Способ определения массовой доли лактозы

, 1791771 з 1)1 0 33/04 САНИЕ МУ СВИДЕТЕЛЬ К АВТО ромышленозных проние ред ГОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНОЕВЕДОМСТВО СССР(75) Е.А, Фетисов, Р,М. Линд и Н,В, Терехова (56) Скурихин Н.МЛинке О,ЭФролова Г.Ф Лось ТИ Использование газовой хроматографии для изучения содержания сахаров при кулинарной обработке некоторых. овощей. Вопросы питания, 1980, М 6, с. 59-64.51 апоагт 1 ОЕ 79-1977-МП апг) вП ргос 3 цстз. Оетегпз)пабоп о 1 астозе и йе ргезепсе оТ обжег гебцс)пц зцЬзтапсез, (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ МАССОВОЙ ДОЛИ ЛАКТОЗЫ(57) Назначение: молочная иность, контроль состава безлакт Изобретение относится к молочной промышленности, а именно к контролю составабезлактозных продуктов для питания детей,и может быть использовано на молочноконсервных комбинатах, специализирующихся на выпуске соответствующихпродуктов,Целью изобретения является сокращевремени и снижение себестоимости опеления.Для осуществления данного способа навеску исследуемого продукта растворяют вводе, белки и жир удаляютиз раствора путем подкисления его соляной кислотой ицентрифугирования, раствор нейтрализуютидроксидом натрия до рН 4,8 + 0,05, враствор вносят Р -галактоэидазу и ортонит- .рофенил- Р -О-галактопиранозид (ОН Ф Г), перемешивают, смесь нагревают до 80 + 0,5С, охлаждают в ледяной воде, вносят в смесьраствор гидроксида натрия, вновь охлаждадуктов для питания детей. Сущность изобретения; навеску исследуемого продукта растворяют в воде, Белки и жир удаляют из раствора путем подкисления, Полученный раствор нейтрализуют до рН 4,8 и вносят 3-галактоэидазу и ортонитрофенил -О-галактопиранозид, перемешивают, смесь нагревают до 80 С, охлаждают в ледяной воде, вносят в смесь раствор гидроксида натрия, вновь охлаждают в ледяной воде, повторно нагревают до 85 С, охлаждают на воздухе и измеряют значение оптической плотности полученной смеси на длине волны 305 - 325 нм, коррелирующее с содержанием лактозы в продукте,ют в ледяной воде, нагревают до 85 0,5 С, охлаждают на воздухе и измеряют оптическую плотность смеси на длине волны 315: 10 нм против раствора, полученного в ф результате холостого опыта. По величине оптической плотности, пользуясь данными 0 об оптических плотностях, полученных при а исследовании калибровочных растворов, определяют содержание лактозы в продукте.Отклонение от вышеприведенных параметров определения на величину, большую чем указанный допуск приводит к возрастанию погрешности определения в 2-3 раза(с 10 Д относительных до 20 - 30.0), . ЬП р и м е р, Анализу подвергают низколактозную молочную смесь с солодовым экстрактом.Приготовление раствора фермента. Навеску 0,125+ 0,001 гр-галактозидазы помещают в мерную колбу вместимостью 25 см,з приливают около 15 см дистиллированной1791771 5 10 15 20 25 долю лактозы в продукте. ВС данном случае она равна 0,10030 Формула и зоб рете н и яСпособ определения массовой долилактозы, предусматривающий растворениепробы исследуемого продукта, осаждениежира и белков, внесение о -галэтозидазы,35 нагревание полученной смеси с последующим ее охлаждением, измерением значения оптической плотности и установлением мэссовой доли лактозы в зависимости от изме 40 ренногозначения, отлича.ющийся тем, что, с целью сокращения времени и снижения себестоимости, дополнительно перед нагреванием в полученную смесь вносят ортонитрофенил- В -О-галактопиранозид, а в до 20 С, причем измерение значения оптической плотности осуществляют в диапазоне длин волн 305-325 нм,50 СоставительТехред М,Моргентэл Корректор Н,Ревская Редактор Заказ 150 Тираж ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР113035, Москва, Ж, Раушская наб., 4/5 Производственно-издл" ельский комбиндт "Патент", г, Ужгород, ул.Гагарина, 101 воды, растворяют и доводят водой до метки.Раствор хранению не подлежит,Приготовление раствора ОНФГ. Навеску 0,020 + 0,001 г ОНФГ (ортонитрофенил -О-галактопиранозида) помещают в пробирку, добавляют 5 см дистиллированнойзводы и растворяют. Хранят раствор при температуре не выше 0 С не более 10 дней.Приготовление растворов сравнения,Растворы сравнения готовят, растворяя вводе сахарозы и лэктозы.Для случая продукта "Низколактознаямолочная смесь с солодовым экстрактом",содержащим лактоэы - не более 0,4 о , адругих углеводов - 48,9%, состав растворовсравнения следующий:Раствор 1, г:Лактоза0,021Сахароза 16.300Вода До 100,000Раствор 2, г;Лактоэа 0,021Сахароза 16,300,Вода До 100,000Раствор 3, г;Лактозэ0,021Сахароза 16,300Вода До 100,000Проведение измерения, Навеску 50+ 0,1г анализируемого продукта растворяют в 100см воды с температурой 65 + 5 О С,"В полученный теплый раствор вносят покаплям при непрерывном перемешиванииконцентрированную соляную кислоту до начала осаждения белка. Выждав 5 - 7 мин,осадок отделят центрифугированием.В осветленную сыворотку вносят покаплям 20 о -ный раствор гидроксида натрияи концентрированнуюсоляную кислоту до достижения рН 4,8+ 0,05.Полученный раствор в количестве 1 смзпомещают в пробирку, В эту пробирку микрошприцом вводят по стенке 10 мкл раствора фермента и 5 мкл раствора ОНФГ,содержимое пробирки осторожно перемешивают. Пробирку помещают нэ 5 мин нэводяную баню с температурой 85+ 0,5 О С,Затем пробирку помещают в ледянуюводу на 3 мин, а потом в нее вносят 0,1 смз20 о -ного раствора гидроксида натрия, выдерживают в ледяной воде еще 1 мин и переносят в водяную баню с температурой 85+ 0,5 С на 5 мин, затем охлаждают на воздухе в течение 1 мин.Содержимое пробирки переливают в кювету фотокалориметра с рабочей длиной 5 мм и измеряют оптическую плотность раствора на длине волны 315 + 10 нм против раствора, полученного в результате холостого опыта.Холостой опыт проводят аналогично вышеописанному, заменяя анализируемый продукт равным количеством воды, Также проводят опыты и с калибровочными растворами, Полученные значения оптических плотностей сопоставляют.Так, при исследовании продукта было получено значение оптической плотности, равное 0,570, а при исследовании калибровочных растворов - соответственно 0,405;0,732; 0,990.Массовые доли лактозы в калибровочных растворах соответствуют следующим массовым, долям лактоэы в исследуемом продукте: 0,065; 0,130 и 0,200 . По результатам исследования калибровочных растворов строят калибровочную прямую; пользуясь которой определяют массовую 45 охлажденную - гидроксид натрия с последующим повторным нагревом и охлаждением