Способ определения фосфора индивидуальных фосфороорганических соединений

Оп ИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ Союз Советскмв Соцеалмстмческию Республик(61) Дополнительное к авт. свид.ву 22) Заявлено 01.0 76 (21) 2394562/30-15 й 31/О заявк е присое Гввударвтвеиньб вемвтет СССР ве делам взовретенее в втврмтий.3 (088.8) та опубликования описания 08.04.79(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ФОСФОРА. ИНДИВИДУАЛЬНЫХ ФОС ФОРОРГАНИЧЕСКИХ СОЕДИНЕНИЙт Изобретение относится к исследованию химических свойств почв на содержание в них органических фосфатов индивидуальной природы и может быть использовано в почвоведении и агрохимии при изучении фосфатного режима почв и рационального использования фосфорных удобрений.Известен способ получения вытяжек - из почвы для суммарного определения в них фосфора органических соединений ин- та дивидуальной природы, в котором применяют шелочные вытяжки различной концентрациит-в сочетании с нагреванием, Этот способ имеет ряд недостатков 11.13Во первых, применение шелочи в сочетании с нагреванием приводит к гидролизу индивидуальных фосфорорганических соединений, в том числе и нуклеиновых кислот.Во-вторых, пригодность щелочных вытяжек для извлечения неспецифических фосфорорганических соединений не проверена на чистых препаратах этих соединений, а в полученных вытяжках наэтих соединений не подтверждено спческими химическими реакциями насоединения. Также известен способ, в котором для извлечения из почвы фосфорорганических соединений индивидуальной природы используют кислую смесь серной кислоты, уксусной кислоты и уксусного ангидрида. Согласно этой методике в полученной вытяжке проводится только суммарное определение фосфора органических соединений индивидуальной природы без выделения фосфора фитина и нуклеиновых кислот. Почва смешивается с кислой смесью, термостатируется 24 час, охлаждается, центрифугируется, затем трижды промывается (один раз смесью, затем 5%-ной соляной кислотой и дистиллированной водой), каждый раз центрифугируя 2Однако применяемый в этом случае состав смеси с очень низким рН (рН Х) и длительное термостатирование (24 часа) приводит к частичному разрушению моле65 5964 8,60 кислот 8 29 86 еат натрия о р а изобретен Способ опдуальных фпреимуществфитина, вклкислотной см ивиненийот и выние507/3 Подписное город, ул. Проектн ПП "Патент, г. куп нукпеиновой кислоты и фитииа до соединений, отличных ио своим свойствам от исходнык, что не дает возможности их прямого определения с помощью специфических реакций и в конечном итоге искажает результаты определения фосфора в этих соединениях.Белью изобретения является повышение точности и ускорение анализа соедйнений.Поставленная цель достигается тем, что в качестве кислотной смеси используют смесь уксусной кислоты и уксусного ангидрида с рН=2,2-4,0 при соотношении компонентов 1:1-2), причем кислотную смесь и почву берут в соотношении 10-20;1 и термостатируют при 4055 С в течение 4 р 5 60 час.Пример осуществления 4 г почвы, пропущенной через сито в 1 мм, помещают в центрифужные стаканы емкостью 50 мл, добавляют 40 мл смеси уксусной кислоты, уксусного ангидрида, тща. тельно перемешивают стеклянной палочПрименение предлагаемого способа позволяет сократить время термостати, рования с 24 до 5 час. Кроме того, достигается значительная экономия времени за счет исключения двух промывок почвы(5%-ным раствором соляной кислоты и дистиллированной водой) без изменения точности анализа, что высвобождает на каждой партии анализа 10%рабочего времени. ределения фосфора индосфорорганических соеди нно нуклеиновых кислючающий обработку поч есью, термостатирова ЦНИИПИ Заказ 1 кой, закрывают резиновыми пробками иставят в термостат при температуре50 С на 5 час, Содержимое стакановОчерез каждый час перемешивают, По истечении 5 час стаканы вынимают изтермъстата, дают охладиться да.комнатнойтемпературы и центрифугируют при3000 об/мин в течение 10 мин. Полученные центрифугаты сливают в мерные 16ф колбы на 200 мл. Оставшуюся в стаканах почву промывают один раз 40 мптой же смеси, хорошо размешивают почвуи затем центрифугируют. Бентрифугатысливают в те же мерные колбы. Доводяобъем центрифугатов в мерных колбах дометки дистиллированной водой, тщательно перемешивают н используют для определения фосфора нуклеиновых. кислоти фитина по одному из методов, принятых 20в биохимии.Б таблице приведены результаты проверки эффективности предлагаемой смесина чистых препаратах нуклеиновой кислоцентрифугирование и промывку почвы с 40 последующим количественным определением фосфора в эткх соединениях, о т -л и ч а ю ш и й с я тем, что, с цельюповышения точности"и ускорения анализа,в качестве кислотной смеси используютсмесь уксусной кислоты и уксусного ангидрида с рН=2,2-40 при соотношениикомпонентов 1: 1-2), причем кислотнуюсмесь и почву берут в соотношении10-20:1 и термостатируют при 40-55 Св течение 4,5-6,0 час.Источники информации, принятые вовнимание при экспертизе1, Хейфец Д. М. Почвоведение,2,1948 с. 27.55 2. Кривоносова, Агрохимия,6,1972, с. 143.4 Тираж 1089