Способ выделения рибомононуклеотидов

ОПИСАНИЕ ЙЗОБРЕТЕН ИЯ пи) 437766 Союз Советских- Социапистицеских РеспубпикК АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ(32) ПриоритетОпубликовано 30,07.74. Государственный камитеСовета Министров СССРоо делам изобретенийи открытий оллетень3) УДК 547.963:32.0И. И, Брод, М. А. Гайлум и С. М, Мовшовичвийский филиал Всесоюзного ордена Трудового Красного Знамениаучно-исследовательского института химических реактивов и особочистых химических веществ 4) СПО ЫДЕЛЕНИ БОМОНОНУКЛЕО В ирующейе опредется в слеивный гидот на аниот ступенчасодержаили ацевые киссодерж ли амь ют и выдебами. гидролизата лизат 200 г ю колонку с со скоростью го сечения. роводят стуна 1 см поИзобретение относится к улучшенному способу выделения рибомононуклеотидов, которые широко применяют в биологии, медицине, пищевой промышленности и в качестве исходного сырья для получения биологически активных веществ.Известен способ выделения рибомононуклеотидов путем ступенчатого хроматографического разделения щелочного или ферментативного гидролизата РНК на анионите, где в качестве элюирующей системы используют уксусную кислоту нарастающей концентрации.Однако при известном способе имеет место нечеткое разделение компонентов, в особенности уридиловой и гуаниловой кислот, что приводит к значительному уменьшению выхода и снижению степени чистоты целевых продуктов.Цель изобретения - увеличение четкости разделения продуктов гидролиза РНК и увеличение выхода каждого рибомононуклеотида. Это достигается хроматографическим разделением гидролизатов РНК элюирующей системой - уксусная кислота нарастающей концентрации для цитидиловой и адсниловой кислот, уксусная кислота нарастающей (до 111 степени) концентрации с добавкой ацетата натрия или ацетата аммония нарастающей концентрации для уридиловой и гуаниловой кислот. Каждыи определенныи состав элюсистемы обеспечивает элюированиленного рибонуклеотида.Предлагаемый способ заключае5 дующем: щелочной или ферментатролизат РНК (рН 9 - 10) сорбируните в ацетатной форме и проводятое хроматографическое разделение.1 ступень: 0,5 - 1 М СНзСООН элюируют10 цитидиловые кислоты.2 ступень: 1,2 - 1,4 М СНзСООН элюируют адениловые кислоты. 3 ступень: 1,3 - 2 М СН,СООН 15 щая 0,07 - 0,09 моль ацетата натрия тата аммония) элюируют уридил лоты. 4 ступень: 1,3 - 2 М СО,СООН щая 0,3 - 0,6 моль ацетата натрия20 ния) элюируют гуаниловые кислоты Отдельные фракции концентриру ляют нуклеотиды известными спосоПример 1, 85 л щелочного 25 (рН 9,0), содержащего гидро РНК, сорбируют на ионообменн анионитом в ацетатной форме 110 мл/час на 1 см поперечн Элюцию рибомононуклеотидов п 30 пенчато со скоростью 30 мл/час перечного сечения.437766 Составитель Е, Соколова Техред А. Камышннкова Корректор В, Кочкарева Редактор Т. Никольская Заказ 3516(11 Изд Мо 1884 Тираж 606 Подписное ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений н открытий Москва, Ж, Раушская наб., д, 4/5Типография, пр. Сапунова, 2 3Цитидиловую кислосту элюируют 30 л 1 М уксусной кислоты; аденозин 2 и аденозин 3, монофосфорные кислоты элюируют 140 л 1,25 М уксусной кислоты; уридиловую кислоту элюируют 90 л 1,5 М уксусной кислоты, содержащей 0,075 моль ацетата натрия, а гуаниловую кислоту 60 л 1,5 М уксусной кислоты, содержащей 0,5 моль ацетата натрия,Элюируется около 98/о сорбированных нуклеотидов. Из отдельных фракций выделяют известными способами конечные продукты с содержанием основного вещества 97 - 100. Предмет изобретения 1. Способ выделения рибомононуклеотидовиз гидролизатов РНК путем ступенчатого хроматографического разделения на анионите с помощью уксусной кислоты, о т л и ч а ющ и й ся тем, что, с целью увеличения четкости разделения продуктов гидролиза РНК, увеличения выхода рибомононуклеотидов на двух последних ступенях, элюирование на этих стадиях проводят в присутствии ацетата натрия или ацетата аммония нарастающей концентрации.10 2. Способ по п. 1, отличающийся тем,что уридиловую кислоту элюируют 1,3 - 2 М уксусной кислотой, содержащей 0,07 - 0,09 моль ацетата натрия или ацетата аммония; гуаниловую кислоту 1,3 - 2 М уксусной 15 кислотой, содержащей 0,3 - 0,6 моль ацетатанатрия или ацетата аммония.