401179

О П И С А Н И Е 40 П 79ИЗОБРЕТЕНИЯК АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ Союз СоветскихСоциалистических Республик Зависимое от авт. свидетельстваЗаявлено 28,.1972 ( 1742825/28-13)с присоединением заявкиКл. С 120 5 06 сударстеенный комитет света Министров СССР но делам изооретенийи открытий риоритетпубликовано 25,11,1974. Бюллетень7ата опубликования описания 06 Х 111.197 УДК 663.14(088.8 Авторыизобретен В. Сизова и Н, Т. Зелко Заявитель оюзный научно-исследовательский институт микробиологических средств защиты растений и бактериальных препаратов СПОСОБ П ЕНИЯ ВИТАМИНА Ва Изобретение относится,к микробиологическойй промышленности.Известен способ получения витамина В 12 путем выращивания на жилкой питательной среде продуцентов;витамина - пропионовокислых бактерий и добавления 5,6-лиметилбензимидазола в питательную среду с последующим выделением полученной биомассы.Целью изобретения является увеличение срока хранения полученного сухого продукта и повышение его качества.Достигается это тем, что в жидкую питательную среду порционно вводят глюкозо-белковый концентрат предпочтительно через 24 и 48 час от начала процесса, причем количество тлюкозо-белкового концентрата составляет,преимущественно 4,6 об. %. Отделенную биомассу высушивают сублимационным или распылительным методом, предварительно смешивая ее с защитной пленкой, например глюкозо-белковым концентратом, и устанавливают рН преимущественно 6,0 - 6,5.П р и м е р 1. Культуру пропионовокислых бактерий, относящуюся к Ргор 1 оп 1 Ьас 1 епцпт аспез, освежают путем двухкратного пассажа через жидкую посевную среду и вводят (в %): ферментативный жидкий гидролцзат кормовых дрожжей 20 или кукурузный экстракт 2; глюкозо-белковый концентрат 2,6 или техническую глюкозу 2; (ИН 4)504 0,2; СаСО, 2,0; СоС 1 2,5 (мг %); водопроводную воду до заданного объема; рН 6,7 - 6,9. Освеженную культуру после перемешцвания вносят в инокулятор с посевной средой 10% к объему пи тательной среды. Развитие бактерий в инокуляторе происходит 48 час при 37 - 38 С, после чего посевной материал, проверяют на чистоту высевом ца мясопептонный бульон, мясопептонный агар и микроскопированцем, а 10 также - на активность по определению титра и бактерий.Готовый инокулят цз цнокулятора поступаетв ферментер с фермецтационной средой следующего состава (в %): глюкозо-белковый кон 1 з центрат 2,6; фермснтатнвный жидкий гидролизат кормовых дрожжей 20 (сухой 3) или кукурузный экстракт 3, аммоний сернокислый 0,2; кобальт хлористый 2,5 (мг%); вода водопроводная ло заданного объема,20 Стерилизация среды проводится 1 час прц0,8 атм. После стерилизации рН доводят до 6,7 - 6,9.Выращивание культуры Ргор 1 оп 1 Ьас 1 епцтпаспеэ в ферментере проводят при 37 - 38 С 2 э 90 - 96 час без подачи воздуха, прц избыточном давлении 0,3 - 0,5 атм и периодическом перемешиванием через каждые 6 час, В процессе фермецтации рН,поллерживают равным 6,5 - 6,9 путем нейтрализации образующихся 30 кислот стерильным 40%-ным раствором КаОНКорректор М. Лейзерман Редактор Н. Спиридонова 1 ьк;:; 15 31 з тад хе, О Тираж 456 Подписное. Гое 1.а ве;кео ,:о.ета Гозета Мипетров СССР ьо "е,с еопеее: и открытий ййиске 1, /,-йо, Ра;екя 5 яо., д. 4/5: о р :и. 5,р. С суО Б и,с последующим перемешиванием. Кроме того, в культуральную жидкость дробно добавляют стерильный раствор глюкозо-белкового концентрата или технической глюкозы и однократно вносят 5,б-диметилбензимидазол в следующих количествах: в од:осуточную культуру после нейтрализации кислот добавляют глюкозо-белкового концентрата 1,3 или технической глюкозы 1% к объему среды; в двухсуточную культуру после нейтрализации кислот добавляют глюкозо-белкового концентрата 0,7% или технической глюкозы 0,5%, а 5,6-диметилбензимидазол,вносят в количестве 10 мг/л в виде стерильного раствора. В трехсуточной культуре проводят только нейтрализацию кислот. На четвертые сутки выращивание прекращают.Выращенную бактериальнуо массу сначала охлаждают до 15 - 20 С, а потом отделяют от культуральной жидкости сепарированием, после чего к полученной пасте добавляют защитную среду - глюкозо-белковый концен:- рат или,мелассу в количестве 7 - 10% к весу биомассы, тщательно перемешивают в смесителе и устанавливают рН 5,5 - 6,5, Подготовленную таким ообразом,пасту наносят на лотки сублимационной сушилки слоем 0,5 - 0,7 см, ставят в камеру предварительного замораживания и охлаждают при ( - 30) ( - 35)С 2 час. Затем замороженную пасту быстро, переносят в сублиматор (охлажденный) и в условиях вакуума (100 мм рт. ст., подвергают высушиванию. Когда температ - ра высушиваемой массы повысится до 0 С, включают подогрев. Температура биомассы после подогрева не должна превышать +35 С. В конце сушки влажность препарата составляет 4 - 5%. Высушенный препарат измельчают и расфасовывают в полиэтиленовую тару (банки, мешки).П р и м е р 2. По примеру 1 проводят выра щквание пропионовокислых бактерий, затембиомассу, выращенную в ферментере, смешивают с защитной средой - глюкозо-белковым концен.:ратом (10%), устанавлиают рН 5,5 - 6,5 и высушивают на раопылительной сушил ке. Температура на входе 130 в 1 С, навыходе 70 - 75 С. 1. Спосоо получения витамина В,2 путемвыращивания на жидкой питательной средепродуцентов витамина - пропионовокислыхбактерий и добавления 5,6-диметилбензимид 20 азола в питательную среду с последующимвыделением полученной биомассы, о т л и ч а ющийся тем, что, с целью увеличения срокахранения, полученного сухого продукта и повышения его качества, в жидкую питатель 25 ную среду порционно вводят глюкозо-белковый концентрат предпочтительно через 24 и48 час от начала процесса,2. Способ по п. 1, отл ич а ющийся тем,что количество вводимого глюкозо-белковогоЗО концентрата составляет преимущественно4,6 об. %,3. Способ по п, 1, отличающийся тем,что отделенную биомассу высушивают сублимационным или распылительным методом,35 предварительно смешивая ес с защитнойпленкой, папри 1 мер глюкозо-белковым концент;том, и устанавлев; рН преимущественно 60 - 65,