Способ получения 2, 8 н инозина

Союз СоветскикСоциалистическихРеспублик ОПИСАНИЕ ИЗОВРЕТЕНИЯ К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ(23) Приоритет С 07 Н 19/16 А 61 К 49/00 Государственный комитет СССР по делам изобретений и открытий33) УДК 547853. ,7.07,088,8) Опубликовано 230182.Бюллетень К 9 3 Дата опубликования описания 230182(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИИ 3,8- Н )-ИНОЗИНА Изобретение относится к способу получения нового вещества - меченного тритием в положении 2,8 инозина (2,8 -Нд)-инозин 1, который находит примененйе в биохимии, молекулярной биологии и медицине.Известен (8-5 Н)-инозин, который получают путем деэаминирования (8- Н)-аденозина нитритом натрия в3уксуснои кислоте при молярно:1 соотношении компонентов 1:7-7:14, реакционная смесь выдерживается в течение суток при комнатной температуре, Целевой продукт из реакционной смеси выделяют путем его ацилирования уксусным ангидридом в пиридине, экстракцией ацетильного производного хлороформом, перекристаллизацией ацетильного производного из этанола в присутствии угля, снятием ацетильной защиты метанольным раствором аммиака и перекристаллиэациеи иэ водного спирта. Получают (8-ЭН)-инозин с удельной активностью 0,483 Ки/ммоль, выход 42 ( 1).Недостатками известного способа являются невысокая удельная активность получаемого меченного инозина, ограничивающая сферу его применения, относительно низкий выход целевого продукта и длительность проведения процесса, Основной причиной низкого выхода реакции является неполнота превращения исходного реагента,обусловленная указанным выбором соотношения исходных компонентов,Цель изобретения - получение нового вещества - ( 2,8- Н-иноэинаэс высокой удельнои эктивностью (40 Ки/ммоль) и выходом, достигающим около 90.Поставленная цель цостигается способом получения 2,8-ЗН-иноэина,заключающимся в том, что (2,8- ЭН 2 1 - -аденозин подвергают действию нитрита натрия. и уксуснои кислоты при молярном соотношении 2,8- Н 2 3-аденозин. - нитрит натрия - уксусная кислота, равном 1:,100-110):(125-135), и выделение целевого продукта осуществляют колоночной хроматографией на ионосбменном сорбенте в Н -форме при элюировании водой. 25 П р и м е р. 35 мл раствора2,8- ЗНд -аденозина с удельной активностью 43 Ки/ммоль в 50-ном (по объему) водном этаноле с радиоактиэной концентрацией 4,9 мКи/ил упарива- ЗО ют досуха в вакууме ротационного ис899570 Формула изобретения Составитель Л.никулинаРедактор Г.Кацалап Техред Т.Маточиа Корректор О.Билак Заказ 12054/31 Тираж 389 ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета СССРпо долам изобретений и открытии113035, Москва, К, Раушская наб., д. 4/5 фили.л ппп "патент", г, Ужгород, ул. проектная, 4 парителя при 30-40"С. Остаток (170 мКи, 4,1 мкмоль, 1,1 мг) (,2,8- Н-аденозина растворяют вЪ, 0,2 мл воды, добавляют 0,03 мл (530 мкмоль) ледяной уксусной кисло ты, а затем вносят в один прием 30 мг (430 мкмоль) нитрита натрия,Реакционную смесь (молярное соотношение 1:105;130) перемешивают, оставляют на 24 ч при комнатнои температуре далее добавляют 1 мл воды.Для отделения от непрореагировавшего 2,8- ЗН 2-аденозина и солеи реакционную смесь наносят на колонку 10 ф 200 мм с сефадексом 5 Е С = 25 в Н+-форме и элюируют водой со "коростью 30-40 .лл/ч. После выхода солеи 15 (;ракция 6-.12 мл) элюируется Е 2,8- Н -инозин (фракция 14-25 мл,), Выход Е 2,8- Н 2-инозина составляет 90, считая на исходный 2,8-3 Н- -аденозин, Удельная активность полу- Я ченчого 2,8- Н -инозина соответствует дельной активности исходного 1 2,8- П 2-аденозина.Характеристика Уф-спектра поглощения при рН 7 (НО) А мокс 248 нм; 2 Врд/Одын = 1,69; 00/О 2 п -- 0,26; при рН 12 (0,01 н. МаОН) Я. 253 нм; Оо /як,о = 1 к 08 р 028 /О О, 18. Извс тные данные; при рН 7 1 макс ф 248 нм; Ос /О 26 о -- 1,73; 028 о /дрьо 30 0,24, при рН 12 , с, 253 нм;О /О 26 о = 105 Ойц/026 о = 018(по объему) водным этанолом до радио активной концентрации 1-5 мКи/мл. Радиохимическая чистота препарата не ниле 95, Хроматографирование проводилось на бумаге Ватман 3 в системе изопропиловый спирт-вода-аммиак (75:25:5) Способ получения 2,8-Н -инорина, о т л и ч а ю щ и й с я тем,что Е 2,8- Н-аденоэин подвергают9.деиствию нитрита натрия и уксуснойкислоты при молярном соотношении1 2,8" Н -аденозин - нитрит натрия3уксусная кислота, равном 1:(100110):(125-135), с последующим выделе.нием целевого продукта колоночнойхроматографией на ионообменном сорбенте в Н -форме при элюировании во+дой,Источники информации, принятые во внимание при экспертизе1. Вдовенко В.М. Боброва В.Н. и Айрапетянц Э.ГСинтез меченных тритием биологически активных соединений, Л., 1966.