Способ определения углеводного состава пищевых продуктов растительного происхождения

СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСНРЕСПУБЛИК 801176246 4 С 01 МЗЗ/О ГОСУДАРСТВЕННЫ О ДЕЛАМ ИЗОБРЕ ОМИТЕТ СС ИЙ И ОТКР ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ ТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ стратоватут народного растых(5 б) Методы биохимического исследования растений. Л.: Колос, 1972,с. 455.(54)(57) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ УГЛЕВОДНОГО СОСТАВА ПИЩЕВЫХ ПРОДУКТОВ,РАСТИТЕЛЬНОГО ПРОИСХОЖДЕНИЯ, предусматривающий экстракцию моно- и дисахаридов этиловым спиртом и последующие экстракции пектина водой ипротопектина соляной кислотой, атакже гемицеллюлоз групп А и Бворами гидроксида калия различи концентраций и ю-целлюлозы серной кислотой с колориметрическим определением количества углеводов в экстрактах, отличающийся тем, что, с целью сокращения времени анализа путем одновременного установления количества крахмала в той же пробе, перед экстракцией пектина образец подвергают нагреванию до 98-102 С в течение 28-32 мин, затем подвергают гидролизу ферменотом диастазой при ЗбС в течение 4-5 ч и гидролизу соляной кислотой с концентрацией 1,5-2,5 Е при 70-80 С в течение 23-27 мин, отделяют осадок и определяют в надосадочной жидкости количество моносахаридов, а коли- фф ф чество крахмала определяют по найден- ( ному количеству моносахаридов.Изобретение относится к Пищевой промышленности и может быть использовано при анализе пищевых продуктов растительного происхождения.Целью изобретения является сокра щение времени анализа путем одновременного установления количества крахмала в той же пробе. Сущностьизобретения заключается в том, что согласно известному способу, предусматривающему экстракцию моно- и дисахаридов этиловым спиртом и последующие экстракции пектина водой, а протопектина соляной кислотой, с последующим колориметрическим опре-, 15 делением количества углеводов в экстрактах, перед экстракцией пектина образец нагревают до 98- 102 С в течение 28-32 мин, затем гидролизуют Ферментом диастазой при Ю 36-37 С в течение 4-5 ч, а затем гидролизуют соляной кислотой с концентрацией 1,5-2,57. при 70-80 С в течение 23-27 мин, отделяют осадок и определяют в надосадочной жидкости количество моносахаридов, а количество крахмала определяют по найденному количеству моносахаридов.П р и м е р, Навеску 7+0,001 г серной пробы растительного материа ла тщательно растирают с 0,5-1 г толченого стекла до однородной кашицеобразной массы. Растертую массу переносят в термостойкие стеклянные центрифужные пробирки емкостью150 мл, заливают 30 мл кипящего 867-ного этилового спирта и экстрагируют простейшие сахара в течение 15 мин на водяной бане с воздушным холодильником. Содержимое пробирок 40 центрифугируют при 6000 мин-" в течение 15 мин. Надосадочную жидкость сливают в мерную колбу емкостью 50 мл и операцию повторяют еще 2 раза: 1-й - с 20 мл спирта, 2-й - с 45 10 мл, после чего все экстракты объединяют. В жидкой фазе производят определение простейших сахаров по фенол-серным способам.Остаток в центрифужных пробирках 50 суспенэируют в 100 мл горячей дистиллированной воды (температура воды 70-80 С), пробирки плотно закрывают крышками из алюминиевой фольги (в качестве каплеуловителей) 55 и помещают в ультратермостат при 100 С на 30 мин для клейстеризации крах;ала. Затем в пробирки, содержащие оклейстеризованный крахмали охлажденные до 40 С, добавляют10 мл 0,5 н.раствора ИаС 2 и 0,5 млраствора диастазы, ставят в термостат для ферментативного гидролизапри 37 С на 4 ч, периодическипомешивая содержимое стеклянной палочкой. Ферментный препарат диастазы готовят следующим образом,500 г хорошо размолотого солода заливают 350 мл воды и 700 мл глицерина, разбалтывают и оставляют на8 дней. Отжимают жидкость через полотно и фильтруют через бумажныйфильтр, Раствор может долго храниться без изменения.После ферментативного гидролизакрахмала в раствор переходят декстрины и мальтоза, которые расщепляют до глюкозы кратковременным кислотным гидролизом: 10 мл 27-нойНС 1 в течение 25 мин на водянойбане (70-80 С), Затем разделяюттвердую и жидкую Фазу центрифугированием при 6000 минв течение15 мин. Надосадочную жидкость пере"носят в мерную колбу на 200 мл, доводят до метки и определяют содержимое крахмала по глюкозе фенол-серным способом,Центрифужный остаток заливают50 мл воды, нагретой до 45 С и приэтой температуре экстрагируют в термостате при закрытых алюминиевыхкрышках пектин в течение часа, затем отделяют твердую фазу от жидкойцентрифугированием при 6000 минвтечение 15 мин, Надосадочную жидкостьсливают в мерную колбу на 50 мл,доводят водой до метки и определяютсодержание пектина карбазольным способом по галактуроновой кислоте. Дляизвлечения протопектина осадок вцентрифужной пробирке заливают 50 мл0,3 г НС 2 и нагревают полчаса в кипящей водяной бане с обратным воздушным холодильником. Снова центрифугируют при тех же условиях, сливаютнадосадочную жидкость в мерную колбуемкостью 250 мл, приливают 50 млгорячей воды, перемешивают содержимоепробирок стеклянной палочкой и центрифугируют. Жидкую фазу приливаютк экстракту в колбе, Операцию повторяют, добавляют 50 мл 17-ного раствора лимонно-кислого аммония иставят в кипящую водяную баню на30 мин. Снова центрифугируют приСоставитель Е.фетисовТехредс.Мигунова Корректор Е.Сирохман Редактор С.Тимохина Заказ 5353/44 Тираж 897 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4 3 1176246 4 . 6000 мин в течение 15 мин и сливают до рН 4,7. Затем проводят центрифужидкую фазу в мерную колбу к преды- гирование, жидкую фазу слцвают в дущим экстрактам, Затем приливают мерную колбу на 100 мл, доводят объ мл горячей дистиллированной воды ем дистиллированной водой до метки, к центрифужному осадку и перемешива Отбирают 50 мл из колбы в центрифужют содержимое стеклянной палочкой, ную пробирку и осаждают 987-ным спирпосле чего центрифугируют 15 мин том так же, как при извлечении гемии сливают жидкую фазу в ту же колбу. целлюлоз группы А. Операцию повторяют с 20 мл воды. За- Твердый остаток растительного матем содержимое колбы охлаждают, до О териала в центрифужной пробирке водят до метки и определяют содержи- используют для дальнейшего определемое протопектина карбазольным спо- ния целлюлозы, а полученные при собом,. осаждении спиртом осадки гемицеллюОсадок в центрифужной пробирке зали- лоз группы А и Б (отдельно) центри вают 35 мл 37-ного раствора КОН и остав 15 фугируют, отделяют от насадочной ляют на 2 ч при комнатной температуре, жидкости и количественно переносятпостоянно помешивая стеклянной па- в колбы на 25 мл 27.-ным раствором лочкой. Затем центрифугируют, соби- НС, доводят до метки и гидролизируют рают надосадочную жидкость в мерную на водяной бане с воздушным холоколбу, а к осадку приливают 5 мл 20 дильником 5 ч. горячей дистиллированной воды, пере- Полученный гидролиз отделяют от мешивают содержимое и центрифугируют. нерастворимого осадка центрифугироЖидкую Фазу переносят в мерную кол- ванием и переносят в градуированную бу и операцию повторяют. В зависи- пробирку или мерный цилиндр на 20 мл мости от ожидаемого содержания геми и доводят до определенного объема. целлюлоз половину или весь щелочной Содержание гемицеллюлоз определяют экстракт нейтрализуют концентриро- по глюкозе фенол-серным способом. ванной уксусной кислотой, доводя Остаток после извлечения гемицел- рН до 4,7. Из общего объема нейтра- люлоз, обработанный ацетоном, перелизованного экстракта 25 мл осажда- зо носят в колбу и заливают 10 мл 72 Х- ют в центрифужной пробирке 4-5-крат- ной серной кислотой и оставляют на ным количеством 987.-ного спирта. В. 2 ч при комнатной температуре. Заосадке - гемицеллюлозы группы А. тем добавляют 150 мл дистиллированОстаток в центрифужной пробирке ной воды и гидролизуют 6 ч на кипя- после извлечения гемицеллюлоз груп- щей водяной бане. Гидролиз центрифупы А экстрагируют 35 мл 157-ного гируют и доводят жидкую фазу до метраствора КОН при комнатной темпера- ки в мерной колбе на 250 мл. Эксттуре в течение 2 ч при постоянном ракт нейтрализуют 207-ной щелочью помешивании. Экстракт нейтрализуют и определяют целлюлозу по глюкозе - . концентрированной уксусной кислотой 4 фенол-серным способом.