Способ получения аллергена

(51) М, Кл. Дополнительное к авт, свил-ву Заявлено 02.07.76 (21) 2381070(28 - 1 рисоединением заявкио 1 К 39/О ударствениь 1 й хомхтетСССРелам азоеретенийн атхрытий 23) Приорит од летень1 бл икова но 25,05.79 53) УДК 615.4 ;576.8.097.2 (088.8) писа ни я 25,05.7 ата опублнкова, Лихолетов И. М. Климова и олгоградский научноисследовательский противочумный инстит 71) Заяви ИЯ АЛЛЕРГЕНА(54) СПОСОБ П щим образом, 36-8 (Сильвейра) 5 дней при 28- среде Сабуро. споры удаляют, шпателем, Полра не обяэательИзобретение относ а именно к способам оно может быть исп особо опасных глубо животных. осуществляют следую Соссдок 1 ез 1 вв 6 е ют в течение 29 - 3 матрицах на плотной ю грибницу и артро одой и соскабливая ение артроспор с ага СпособГрибвыращив30 С вВыросшусмывая тся к микробиологии,получения аллергенов,льзовано для диагностикиих микозов у людей и получения аллергена для диоидоза путем выращива.гриба на питательной спе.ыделением целевого про звестен снос ностики кок ное о. де с п дукта окцидиооследую111ако изцифично идного щим в Одн спе 6 мк из то гриб выращи среде в артрдукт выделяют онцентрируют изуют и лиоф вестный способ не обеспечивает аллергена с высокими активностью стью (активность его составляет кожной. дозе по сухому весу),етения является повышение акпецифичности аллергена, Эта цель достигается тем,вают на плотной питательнойспоровой фазе, целевой проэкстракцией из среды, затемвысаливанием, концентрат ди.лизируют,Внеклеточный материал артроспор гриба экстрагируют -из разрушенного шпателем на мелкие кусочки агара 0,9%.ным раствором хло ристого натрия в течение 6 суток при 28 - 30 О С периодически встряхивая.Экстракт отделяют от агара на марлевом фильтре и обезвреживают формалином (0,5%-ным) в течение 48 ч, После высева на стерильность и нодщелачивания экстракта до рН 8,5 антиген высаливают сернокислым аммонием (516 г на 1 л экстракта), Осадок растворяют в дистиллированной доде, примесь сернокислого аммония удаляют диализом сначала против .водопроводной воды (4 суток), а затем дистиллированной (24 ч). Препарат лиофилизируют, проверяют на активность,663405 известного, а стоимость производства меньше в 3 раза. Воэможность лиофильного высушивания предлагаемого аллергена упрощает его ,концентрирование, стабилизацию и стандарти эацйю посухому весу и в единицах общегоазота в 1 кожной дозе. Предлагаемый аллерген можно использовать для аллергических реакций как 1 п ч 1 чо, так и 1 и ч 1 тго,Составитель С, Малютина .Техред С.Мигай Корректор Г, Рещетннк Редактор О. Кузнецова Заказ 2820/4 Тираж 671: .:.=, "- .- Подписное ЦНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва,Ж,Раушская наб д, 4/5 Филиал ППП "Патент", г, Ужгород, ул, Проектная, 43специфичность, безвредность и стерилиэуют,фильтруя через миллипоровые фильтры (диаметр пор 0,4 - 0,6 мкм);-и.разливают в ам- .пулы по 10 кожных доз. Одна кожная человеко-доза составляет 10 единиц общего азотаили 1 мкг сухого препарата.Полученный описанным способом аллергенвызывает у зараженных кокцидиоидным грибом морских свинок аллергические реакциипри внутрикожном введении в минимально 10активной дозе 1 мкг/0,1 мл. У зараженныхвозбудителями гистоплазмоза и бластомикоза,а также у контрольных животных кожные пробы былиотрицательными,Аллерген в сухом виде представляет собой 15аморфный йорошбк -светло-желтбго- цвета; легко растворимый в воде, содержание белков,=. ЙЖлеъйЖйх"ккслот",ййпйКоЪи-полисйаридов соответственно 25, 24 и 47%. Остаточнаявлажность составляет 4%. Препарат нетоксичен 20при внутрикожном и внутрибрюшинном введении (белым мышам и морским свинкам).При испытании на людях (53 добровольца)аллерген в дозе 10 мкг в 0,1 мл 0,9% хлористого натрия на апирогенной воде не вызывает неспецифических реакций.Предлагаемый способ обеСйечивает йолучение спецйфического аллергена, активность которого в 10 - 20 раз превышает активность Формула изобретения Способ получения аллергейа для диагностикикокцидиоидоза путем выращивания кокцидиощщого гриба на питательной среде с последующим выделенИем целевого продукта, о тличающийся тем,что,сцельюповышения активности и специфичности аллергена, гриб выращивают на плотной питательной среде в артроспоровой фазе, целевой про.дукт выделяют экстракцией из среды, затемконцентрируют высаливанием, концентрат диа.лизуют и лиофилизируют,Источники информации, принятые во внимание при экспертизе1, Зппп С. Е., Зайо Е. Т., Веагд В.В.,ВоаепЬегя 3. 6., Веагд В. В. апд Зайо М. М.ЗЪе цае оФ соссЖоди. Атег, Веч.ТОЬегс1948, 54, 4, р. 330-360.