Способ выращивания микроорганизмов

О П Й С"Ай И,1 ИЗОБРЕТЕНИЯ Союз СоветскихСоциалистицескихРеслублнк оц 661002 К АВТОРСКОМУ СВИДВТВЛЬСТВУ(22) Заявлено 03.01.7 21) 2440408/28-3 с присоединением заявки де -) Приоритет -сударственный коынтет СССР ло делам нзобретеннй н открытнй(54) СПОСОБ ВЫРАЩИВАНИЯ М ОРГАНИЗМ по том Изобретение относится к микробиологической промышленности, а именно к способу выращивания микроорганизмов, и может быть использовано для производства фермеятных препаратов из культур микроорганизмов, выращиваемых на твердых питательных средах.Известен способ выращивания микроорганизмов на твердофазной питательной среде, включающий стерилизацию среды, увлаж. нение ее, засев посевным материалом, выращивание микроорганизмов и вымывание продуцируемых ферментов из микроорганизмов растворителем 1 .Недостатком известного способа является то, что при производстве ферментных препаратов он не предусматривает многократного использования накопившейся биомас сы, что приводит к незначительному выходу ферментного препарата.Цель изобретения - интенсификация процесса и увеличение выхода ферментного препарата.Поставленная цель достигается тем, чтосле вымывания ферментов из культуры микроорганизмов удаляют избыток влаги и возвращают ее на стадию выращивания, при э в качестве растворителя используют смесь воды с твердыми частицами питательной среды размером от 0,1 мк до 5 мм.Целесообразно также выращивание микроорганизмов, вымывание ферментов из культуры микроорганизмов и удаление избытка влаги осуществлять многократно через каждые 1 - 12 час (число циклов от 6 до 8).Способ выращивания микроорганизмов на твердофазной питательной среде осуществляют по следующей технологической схеме.Простерилизованную, увлажненную, засеянную посевным материалом питательную среду, раскладывают в растительной установке и инкубируют при оптимальных технологических параметрах в течение времени, равного 0,2 - 0,6 от общего времени культивирования микроорганизмов, обеспечивающего максимальный выход продукта. Коэффициент 0,2 - 0,6 зависит от условий культивирования, выбора продуцента и получаемого продукта. По истечении первой стадии выращивания проводят стадию вымывания ферментного препарата и удаления избыточного количества влаги, после чего процесс выращивания, вымывания и удаления избыточного количества влаги из культуры повторяют в циклично-временном режиме с ин661002 35 40 45 50 55 ираж 525 Подписноерод, ул, Проектная, 4 тервалом от 1 до 12 час до полного истощения субстрата или автолиза клеток культивируемого микроорганизма.В качестве вымывающего агента применяется растворитель, содержащий смесь твердых частиц питательной среды размером от0,1 мк до 5 мм.Пример 1. Выращивание продуцента пектиназы,Питательную среду, состоящую из 50 О/,свекловичного жома и 50 О/О пшеничных отрубей, стерилизуют, увлажняют до конечнойвлажности 60 О/о, засевают посевным материалом, размещают в растительной установке и выращивают микроорганизм при оптимальных технологических параметрах. Поистечении 24 - 30 час выращивания (зависит от структуры среды) культура проходитпервую стадию вымывания растворителем, вкачестве которого используют воду, содержащую молодые частицы свекловичного жома размером от 0,1 мк до 8 мм, в количестве 2 объема на 1 объем культуры. После прохождения стадии вымывания культура проходит стадию удаления избыточного количества влаги, для чего применяют воздушный поток, а также частичное отжатие волыпутем прессования. Пройдя стадию удаленияизбыточного количества влаги, культура возвращается на стадию выращивания нри оптимальных технологических параметрах, ициКл повторяется.При культивировании данного продуцента через 2 - 8 час цикл повторяется, числоциклов -- от 6 до 8.Пример 2. Выращивание продунента пектолитического комплекса.Питательную среду, состоящую на ЗОО/оиз пшеничных отрубей и на 70 О/о из свекловичного жома, стерилизуют, увлажняют доконечной влажности 60 О/ засевают споровым посевным материалом в количествеО,5% к весу исходной питательной среды,размещают в растительной установке и культивируют н оптимальном технологическом режиме. о истечении 20 - 26 час выращивания, культура проходит первую стадию вымывания растворителем, в качестве которого применяют солевой раствор, содержащийсернокислый аммоний и смесь частиц молотого свекловичного жома, размером от 0,1 мкдо 8 мм, в количестве 1,5 - 2,5 объема на1 объем культуры, После прохождения стадии вымывания, культура проходит стадиюудаления избыточного количества влаги, длячего применяют воздушный поток, а такжечастичное отжатие воды путем прессования,и возвращается на стадию выращивания;цикл повторяется.При культивировании данного продуцента, цикл повторяли через 4- -10 час, а число циклов равнялось 7.Пример 3. Выращивание продуцента глюкоамилазы. Ц Н И И П И Заказ 2389/24 филиал П П П Патент, г. Ужго Питательную среду, состоящую на 70 О/Оиз пшеничных отрубей и на ЗОО/О из свекловичного жома, стерилизуют, улажняют до конечной влажности 60 - 61%, засевают посевным материалом в количестве 0,5 О/О к исходному весу питательной среды, размещают в растительной установке и инкубируют в оптимальном технологическом режиме. По истечении 24 - 28 час выращивания культура проходит первую стадию вымывания раство Орителем, в качестве которого используют воду, содержащую смесь частиц пшеничных отрубей размером от 0,1 мк до 3 мм, в количестве 2 объема на 1 объем культуры, После прохождения стадии вымывания, культура проходит стадию удаления избыточного количества влаги, для чего применяют воздушный поток, а также частичное отжатие путем прессования до конечной влажности 63 - 70/о. Пройдя стадию удаления избыточного количества влаги, культура возвращается на стадию выращивания, и цикл пов торяют. Расход растворителя в последующих циклах составляет 2 - 2,5 объема наобъем культуры.При культивировании данного продуцента число циклов равнялось 8, и повторялись они через 8 часов.Таким образом, предложенный способ выращивания микроорганизмов на твердофазной питательной среде в производстве ферментных препаратов позволяет снизить расход посевного материала, многократно ис пользовать накопившуюся биомассу, увеличить удельный выход фермента, снизить его себестоимость. Формула изобретения1. Способ выращивания микроорганизиов на твердофазной питательной среде, включаюгций стерилизацию среды, улажнение ее, засев посевным материалом, выращивание микроорганизмов и вымывание продуцируемых ферментов из микроорганизмов растворителем, отличающийся тем, что, с целью интенсификации процесса и увеличения выхода ферментного препарата, после вымывания ферментов из культуры микроорганизмов удаляют избыток влаги и возвращают ее на стадию выращивания, при этом в качестве растворителя используют смесь воды с твердыми частицами питательной среды размером от 0,1 мк до 5 мм.2. Способ по п, 1, отличающийся тем, что выращивание микроорганизмов, вымывание ферментов из культурымикроорганизмов и удаление избытка влаги осуществляют многократно через каждые 1 - 12 час, число циклов - от 6 до 8.Источники информации, принятые во внимание при экспертизе1. Яровенко В. Л. и др. Производство ферментных препаратов из гибов и бактерий, М., 1970, с. 206 - 209.