Способ получения гиалуронидазы

Номер патента: 787032

Авторы: Бийчанинова, Грачева, Кускова

ZIP архив

Текст

ОПИСАНИЕИЗОБРЕТЕНИЯК АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ Сокъ Советских Социалистических Республик(23) Приоритет -Государственный комитет СССР по делам изобретений н открытий(72) Авторы изобретения З.Р. Кускова, А.Л . Бийчанинова и Л.А, Грачева Томский ордена Трудового Красного Знамени научноисследовательский институт вакцин и сывороток. ( 54 ) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ГИАЛУРОНИДАЭЫ 1Изобретение относится к биологиии медицине и касается получения ферментных препаратов.Известен способ получения гиалуронидазы путем экстрагирования раэмель ченной плаценты, осаждения целевогопродукта и очистки (11,Однако известный способ сложен,длителен и трудоемок из-за использования колоночных методов очистки. 1 ОЦель изобретения - упрощение способа,Укаэанная цель достигается тем,что в качестве источника сырья используют плацету; человека, которую экст рагируют бидистиллированной водойподщелачивают, раствор обрабатываютацетатным буферным раствором, полученный осадок обрабатывают водой прирН 6,3-6,4, добавляют гель .фосфата 2кальция, центрифугируют и лиофилизируют.Кроме того, добавляют гель фосфата кальция, содержащий сухого остатка геля к белку в соотношении 250,6-0,7:1.Способ осуществляют следующим образом.П р и м е д. Свежую или свежезамороженную плаценту раэмельчают на ЗО электрической мясорубке, отмывают охлажденным физиологическим раствором от пигментов крови до получения однородной массы бледно-розового цвета. К 300 г полученной массы добавляют 450 мл (1,5 объема) бидистиллированной воды, рН взвеси доводят до 9,01 н. раствором йаОН. Экстрагирование гиалу" ронидазы проводят в течение 18-24 ч при 4-10 о С при периодическом перемешивании. Далее взвесь центрифугируют при 4000 об/мин и 4-10 С в течение 30 мин, Из супернатанта осаждают фермент путем снижения рН раствора до 5,0 с помощью 2 М ацетатного буферного раствора с рН 4,0. Осадок 7 ормируется в течение 30 мин при 3-4 С.о Далее осадок отмывают от остатков гемпигмента бидистиллированной водой (рН 6,2-6,4), фермент осаждают центри" фугированием и растворяют в бидистиллированной воде с рН - 7,0, объем которой составляет 1/10 от исходного объема экстракта. Полученный раствор соединяют с гелем фосфата кальция в соотношении 0,60-0,70 г сухого остатка геля на 1 г белка, выдерживают при комнатной температуре в течение 20 мин, гель удаляют центрифугированием при 4000 об/мин в течение 30 мин, Надоса787032 формула изобретения Составитель С.МалютинаТехред Т.Маточка Корректор Н.ШныдкаяЗаказ 8215/4Тираж 673 ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета СССРпо делам изобретений и открытий113035, Москва, Ж, Раущская наб., д. 4/5 Редактор Т.Веселова филиал ППП "Патент", г, ужгород, ул. Проектная, 4 дочную жидкость, представляющую собой раствор гиалуронидазы, стерилизуют фильтрацией, определяют однородность, содержание беЛка и специфическую активность и лиофилиэируют.Предлагаемый способ получения гиалуронидаэы технологически прост и досту 5 пен, предусматривает утилизацию ценного сырья, препарат, полученный предлагаемым способом, содержит минимальное количество балластных бел ков, следовательно, не будет вызывать нежелательных побочных реакций,1. Способ получения гиалуронидазыпутем экстрагирования размельченнойплаценты, осаждения целевого продукта и очистки, о т л и ч а ю щ и й с ятем, что, с целью упрощения способа,в качестве источника сырья используют плаценту человека, которую экстрагируют бидистиллированной водой,подщелачивают, раствор обрабатываютацетатным буферным раствором, полученный осадок обрабатывают водой прирН 6,3-6,4, добавляют гель фосфатакальция, ценхрифугируют и лиофилиэируют 2. Способ ПО п.1 р О т л и ч (х ющ и й с я тем, что добавляют гель фосфата кальция, содержащий сухого остатка геля к белку, в соотношении 0,6-0,7:1.Источники информации, принятые во внимание при экспертизе1Э "610 с 6 Ьь", 1977,Ч 81 р. 485-494.

Смотреть

Заявка

2728195, 26.12.1978

ТОМСКИЙ ОРДЕНА ТРУДОВОГО КРАСНОГО ЗНАМЕНИ НАУЧНО ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ ВАКЦИН И СЫВОРОТОК

КУСКОВА ЗИНАИДА РОМАНОВНА, БИЙЧАНИНОВА АЛЬБИНА ЛЬВОВНА, ГРАЧЕВА ЛЮДМИЛА АЛЕКСАНДРОВНА

МПК / Метки

МПК: A61K 37/56

Метки: гиалуронидазы

Опубликовано: 15.12.1980

Код ссылки

<a href="https://patents.su/2-787032-sposob-polucheniya-gialuronidazy.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">Способ получения гиалуронидазы</a>

Похожие патенты