Способ определения инсулина в эритроцитах

(19) (11) 55 6 01 й 33/53 Б"-г 11 юЦ ПИСАНИЕ ИЗОБРЕТ И ледовательск к Е.ИМасленко ое свидетельство определения ин крытия и изобре Я ИНСУЛИНА ся к клиническо ичественному о ическои ному опного на овека, и в медик кли ествен изова ви чел ования ским мгласнонабора538 9 м ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТПРИ ГКНТ СССР К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВ(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕВ ЭРИТРОЦИТАХ(57) Изобретение относибиохимии, а именно к ко Изобретение относится биохимии, а именно к колич ределению инсулина, локал мембранах эритроцитов кро предназначено для использ цине,Цель изобретения - снижение трудоемкости и сокращение времени исследования.Поставленная цель достигается тем, что после отмывания в физиологическом растворе эритроциты обрабатывают 20-ным раствором твинв объемном соотношении 1:1 в течение 30 - 40 мин при 18-20 С и в полученном растворе определяют содержание инсулина методом радиоиммунологического анализа,Способ подтверждается следующими примерами. ределению инсулина, локализованного на мембранах эритроцитов крови человека, и предназначено для использования в медицине. Цель изобретения - снижение трудоемкости и сокращение времени исследования. Способ заключается в отмывании зритроцитов крови физиологическим раствором с последующим добавлением 20 О- ного раствора твинв объемном соотношении 1;1, инкубированием его в течение 30 - 40 мин при 18-20 С. Далее осуществляют в полученном растворе радиоиммунологическое определение содержания инсулина, Положительный эффект способа обусловлен значительным снижением трудоемкости, а также сокращением времени исследования. П р и м е р 1. Испытуемый А., м 30 лет, Диагноз: практически здоров. Кровь в количестве 2,0 мл забирают из кубитальной вены и центрифугируют при 20009 в течение 15 мин, Плазму отбирают и к оставшейся эритроцитарной массе добавляют 10,0 мл физиологического раствора, Перемешивают, центрифугируют,. удаляют супернатант и еще дважды отмывают клетки физиологическим раствором. К 0,2 мл эритроцитарной массы добавляют 0,2 мл 20 ОО-ного раствора твини инкубируют 40 мин при 18 - 20 С, периодически встряхивая содержимое пробирки. Берут 0,1 мл полученного раствора и определяют в нем радиоиммунологичеетодом содержание инсулина соинструкции, прилагаемой км, Содержание инсулинасоставило моль/л.1702317 менении прототипа, что указывает на более высокую точность предлагаемого способа. Это вполне объяснимо, так как при использовании твинопределяются все формы инсулина эритроцитов, в то время как в прототипе регистрируется только свободный инсулин эритроцитов человека,Составитель Б.Мануйлов Редактор А.Маковская Техред М,Моргентал Корректор О.КундрикЗаказ 4541 . Тираж ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР113035, Москва, Ж-З 5, Раушская наб 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101 Положительный эффект способа подтверждается тем, что в предлагаемом способе по сравнению с прототипом более чем в два раза снижаются временные затраты и трудоемкость метода, за счет чего и дости гается цель изобретения. Кроме того, предлагаемый способ позволяет проводить определение инсулина в эритроцитах в серии, состоящей из 100 проб, что дает возмржность использовать метод для 10 пррведения массовых обследований,, У одних и тех же пациентов проведено определение уровня инсулина в эритроцитах с помощью предлагаемого способа по сравнению с прототипом, При использова нии предлагаемого способа уровень инсулина составил 116,44 6,62 ммоль/л (и = 10), по способу-прототипу - 58,73 й 1,58 ммоль/л (и= =10). Следовательно, при использовании предлагаемого способа концентрации инсу лина более чем в 2 раза выше, чем при приФормула изобретения Способ определения инсулина в эритроцитах путем отмывания эритроцитарной массы физиологическим раствором с последующим количественным анализом, о т л ич а ю щ и й с я тем, что, с целью снижения трудоемкости и сокращения времени исследования, к эритроцитарной массе добавляют 20 ф -ный раствор твинв объемном соотношении 1:1, инкубируют 30-40 мин при 18 - 20 С и в полученном растворе производят радиоиммуннологическое определение содержания инсулина,