Способ выделения уробилина

Союз Советскик Социалистических Республик(22 Заявлено 230679 (21) 2814009/28-13 с присоединением заявки Мо(23) Приоритет 6 01 Н 33/72 Государственный комитет СССР но делам изобретений н открытий(088,8) Дата опубликования описания 3004.81(54) СПОСОБ ВЫДЕЛЕНИЯ УРОБИЛИНА блас зов а И меди в ля уробиформом с следнего вавшегоенного присут- овышенной труди выд хло ние т зобретение относится к оцины и может быть испольабораторной диагностике.Известен способ выделенилина путем экстракции хлоропоследующим выпариванием порасворением в спирте образося осадка, обработкой получраствора соляной кислотой вствии хлорного железа при итемпературе 1)Однако известным способомвыделить 0-уробилин,Цель изобретения - выделениуробилина. Эта цель достигается тем, чтоеляют уробилин путем экстракциироформом с последующим выпаривам последнего растворением в спир е образовавшегося осадка, обработкой полученного раствора соляной кислотой в присутствии хлорного железа при повышенной температуре, перед экстракцией в пробу добавляют хлорис тый барий, из образовавшейся смеси путем центрифугирования удаляют осадок и экстракцию ведут при рН 4,5.Способ осуществляют следующим образом. Берут 10 мл мочи, подкисляют еенесколькими каплями ледяной уксусной кислоты до рН 4,5 для улучшенияэкстракции уробилина, Добавляют2,5 мл хлористого бария, чем осаждают билирубин, большое количествокоторого мешает ходу мезобиливиоли"новой реакции, Выпавший осадок центрифугируют 15 мин при скорости3000 об/мин, Надосадочную жидкостьзкстрагируют в течение 5 мин, Хлороформенный экстракт концентрируют ивыпаривают при 75 С на водяной бане.Для проведения мезобиливиолиновойреакции осадок растворяют в 5 мл этилового спирта, добавляют 0,5 мл 100 мг Ъраствора хлорного железа и 6 М соля-ной кислоты. Пробирку помещают в водяную баню с температурой 72 С на15 мин для полного окисления уробилиновых тел хлорным железом.П р и м е р . Больная Б 57 лет.Первоначальный диагноз: вирусный,гепатит. Болезнь протекает остро,наблюдается желтуха, боли в жийоте,тошнота, рвота, зуд кожи, повышеннаятемпература, С диагнозом вирусный гепатит больная госпитализирована вклинику, где поставлен диагноз-ракголовки поджелудочной железы,826245 Формула изобретения Составитель С,МалютинаРедактор Е,Дичинская Техред Н.Ковалева Корректор М,Коста: Заказ 2368/33 Тираж 907ВНИИПИ Государственного комитета СССРпо делам изобретений и открытий113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5 Подписное Филиал ППП Патент, г. Ужгород, ул, Проектная, 4 У больной берут 10 мл мочи наобследование для выявления в нейО-уробилина Предварительно осаждают билирубин, добавляя хлористыйбарий, с последующим центрифугированием при 3000 об/мин в течение 15 минПрисутствующи 1 в моче билирубин может вступить в ход Меэобиливиолиновой реакции итем самым, мешать выйвлению О-уробилина, Мочу, свободнуюот билирубина, подкисляют строго допН 4,5 , Именно при этом значениирН достигают полную экстракцию Оуробилина. Экстракцию проводят хлороформом в 2 этапа по 10 мл, Весьхлороформ концентрируютв одну пробирку, которую помещают в водянуюбаню при 75 С до полного выпаривания. Для проведения мезобиливиолиновой реакции осадок растворяют в5 мл. этилового спирта, Берут строго 0,5 мл 100 мграствора хлорногожелеза в 6 М соляной кислоты и,цобавляют к уробилину растворенномув 5 мл этилового спирта. Для дальнейшего развития реакции пробирку помещают в водяную баню с температурой72 С на 15 мин, В пробирке наблюдается бледно-зеленая окраска. Результат/реакции оценивают на спектрофотометре СФ. На волне 495 нм регистрируют содержание 6-уробилина 0,125,на волне. 540 нм - содержание 1-уробилина 0,070,на волне 640 нм - содержание,Р-уробилина 0,087 оптических единиц.,В процентном соотношении это выражается слецующим образом; ,- Уробилин 44, 1-уробилин25, 0-уробилин 31, Выделены всетри фракции уробилинов, где содержание Р-уробилина в 15 и более указывает на наличие подпеченочной желтухи опухолевого генеза,Больному на основании клиническихданных, данных лабораторного обследования,поставлен диагноз - рак головки поджелудочной железы, с такиьГдиагнозом больная направлена в хирургическую клинику.ФПредлагаемым способом исследования биологических жидкостей на уробилин проведено 1594 исследованияво всех 1594 случаях выделен Р-уробилин различной концентрации. Мочабольных вирусным гепатитом (1272исследования) содержала 15 0-уроби-.лина и меньше и определялась 2-3 дня,затем Р-уробилин исчезал совсем. Вмоче больных подпеченочной желтухойопухолевого генвза содержание Руробилина равнялось 15 и более ис течением времени возрастало (3225 исследования),Предлагаемый способ позволяетвыделять 0-уробилин и может бытьшироко использован в лабораторнойдиагностике подпеченочной желтухи2 О опухолевого гечеза. Способ выделения уробилина путемэкстракции хлороформом с последующим выпариванием последнего растворением в спирте образовавшегося осадка, обработкой полученного растворасоляной кислотой в присутствии хлорного,.железа при повышенной температуре, о т л и ч а ю щ и й с я темчто, с целью выделения Р-уробилина,перед экстракцией в пробу добавляютхлористый барий, из образовавшейсясмеси путем центрифугирования удаляют осадок и экстракцию ведут прирН 4,5,Источники информации,принятые во вниманиепри экспертизе401. Вацвдагйе Т., РЬуьоодецпд В 1 гцЬпььоГГцгсЬяе 1 е а 1 ьдгцпд 1 адеп сег ЕегцвГогйсЬцЬд,5 йцйдаг, 1950.