Способ определения количества гаптоглобина в сыворотке крови

Номер патента: 455278

Автор: Щеняцкий

ZIP архив

Текст

пи 455278 ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕН ИЯ Союз Советских Социалистических Республик(32) 11 риорит ета Министров СССР 519,25:576 .3 (088.8) убликова 30,12.74, Бюллетень4 53) 1 о делам нзобретенн и открытийДата ликования описания 11.02,7 о 72) Автор изобретения И, Щеняцкий Актюбинский государственный медицинский инсти(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ КОЛИЧЕСТВА ГАПТОГЛОБИН В СЫВОРОТКЕ КРОВИ2 оглобищим об Изобретение относится к области медицины.Известен способ определения гаптоглобина в сыворотке, полученной из негемолизированной крови, и основанный на том, что в сыворотку добавляют различные количества гемоглобина, проводят электрофоретическое разделение с последующим спектрофотометрическим определением минимального количества гемоглобина, обеспечивающего полное насыщение имевшегося гаптоглобипа, и по полученному значению рассчитывают искомую величину.Однако известный способ является трудоемким и требует большого расхода исследуемого материала и реактивов.Для упрощения определения и повышения чувствительности по предлагаемому способу взятую кровь гемолизируют до полного насыщения гаптоглобина гемоглобином с последующим электрофорезом полученной сыворотки и спектрофотомстрическим определением количества связанного гемоглобина известными приемами.Способ определения количества гапт на в сыворотке осуществляют следую разом.В центрифужную пробирку помещают 4 - 5 мл крови. Полихлорвиниловой палочкой, соединенной через резиновую трубочку с осью якоря электромоторчика, производят механическое разрушение эрптроцитов в течение 12 мин, а затем цснтрифугируют при 300 об/мин в течение 7 мин. Сыворотку кро ви, насыщенную гемоглобином, в количестве0,4 мл вносят в стартовый желобок агарового геля. Стартовый желобок готовят путем погружения на глубину 5 мм в горячий раствор агара стеклянного штамма толщиной 1,4 мм 10 и длиной 65 мм. 1 Ъ-ный агаровый гель готовят на боратном буфсре путем смешивания 0,5 М раствора борной кислоты, 0,2 М раствора едкого натра и дистиллированной воды в объемных отношениях б: 3: 1. Этим же бу фером заполняют электрофоретические ванны. Агаровый гель непосредственно соединяется с электродным раствором. Электрофорез ведут в течение 10 час при напряжении 100 в.По окончании электрофореза гемоглобин-гаи тоглобиновая фракция располагается ближек старту. Кусочек агарового геля, содержащий гемоглобин-гаптоглобиновую фракцшо, переносят в мерный цилиндр и доводят объем содержимого буферным раствором до 20 мл.25 11 олученную смесь переносят в гемогенизатори измельчают в течение 12 мин. Гемогенат центрифугируют в течение 5 мин при 9000 об/мин. Супернатантную жидкость переносят в кювету и спектрофотографируют на 30 регистрирующем спектрофотометре СФ455278 Сн - АХ 389 7 Составитель С. Малютина Редактор Н. Суханова Техред Г, Дворина Корректор Н. Лебедева Заказ 241/16 Изд.1996 Тираж 651 Подписное ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий Москва, Ж, Раугпская наб., д. 4/5Типография, пр. Сапунова, 2 против такой яе кюветы с дистиллированной водой. На полученной спектрофотограмме измеряют высоту пика и зону Сорэ в миллиметрах. По калибровочной кривой, построенной по результатам измерений высоты пиков в зоне Сорэ стандартных растворов гемоглобина, определяют количество гемоглобина, связавшсгося с гаптоглобином исследуемой порции сыворотки.При вычислении молекулярный вес гаптоглобина принимают равным 10 б 000, а молекулярный вес гемоглобина равным 68000.Расчет количества гаптоглобина проводят по формуле где Снр - количество гаптоглобина в 100 мл сыворотки; А - количество гемоглобина (мг) в 0,4 мл исследуемой сыворотки.П р ед м ет изобретенияСпособ определения количества гаптоглобпна в сыворотке крови путем электрофореза с последующим спектрофотометрическим опре делением гаптоглобина по величине гемоглобина в гемоглобин-гаптоглобиновом комплексе, отличающийся тем, что, с целью упрощения определения и повышения чувствительности, кровь предварительно гемолизиру ют до полного насыщения гаптоглобина гемоглобином.

Смотреть

Заявка

1848813, 22.11.1972

АКТЮБИНСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ МЕДИЦИНСКИЙ ИНСТИТУТ

ЩЕНЯЦКИЙ ВЛАДИМИР ИВАНОВИЧ

МПК / Метки

МПК: G01N 33/16

Метки: гаптоглобина, количества, крови, сыворотке

Опубликовано: 30.12.1974

Код ссылки

<a href="https://patents.su/2-455278-sposob-opredeleniya-kolichestva-gaptoglobina-v-syvorotke-krovi.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">Способ определения количества гаптоглобина в сыворотке крови</a>

Похожие патенты