Способ получения холестерина

(23)приоритет Опубликовано 28,02,80, Бюллетень М 8 Дата опубликования описания 28,02,80 до делам изобретений и открытий(72) Авторы изобретения Институт биохимии им, А, В, Палладина АН Украинской ССР1(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ХОЛЕСТЕРИНА Изобретение относится к медицинскойпромышленности,Известен способ получения холестерина из измельченного сырья животного происхождения путем сушки, многократнойэкстракцииацетоном, упаривания,обработкиэти 5ловым спиртом и концентрирования. Выходхолестерина при таком способе полученичсоставляет 10-13% (,13.Однако по данному способу получают1 Оцелевой продукт с низким содержаниемактивных веществ,Целью изобретения является повышениевыхода холестеринв из сырья животногопр оисхож де ни я,Поставленная пель достигается тем,что измельченное сырье перед высушиванием обрвбатыввют фосфатным буфернымраствором при рН 6,8-7,8 и температуре36-38 С в присутствии уксуснокислогонатрия и активатора, твкого как кислородили лимонная кислота, или лицетин.П р и м е р 1, К 100 г очншеннотоот пленки и кровеносных сосудов спивного.г мозга быка прибавляют 200 мл калийфосфатного буферного раствора с рН 7,4, и полученную смесь гомогенизируют в течение одной минуты на микроизмельч ител е тканей типа РТ=2 при 5000 об/мин. Затем. к омогенату прибавляют 0,7 г уксусно- кислого натрия и пропускают через смесь газообразный кислород со скоростью 20 средних пузырьков в минуту, При таки;. условиях смесь инкубируют 3 ч при 38 оС, После этого гомогенат высушивают с помощью рвспылительной сушилки типа Немвф, Полученный сухой порошок подвергают экстракции ацетоном три разапо 300 мл при 25 С в гечение часа,оТвердый остаток отделяют и направляют на получение лецитин-церебро, а ацетоновые экстракты соединяют вместе и выпаривают досуха, Сухой остаток представляет собой холестерин-сырец, Его растворяют в 60 мл атилового спирта, прибавляют 5 мл концентрированной сер ной кислоты и кипятят 1 ч с обратным холодильником. При атом происходит кис3 7181лотный гидролиз побочных продуктов, Затем раствор охлаждают до ОфС и отфильтоовывают выкристаллизовавшийся холестерин,Его промывают 60 мл охлажденного спир.та, отделяют и растворяют в 100 млспирта,прибавляют 0,5 г активированного угля и кипятят с обратным холодильником в течение часа, при этом на углеадсорбируются остаточные количества по-.бочных продуктов. После этого растворфильтруют, и фильтрат охлаждают до ОфСВыпавший холестерин отфильтровывают,сушат 3 ч в вакуумном сушильном шкаф при 60 С,Повышение выхода холестерина по срав-Бнению с выходом по прототипу составляет 30%.П р и м е р 2. К 100 кг очишенногоспинного мозга прибавляют 200 мл калий,фосфатного буферного раствора с рН 7,4, 20Полученную смесь гомогенизируют 1 минна микроизмельчителе типа РТ. Затемк гомогенату прибавляют 1,0 г уксуснокислого натрия и 150 мл экстракта печени в буферном растворе, содержащем 252,0 г стеринпереносящего белка( являющегося активатором, Полученную смесь, имеющую рН 7,8, инкубируют 2 ч при 37 С.Дальнейшее выделение холестерина иего очистка осуществляются так же, как 30в примере 1,П р и м е р 3. К 100 г слизистойоболочки ткани кишечника крупного рогатого скота прибавляют 200 мл калийфосфатного буферного раствора, Смесь з 5гемонизируют 1 мин, прибавляют 1,2 гуксуснокислого натрия и 100 мл экстракта печени в буферном растворе, содержащем 1,0 г стеринпереносящего белка;рН смеси равно 7,2, Полученную смесь фОинкубируют 1 ч при 36,5 С,Дальнейшее выделение холестеринаи его очистку осуществляют так же, какв примере 1,Повышение выхода составляет 604, 45П р и м е р 4, К 100 г слизистойоболочки ткани кишечника свиньи при 08 4бавляют 200 мл калийфосфатного буферного раствора, Смесь гомогенизируют,прибавляют 0,8 г уксуснокислого натрияи 0,8 г лимонной кислоты, Зачем смесь:(рН которой равно 7,6, инкубируют 1,5 чпри 36 фС, Очистка холестерина осуществляется как в примере 1,Повышение выхода составляет 40%,П р и м е р 5, К 100 г слизистойоболочки ткани кишечника прибавляют200 мл калийфосфатного буферного раствора, Смесь гомогенизируют, прибавляют1,5 г уксуснокислого натрия и 1,5 г лецитина, рН смеси при этом равно 6,8, Полученную смесь инкубируют 1,5 ч при37 С,Дальнейшее выделение холестерина иег 6 очистку осуществляют так же, какв примере 1,Повышение выхода холестерина составляет 30%.Предложенный способ обеспечивает повышение выхода холестерина на 30-60%.Формула изобретенияСпособ получения холестерина путем , высушивания измельченного животного сырья, экстракции ацетоном, очистки и концентрирования, о т л и ч а ю щ и й,с я тем, что, с целью увеличения выхода целевого продукта, сырье перед высушиванием обрабатывают фосфатным буферным раствором при рН 6,8-7,8 и температуре Э 6-38 С в присутствии уксуснокислого натрия и активатора, такого как кислород или лимонная кислота, или лецитин;Источники информации,принятые во внимание при экспертизе 1, Технологический регламент Ленин%градского завода медипинских препаратов,утвержденный 15,04,52 Министерствоммясомолочной промышленности СССР, Составитель Т. ПавловичРедактор Н, Хубларова Техред С, Мигай Корректор И. МускиЗаказ 9964/1 Тираж 673 ПодписноеЦНИИПИ Государственного комитета СССРпо делам изобретений и открытий113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5Филиал ППП Патент", г, Ужгород, ул, Проектная,