбирают иэ пробирок беловатый слойлимфоцитов и трижды отмывают физиологическим раствором, рН 7,1-7,2,при 4-8 С по 10 мин при 200 С, Всуспенэии вьщеленных лимфоцитов подсчитывают количество клеток в 1 мл.Лимфоциты гомогениэируют и гомогенатоцентрифугируют при 600 С в течение010-15 мин при 4-8 С. В супернатантеопределяют активность щелочной фосфатазы,Определение щелочной фосфатазыосуществляют по изменению оптической плотности субстрата при 405 нм втечение 1 мин при 25 С в кювете толощиной 1 см (2),Для определения активности щелочной фосфатазы реакционная смесь содержит 0,02 мл исследуемого образцасупернатанта гомогената лимфоцитови 2,0 мл субстрата, содержащего,ммоль/л: паранитрофенилфосфата 10,хлористого магния 0,5, диэтаноламинового буфера 1, рН 9,8. Полученнуюсмесь тщательно перемешивают и инкубируют при 25 С в течение 1 мин, азатем при 405 нм измеряют оптическуюплотность. Активность фермента расчитывают по формуле г 1 А/мин 5460 ивыражают в мкмоль/мин мл, Активностьщелочной фосфатазы в лимфоцитах выражают в мкюоль/2,5 104 лимфоцитов,где А/мин - изменение оптическойплотности раствора в минуту; А - оптическая плотность раствора. 5 10 15 20 25 30 35 40 При значении этого показателя более 1,3 мкмоль/25 10 лимфоцитов определяют невынашивание беременности,П р и м е р 1. Беременная И-ва, 27 лет, беременность 2. Комплексное клинико-лабораторное обследование в 7-8 недель беременности показало отсутствие соматических заболеваний и акушерской патологии, Уровень хорионического гонадотропина в моче соответствовал нормативным значениям для данного гестационного срока, Применение предлагаемого способа позволило установить, что активность щелочной фосфатазы в лимфоцитах составляет 0,51 мкмоль/2,5 10 лимфоцитов, что свидетельствовало об отсутствии невынашивания. Последующее наблюдение не выявило акушерской патологии в течение беременности, которая закончилась срочными родами живым доношенным ребенком.П р и м е р 2, Больная К-ва 33 лет, беременность 4, В анамнезе 3 самопроизвольных выкидыша в сроки от 8 до 21 недели беременности.Несовместимости по резус-фактору и системе АВО не выявлено. При гинекологическом обследовании на 7-8 недель беременности клинических признаков невынашивания беременности не выявлено. Уровень хорионического гонадотропина в моче соответствовал нормальному содержанию, Применение заявляемого способа показало, что активность щелочной фосфатазы в лимфоцитах составляет 1,32 мкмоль/2,5 104 лимфоцитов, что позволило определить невынашивание беременности. Несмотря на проведение комплексной терапии, направленной на сохранение беременности, беременность прервалась в течение 8-9 недель. П р и м е р 3. Больная Н-ва 25 лет, страдает привычным невынашиванием, в анамиозе 2 самопроизвольных выкидыша в сроках 13-23 недели беременности, Групповых и резус-антителне выявлено. Больная предъявляла жалобы на боли внизу живота схваткообразного характера и кровянистые выделения из половых путей. По даннымультразвукового исследования отмечена повышенная возбудимость миометрия.Уровень хорионического гонадотропина в моче соответствовал гестационному сроку, Применение предлагаемогоспособа показало, что активность щеСоставитель НВалееваРедактор Ю.Середа Техред А.Кравчук Корректор М,Пожо Заказ 5183/43 Тираж 775 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб д, 4/5Производственно-полиграфическое предприятие, г. ужгород, ул. Проектная, 4. Э 13487 лочной фосфатазы в лимфоцитах составляет 8,6 мкмоль/2,5 10 клеток.Эти данные подтвердили невынашивание беременности. Проведенная ком 5 плексная терапия, направленная на сохранение беременности, позволила пролонгировать беременность, которая закончилась срочными родами живым доношенным ребенком. 10Использование предлагаемого способа в медицинской практике позволяет повысить точность определения не- вынашивания беременности на 77,37, а также позволит определять невынаши вание беременности в течение всего гестационного периода, в том числе и 32в триместре беременности, что позволяет своевременно проводить комплекс" ную терапию, направленную на сохранение беременности. Формула изобретенияСпособ определения невынашивания беременности путем исследования биологической жидкости, о т л и ч а ю - щ и й с я тем, что, с целью повышения точности способа, в лимфоцитах определяют активность щелочной фосфатаэы и при увеличении этого показателя более 1,3 мкмоль на 2,5 104 лимфоцитов определяют невынашивание беременности.