Штамм 8, разлагающий -метилстирол

1/20, С 01/385 О ИЯ АНИЕ ИЗОБРЕТ ЖИТЕЛЬСТВ ТОРСИО(57) (Всемов Имикр ШТАММ РВЕН АГАЮЩИЙ К - Штамм Ряеи союзная кол летдинов ститута бирганизмовмер ВКМ Вметилстирол ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССРПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ(71) Институт биохимии и физиологи микроорганизмов АН СССР и Институт микробиологии и вирусологии АН Казахской ССР"Аг 1 сц 1 гига 1 апд В 1 о 1 ордса 1 С 11 ещ 1 яггу". 1974, ч, 38, В 2, р.409-42. Авторское свидетельство СССР У 1033542, кл . С 12 Й 15/00, 1982. ОМОИАВ АНКНСЕЮВА 8, МЕТИЛСТИРОЛ.ощопая аегпегпояа Я екция микроорганизохимии н физиологии АН СССР, коллекцион Д), разлагающийИзобретение относится к микробио-логии, представляет собой новьпштамм микроорганизмов, способныйразлагатью -метилстирол, и можетбыть использовано в химической промышпенности для очистки сточных водпри производстве синтетического каучука.К, -Метилстирол является высокотоксичным компонентом сточных вод про Оизводства синтетического каучукадивинилметилстирольного типа, загрязняющим не только водоемы, но и атмосферный воздух.Известен бактериальный эптамм 58 107 В 1, выделенный из почвы, способный частично окислятьК - метилстирол,не расщепляя при этом ароматическое"оцьцо 1Изээестен также штамм Вдсэ.11.цв 20сегецв 3, разрушающий К -метилстиГр .Однако известный штамм разлагает1-метилстирол лишь в концентра.ции2 г/л при продолжительности процесса 2514 сут в условиях ограниченной аэрации или 3 сут при встряхивапии накачалке.Целью изобретения является получение штамма Рвецсопэопав аегцяэ.поза 8 З 0рдзлдгающег о 06 -метилстирол, т. е,обладающего способностью к деградации К,-метилстирола с полным окислением длифдтического фрагмента ирасщеплением ароматического кольца,35Итамм выделен из сточных водпроизводства синтетического каучука,Птдмм полностью деградирует молекулуМ-метилстирола, используя его в качестве единственного источника углерода и энергии при концентрации егов среде 10 г/л. Процесс заканчивается через 2-3 сут,Характеристика штамма Рвецйоэпопав детцдэпова 8. 45Коллекционный номер ВКМ В.Ср едд дл я хр ан ения - МПА.Форма и размер клеток; 0,5-0,8 1,0-2,0 мкм у 24-часовой культуры, выращенной на мясо-пептонном бульоне.50 Клетки палочковидные, монотрихи, тип деления простой, грамм-отрицательныо.Нд мясо-пептонном агаре культура обрдзует круглые колонии дидметром 55 3-5 мм с ровными краями, слегка выпуклые, гладкие, блестящие, ныделяот в среду зеленоватый пнгмент. Нд среде 8-Е с 6.-метилстироломобразует округлые копонии диаметром1,5-2 мм.Физиолого-биохимические признакАэроб, растет при 20-42 С, оптидмум при 28-35 С.Оптимум рН 7,0-7,5Анаэробно не Ферментирует глюкозНитраты редуцирует,Желатину разжижает.Крахмал не гидролизует.Ацетоин не образует.Обладает оксидазной, каталазнойи уреазной активностью.На среде КИНГ А образует пигментпиоцианин, на среде КИНГ Б - пигментФлуоресцеин.усваивает сахарозу, глюкозу,Фруктозу, рамнозу, арабинозу, ксилозу, мальтозу с образованием кислоты.Из спиртов ассимилирует глицерин,этанол, маннит, из органическихкислот - ацетат, цитрат, лактат,тартрат и сукцинат, из аминокислот - Ы -валин и 5-алании.Ассимилирует бензоат, П-оксибензоат, протокатехоат, салицилат, бифенил, слабо растет на пирокатехине, не. усваивает толуол, пара- мета- и орто-ксилолы, псевдокумол, нафталин, Фенилуксусную кислоту. П р и м е р 1, Культуру Рвецдо - пэопав аегцвэ.поза шта.мм 8 выращивают на мясо-пептонном агаре в течение суток. Суспензию выросшей культуры высевают в колбы емкостью 75 О мл со средой 8-Е, разлитой по 100 мл. Состав среды, г/л: МКБО 4 7 Н 20 0-0,8, ИаС 1 0,5; КН 2 Р 04 0,7 (ЯН 4)2 НРО 4 1,5;, вода водопроводная до 1,0 л (фосфаты стерилизуются отдельно в видв раствора в дистиллированной воде) .К, -Метилстирол вносят .непосредственно в колбу с культурой в концент-. рации 10 г/л. Культуру выращивают на качалке при 200 об/мин температуО1 ра ферментации 29 С, контроль за процессом разложения осуществляют с помощью газовой и тонкослойной хроматографии, Содержимое колбы подкисляют до рН 2,0, триждьэ экстрагируют зтиловым эфиром, эфир упаривают на роторном испарителе, остаток растворяют в О,1 мл этилового спирта и анализируют методами тонкослойной и газовой хроматографии. В основном111731 Составитель Т.Мелентьева Техред М,Тепер Корректор А.Обручар Редактор Н.Егорова Заказ 7152/17 Тираж 521 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раувская наб д. 4/5Филиал ЛПП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4 процесс разложения осуществляетсяв первые двое суток, остаточное содержание К-метилстирола в среде через двое суток, определенное газохроматографически, составляет 1,57.от исходного, через трое суток0,037., на четвертые сутки К -метилстирол в среде не обнаружен. Анализкультуральной жидкости на содержание промежуточных продуктов окисления доказывает полное разложениесубстрата - окисление алифатического фрагмента с последующим расщепле нием ароматического кольца по метапути.Таким образдм, новый штамм Рзецдошопаз аегцдпоза 8, способный полностью разлагаться -метилстирол, может быть использован для деградацииК-метилстирола при вьк оком его с одержании в промышленных стоках производства синтетического каучука. Исполь зование его в активных илах стоков каучукового производства позволитзначительно снизить загрязнениеокружающей среды.