Способ идентификации изоантигенов волос человека

СОК)э СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСГИЧЕСКИРГСПУБЛИК 9) (1684685 А 5)5 0 01 И 33/5 ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯПРИ ГКНТ СССР ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯК АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ Изобретение относится именно к судебной медицин использовано для установ лежности волос человека о лицу,к медицине, а и может быть ения принад- пределенному 3 1 р)(71) Ташкентский государственный медицинский институт(54) СПОСОБ ИДЕНТИФИКАЦИИ ИЗОАНТИГЕНОВ ВОЛОС ЧЕЛОВЕКА(57) Изобретение относится к медицине, аименно к судебной медицине, и может бытьиспользовано для установления принадлежности волос человека определенномулицу. Цель изобретения - повышение точноЦель изобретения - повышение точности способа.Способ осуществляют следующим образом.Волосы предварительно обезжиривают, помещая в раствор смеси спирта с эфиром промывая теплой мыльной водой несколько раз, Затем волосы сдавливают в тисках между пластинами из легированной стали, сплюшивая их, измельчают в ступке с толченым стеклом в соотношении 1 ч волос и 9 толченого стекла, Полученную смесь заливают физраствором из расчета б мл физраствора на 1 г смеси, Жидкую смесь помещают в холодильник при температуре сти способа. Это достигается тем, что волосы перетирают с толченым стеклом до состояния пудры в соотношении 1:9. Полученную смесь экстрагируют в физиологическом растворе в соотношении 6 мл физраствора нд 1 г смеси В вытяжке этой смеси определяют агглютинины путем добавления к ней взвеси стандартных эритроцитов. Оставшуюся часть вытяжки выпаривают при 120-140 С, а полученный сухой остаток исследуют реакцией абсорбции-элюции на наличие агглютиногенов. По ндличию агглютиногенод и дгглютининов определяют принддлежнос 1 ь человеческих волос, Точность способа воэрастае 1 с 75 . по прототипу до 91,70,(+4)-(+5) С на сутки для экстрагировдния. Затем по 2 капли вытяжки (экстракта) переносят в три пробирки, куда добавляк)т (в каждую в отдельности) по 1 капле 1;ь-ной взвеси стандартных эритроцитов А, В и О, центрифугируют 4 мин при 1500 об./мин и определяют агглютинацию. Наличие агглютинации соответствует обнаружению агглютининов, что опрепеляется микроско. пически, Оставшуюся смесь помещает в термостат при температуре ( 120) ( 140)С на 30 мин. Затем оставшуюся смесь исследуют реакцией абсорбции-элюции для обнаружения дгглютиногенов Способ подтверждается примерамиП р и м е р 1. Взяли волосы у лица с А (11) группой крови, обеэжиривали их в растворе спирт-эфир, затем сдавливали волосы в тисках, измельчали до состояия пудры д фарфоровой ступке вместе с толчгны 1 с) еклом в соотношении 1:9, Смесь заливали физраствором из расчета 6 мл физраствора нэ 1смеси которую помещали в холодильник при тел ературе 5"С на сутки. Затем брали вытяжку в три пробирки 2 капли и добавляли по 1 капле 1 о -ной взвеси стандартных эритроцитов: в одну А, в другую - В э в третью - О эритроцитов, центрифугировали 4 мин при 1500 об,мин, В препарате, куда добавлялась взвесь эритроцитов А, агглютинации при микроскопическом исследовании не отмечалось а в препарате, куда добавлялась взвесь эритроцитов В и О, отмечалась агглютинация. что указывает на присутствие агглютининов анти-В и анти-О, Оставшуюся смесь в физрастворе помещали э термостат при температуре 120"С на 30 мин. Затем смесь исследовали реакцией абсорбции-элюции для обнаружения агглютиногенов В результате выявлен агглютимоген А.Обнаруженные агглюгиногены и агглютинины дают возможность идентифировать волосы, Агглютинин анти-О является добавочным, хотя агглютинин анти-О в тканях человека, по литературным данным, на настоящее время не обнаруженПри исследовании данных волос в смеси с толченым стеклом в соотношении 1;15 с добавлением 6 мл физраствора на 1 г сме си и экстрагированием в течение 48 ч агглютинины обнаружены не были, При исследовании этих же волос в смеси со стеклом в соотношении 1 9 с добавлением 9 мл физраствора на 1 г смеси и экстрагированием в течение суток в препаратах, куда добавлялась взвесь эритроцитов В и О, отмечались единичные небольшие агглютинаты, что ставило присутствие агглютининов под сомнение.П р и м е р 2 Взяли волосы у лица с В (111) группой крови, обезжиривали их, сдавливали в тисках, измельчали до состояния пудры а фарфоровой ступке с добавлением толченого стекла в соотношении 1:9. На 1 г смеси добавлялось 6 мл физраствора, Эстрагировали смесь 24 ч в холодильнике при температуре +5"С, Вытяжку по 2 капли помещали в три пробирки, куда добавляли по 1 капле 1%-ной взвеси стандартных эритроцитов А, В и О в каждую пробирку в отдельности, центрифугироеали 4 мин при 1500 об,мин. В препаратах, куда добавляли взвесь эритроцитов А, микроскопически отмечали агглютинацию, а в препарате, куда добавляли взвесь эритроцитов В и О, агглютинация не наблюдалась, Значит, в исследу 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 емом волосе обнаружены агглютинины анти-А Оставшуюся часть смеси в пробирке с физраствором помещали в термостат при температуре+140"С на 30 мин, Затем смесь исследовали реакцией абсорбции-элюции, при которой обнаружен агглютиноген В, Обнаруженные агглютинины анти-А и агглютиноген В позволяют идентифицировать принадлежность волос.Этот же образец волоса был исследован по способу-прототипу, в результате обнаружены агглютиногены А и В, хотя агглютиногена А в исследуемом обьекте нет.При исследовании образца этих же волос по предложенному способу была взята смесь с толченым стеклом 1:6 и 3 мл физраствора на 1 г смеси При экстрагировании в течение 24 ч была получена ложная агглютинация во всех трех препаратах, так как повидимому, увеличение концентрации экстракта приводит к увеличению кератиновых белков, которые начинают влиять на агглютинацию при определенной их концентрации.Параметры (соотношение волос с толченым стеклом, соотношение смеси с физраствором) подбирали экспериментально (в ходе исследования) и, как показали примеры, они являются наиболее оптимальными для получения положительного эффекта.Положительный эффект от использования предлагаемого способа состоит в повышении точности способа, по сравнению со способом-прототипом, что обеспечивается возможностью обнаружения агглютининов и агглютиногенов в исследуемом обьекте на 91,7 "(и рототип 75%),Формула изобретения Способ идентификации изоантигенов волос человека, включающий их обезжиривание, расщепление и проведение реакции абсорбции-элюции, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью повышения точности способа, волосы перетирают с толченым стеклом до состояния пудры в соотношении 1;9, полученную смесь экстрагируют в физиологическом растворе в соотношении 1:6, в вытяжке этой смеси определяют агглютинины путем добавления в нее взвеси стандартных эритроцитов, оставшуюся часть вытяжки выпаривают при 120-140 С и полученный сухои осадок исследуют реакцией абсорбции-элюции на наличие агглютиногенов и по наличию агглютининов и аглютиногенов соответствующих групп определяют принадлежность человеческих волос к той или иной группе изоантиенов.