Способ определения активности воспалительного процесса при периодической болезни у детей

(51)5 6 01 й 33 РЕ ЕНИ К АВТОРСК СВ ЕЛЬС ершенство н и взаимо- в, триглицерихроническом чном процессе, ИЯ АКТИВНОО ПРОЦЕССА ЛЕЗНИ У ДЕ 2 табл носит медицине, а ической боименн леэниНа менен анные поизазы А в сывозависимости адия ремисот тт ГОСУДАРСТВЕННЫИ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМПРИ ГКНТ СССР ПИСАНИЕ ИЗО(71) Ереванский институт усония врачей(56) Казарян П,А. Обмепревращения фосфолипидодов и глюкозы привоспалительном бронхолего(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНСТИ ВОСПАЛИТЕЛЬНОГПРИ ПЕРИОДИЧЕСКОЙ БОТЕЙ эобретение от сяо к диагностике перио(ПБ) у детей.чертеже представленыию активности фосфоликрови при ПБ у детей вести заболевания; а -- стадия приступа. обретения является повыше- способа,тигается тем, что в известном еделения степени активности ого процесса при периодичеу детей путем исследования рови определяют активностьА и при значении активности д. Фосфолипазной активности) 4 - 2,0 вне приступа определяенно легкую, среднюю и тяжеоспалительного процесса при й болезни у детей. Целью из ние точности Цель дос способе опр воспалительн ской болезни сыворотки к фосфолипазы Фермента (в е 1,25; 1,55; 1,8 ют соответств лую степени в периодическо(57) Изобретение относи именно к способам опр сти воспалительного про ческой болезни у детей, Ц является повышение т Цель достигается тем, чт тельно в сыворотке кро тивность фосфолипазы активности фермента (в е активности) 1,25 - 1,40, 1 вне приступа определя легкую, среднюю и тяжел лительного процесса и болезни у детей, 1 фиг.,тся к медицине, а еделения активноцесса при периодиелью изобретения очности способа. о у детей дополни- и определяют ак- А и при значении д, фосфолипаэной,4 - 1,55, 1,80-1,90 ют соответственно ую степени воспари периодической особ осуществляют следующим обра щ 1,0 мл сыворотки крови инкубируют в течение 15 мин при 60 С в водяном термостате. К 0,5 мл ин куби рован ной сыворотки добавляют 0,5 мл 10 ь-ного раствора трипсина и выдерживают 1 ч при 0 С. К 0,5 мл инкубированной смеси добавляют 1 мл рабочего раствора субстрата и выдерживают в течение 1 ч в термостате при 37 С, Затем добавляют 0,5 мл 0,06 М раствора хлористого кальция (для прекращения реакции) и титруют 0,1 н. раствором МаОН в присутствии фенолфтэлеина.Холостой опыт. К 0,5 мл сыворотки добавляют 1 мл рабочего раствора субстрата и 0,5 мл 0,06 М раствора хлористого кальция, Титруют, как и в предыдущем опыте (0,1 н. МаОН) до появления бледно-розового окрашивания.Реактивы (фосфолипидную массу) готовят следующим образом, 1684686Нэ 1 г ячеистого желтка добавляют10 мл раствора клороформетэнол (2;1). Сосуд с раствором ставят на магнитную мешалку на 30 мин, Затем верхний слойудаляют, а нижний слой сушат в токе газового азота, Рабочий раствор субстрата готовят во время опыта, К 7 мг фосфолипидноймассы прибавляют 3 мл 0,5 мл трисчаС 1-буфера. (рН 8,0), который затем смешивают с9 мл раствора натриевой соли деэоксихолиевой кислоты,Расчет проводят по формулео - хо--- х 2 х 1 =- ул. сед, фосфолипазыхоА в 1 мл сывороткигде (о - опыт;хо - холостой опыт),Исследования проводили у 29 больныхдетей с ПЕ. Контролем служили данные,полученные у 17 практически здоровых детей,В сыворотке крови указанным вышеспособом определяют активность фосфолипазы А, Статическая обработка полученныхданных проводилась по Стьюденту и ФишеРуРезультаты проведенных исследований, приведенные е табл,1, 2 и на чертеже,свидетельствуют о значительном увеличении активности фосфолипазы А в сывороткекрови больных детей различными формамиПБ как в стадии ремиссии, (а) так и во времяприступа (б), Примечательно что степеньизменения активности фосфолипазы Аумеренная (при значении активности фермента 1,25 1,40), выраженная (1,46-1,75) ирезкая (1,80- 2,00) находится в прямой зависимости от тяжести заболевания (легкая,средняя и тяжелая степени соответственно). Умерен ные изменения набл юда ютсяпри торакальной форме БП (11) вне приступа- в стадии ремиссии, выраженные - приадбоминальной и смешанной формах 111, арезкие - п ри П Б осложненной амилоидозом (Ч), На чертеже столбики 1 обозначаютгруппу здоровых лиц,Способ иллюстрируется следующимипримерами:Г 1 р и м е р 1, Больной П,Ж 11 лет,обследовался в Республиканской детскойклинической больнице г.Еревана (РДКБ) в1987 г, Мальчик от 5-х родов, беременностьи роды протекали нормально. В анемнеэене отмечаются частые ангины, ОРЗ, наследственность отягощена - отец болел периодической болезнью (ПБ) с 4-летнеговозраста.Настоящее заболевание началось ввозрасте 5 лет. Предлагаемая причина заболевания не обнаружена Приступы заболевания чаще возникают в связи с простудой,приемом острой пищи. Наблюдаются приступообразные острые боли в груди переменной локализации (больше в правой5 половине грудной клетки), иррадируюущиев правое плечо и сочетающиеся с повышением температуры до 39 С, Приступы сопровождаются выраженной потливостью,ознобом, одышкой. Длительность присту 10 пов составляе 1-2 дня, в течение года онинаблюдаются 10-12 раз, несколько учащаясь зимой,Состояне при поступлении средней тяжести, кожные покровы бледные, Со сторо 15 ны сердца и легких вне приступа патологиине обнаруживается, во время приступа тонысердца учащены, умеренно приглушены, влегких справа (на месте локализации болей)дыхание ослаблено, кратковременный, неж 20 ный шум трения плевры, умеренное укорочение перкуторного звука, Живот мягкийбезболезненный (в том числе во время приступов), Печень и селезенка во время приступа не прощупываются. Стул и25 мочеиспускание в норме,Из лабораторных данных: лейк. 9,5 хю 10 /л, нетрофилеэ - 75 , лимфопения -922 ф, СОЭ - 22 мм/ч, Биохимический анализкрови беэ особенностей, СРП ", повы 30 шение скаловой кислоты 0,260 ед, опт, пл,Со стороны мочи патологии не обнаружено,На ЭКГсинусовая тахикардия, признакиповышения электрической активности миокарда левого желудочка. На рентгенограм 35 ме грудной клетки во время приступаумеренное утолщение плевры справа,На основании анамнеза, клиники и лабораторных испытаний у ребенка диагностирована периодическая болезнь,40 торакальная (грудная) форма,С целью выявления диагностическойзначимости предлагаемого метода в сыворотке крови была определена активностьфосфолипазы А предложенным выше спосо 45 бом. Активность фермента во время приступа была равна 1,42 ед., вне приступа - 1,25ед., что соответствует легкой степени воспалительного процесса.П р и м е р 2, Больной А,В 12 лет,50 обследовался в РДКБ в 1988 г. Мальчик от1-й беременности, 1-х родов, Масса при рождении 3,950. Перинатальный анамнез безособенностей, В блет перенес корь, а в 7 лет- эпилемический паротит, в 8 лет - ветряную55 оспу и аппендэктомию, В родословной случаев ПБ не обнаружено,Заболевание началось в 8-месячномвозрасте с приступов болей в животе и повышения температуры. Боли в животе носили разлитой характер, температура10 спокойный, в легких отклонений нет. Границы сердца в пределах нормы Тоны сердцз звучные, во время приступа тахиаритмичные. Живот вне приступа мягкий, безболезненный при пальпации. Во время приступа пальпация невозможна из-за резких болей и выраженного дефанса мышц. После стихания болей печень пальпируется на 2 см ниже реберной дуги. Стул и мочеиспускание во время приступов учащены.Из лабораторных данных, лейкоциты 6,7 10 /л, лимфоциты 38;, СОЭ 23 мм/час, СРП сиаловые кислоты - 260 ед опт, пло, трансаминазы: АсАТ - 0,3- 0,72 мкмольчл. АлАТ/0,45-1,06 моль/ч,л,/, Анализ мочи без особенностей, склонность к никтурии, Сонография: стенки желчного пузыря утолщены. Холецистография; моторика желчного пузыря не нарушена. Эзофагогастродуоденоскопия - картина выраженного поверхностного гастрита, эрозивного дуоденита.На основании клинико-лабораторных данных и анамнеза был поставлен диагноз; периодическая болезнь, абдоминальная форма. Осложнения; поверхностный гастрит, аэроэивный дуоденит. С диагностической целью была определена активность фосфолипазы А, которая была равна во время приступа 1,84 ед., вне приступа - 1,55 ед., что соответствует средней тяжести воспалительного процесса.П р и м е р 3, Больной И,А 12 лет, обследовался в РДКБ в 1987 г, 88 г, Мальчик от 2-й беременности, 2-х родов, Перинатальный анамнез без особенностей, Перенесенные заболевания: кишечная инфекция неясной этилогии (1 г.), свинка (5 лет), в 4 года - аппендэктомия, Случаев ПБ среди родственников не наблюдалось,20 25 30 35 40 45 50 55 поднималась до 38-39"С. Болевой симпгол отличается постоянством локализации, боли всегда локализуются в правом подреберье, иррадируются в левое и правоеплечи. Приступы сопровождаются диспептическими явлениями (тошнота, рвота с примесью желчи), диэурическими явлениями, Спустя 5 лет от начала заболевания во время приступов болей в животе отмечалось послабление стула (понос), Длительностьприступов обычно составляла 1 - 3 сут, частота приступов в месяц колеблется от 0 до 2 раз, в среднем до 5 раз. Их частота увеличилась в зимне-весенний период, а также всвязи с простудой, За час до начала приступа проявлялась нейровегетативная аура:покраснение щек, подавление настроения. Состояние при приеме средней тяжести, кожные покровы бледные, чистые Зев Заболевания началось в возрасте 1,5 годя Предлагаемая причина заболевания кишечныи токсикоз (понос). Приступы заболевания чаще возникают в связи с приемом пищи, эмоциональным стрессом, Период предвестников отмечается всегда за 1-2 дня до начала приступа в виде пожелтения и помутнения склер. Длительность приступа 1 - 3 дня, в течение месяца наблюдалось от 0 до 3 обострений, в с реднем за год - около 8. Начальными проявлениями заболевания в период приступа были абдоминалгия, повышение температуры от 39 до 40. Приступам часто сопутствуют явления диспепсии (понос, рвота), а также артропатии (боли в коленных суставах). В момент приступа моча темнеет, отмечаются учащенное мочеиспускание, озноб.Боли в животе острого характера, переменчивые, чаще локализованы в левом и правом подреберье. На пятом году заболевания у мальчика к болям в животе присоединились боли в нижних отделах грудной клетки, больше слева, иррадирующие в плечо. При болях в грудной клетке температура была не всегда В течение 1 мес ребенок получал колхицин, В течение года приступов не было, а затем возобновились. Приступ купируется приемом амидопирина, энтеросептола.Состояние при поступлении тяжелое, кожные покровы бледные с землистым оттенком, Отеки на лице, нижних конечностях, туловище. Со стороны легких на фоне жесткого дыхания единичные хрипы, в нижних отделах легких ослабленное дыхание, Границы сердца в пределах возрастной нормы. Тоны сердца приглушены, ритмичны, систолический шум на верхушке, АД 110/70, Аппетит умеренный, язык с беловатым налетом, живот мягкий, умеренный асцит, безболезненный вне приступа, в момент обострения - болезненность и напряжение мышц передней брюшной стенки. Печень выступает на 2 см ниже реберной дуги, Стул полуоформленный с непереваренными остатками пищи,Анализы, Со стороны гемограммы - постоянное ускорение СОЭ (во время приступа 66 м/ч, вне - 58 ммч), тенденция к лей коцитозу (10,2-13,6 10 /л), нейтрофилез (до 74 О), лимфопения (24 О) анемия - Нв - 84 г/л эр. 2,59 10 /л. Отмечалось диспроте 12инэмия/ гипоальбуминэмия, а 1, а 2 гиперглобулинэмия, наличие СПР (, ) СК (130, 280 ед, пт, пл,), увеличение содержания липопротеидов (65 - 120 ед.), остаточного азота 32 - 47 ммоль/л), Обнаружены сдвиги в гуморальном (9 Амл о/19 М - 180 мл ь, 1684686196 1400 мл%) клеточном (1 лимфоциты 47 иммунитете,Со стороны мочи - постоянная протеинтурия (3,3-6, Г -8, 25 ). Суточндя экскреция форменных элементов крови с мочой - в пределах нормы. По пробе Зимницкого максимальная относительная плотность 1028, минимальная - 1015, никтурия, дуодендльное зондирование без особенностей, На ЭКГ обнаружена легкая синусовдя аритмия (72 уд/мин), повышение электрической активности миокарда левого желудочка. На ф КГ отмечается снижение амплитуды 1 тона, систолический шум очень малой амплитуды, который носит функциональныи характер. На рентгенограмме легких обнаружены очаговые тени, в особенности спра ва, с инфильтративными оттенками. Справа нерезко выражены явления выпотд. На контрастной уро рамме некоторое стдзировдние шейки правой почки, отмечаются до бавочные сосуды справа нд уровне верхнего и среднего полюсов. По д-оным эндоско пиии картина поверхностного гдстродуо денита. При сонографическом исследовании почек с обеих сторон паренхимд отечная, рыхлая, диффузно изменена. Исследование биоптатд из слизистой толстой кишки выявило диффузную лимфогистиоцитдрную инфильтрдцию, при дополнительных окрасках на дмилоид (конко-рот, генциан-виолет) определяются фибриллярные нити красного цвета вокруг сосудов и в базальных мембранах слизистой, характерные для амилоидаУ ребенка диагностирована периодическая болезнь, смешанная форма, осложнения; амилоидоэ почек (нефротическая стадия), хронический поверхностный гастродуоденит. С целью выяснения диагностической значимости предлагаемого метода в сыворотке крови была определена активность фосфолипазы А Акгивность фермента была 2 ед. вне приступа, 2,24 - во вреля приступа, что соответствует тяжелой степени воспалительного процесса. П р и м е р 4. Больной Г,В., 10 лет, обследовался в РДКБМальчик от первой беременности, первых родов Масса при рождении 3200 г. В три года перенес инфекционный гепатит, часто болеег ОРЗ. Наследственность отягощена, младший брат страдает периодической болезнью, Заболевание началось в б-месячном возрасте с приступов болей в животе и повышения температурыдо 38 С Приступы заболевания чаще возникают в связи с простудой, эмоциональным стрессом. Спустя 7 лет от ндчдлд заболевания присоединилась артропдия, а через 8 леттордкдлгия Приступам всегда сопутствовали явления диспепсии тошнота, рвота, метеоризм, задержка стула, Зд несколько5 часов до начала приступа всегда проявлялась нейровегетдтивная аура: возбуждение,капризность, Длительность приступов всреднем 1 день, частота приступов 12 разав месяц, в год 12 раз10 Состояние при приеме - средней тяжести кожные покровы бледные с сероватоземлистым оттенком, Зев спокойный, влегких отклонений нет, границы сердца впределах нормы, тона несколько приглуше 15 ны. Живот вне приступа мягкий, печеньпальпируется на 2 см ниже реберной дуги.Во время приступа пальпация живота невозможна из-зд резких болей и выраженного дефднса мышц. Мочеиспускание во время20 приступа учагценоЛабораторные данные со стороны гемогрдмлы НВ - 130 г/л, эр, 3,89 10 /л,лейк. - 9,3 10 /л, неитрофилез 71%, СОЭ вовремя приступа 35 мм/ч, вне приступа - 1125 мм/ч, отмечалдсь диспротеинемия: гиподльбуминэмия, а, а 2 гиперглобулинэмия,наличие СПР(4 ), СК -230 ед, опт пл. /3-липопротеиды - 45 ед., ост. азот - 17 ммоль/л,креатинин 44,2 ммоль/л. Со стороны мочи:30 общий анализ мочи в пределах нормы, попробе Зимницкого - максимальная отн.плотн. 1027, минимальная - 1015 никтурия.Урохолецистография; отмечается гипермоторная функция желчного пузыря.35 Слева почка несколько ротирована, справапиэлоэктазия, стазирование верхних полюсов с двух сторон, Мочеточники и мочевойпузырь в норме,Ээофагогастродуоденоскопия; картина40 поверхностного гастрита, дуоденита,У ребенка диагностирована периодическая болезнь, смешанная форма. Осложнения: поверхностный гастродуоденит.дискинезия ж/в путей по гипермоторному45 типу,Нд основании указанных выше функциональных и клинико-лабораторных данныхсостояние больноо - средней тяжести, Однако активность фосфолипазы А в сыворот 50 ке крови составляла 1,84, чтосвидетельствует о тяжелой степени воспалительного процесса В последующем былоустановлено, что у больного периодическаяболезнь была осложнена амилоидоэом,55 гадким образом, при использованиитолько способа-прототипа невозможно правильно определить степень тяжести процесса, а определение фосфолипдзы Апозволило уточнить (исправить) величину10 1684686 Та блица 1 Изменение активности фосфолипазы А в сыворотке крови при различных формах периодической болезни у детей вне приступа (И + м) осложненныеГБ амилоидозом Неосложненные Формы ПБ Брюшная Здоровые Смешанная Грудная 1,31- 0,1п=6 1 ф 550,08 1,450,07 1,90 М 0,08и 6 1,12 Й 0,02 п = 17и = 12 активности процесса (степень тяжести заболевания),П р и м е р 5. Больной П,Г., 14 летнеоднократно обследовался в РДКБ г,Еревана (1984, 1986, 1988, 1989 гг,), Мальчик от 5первой беременности, первых родов. Массаребенка при рождении 2700 г. Перинатальный анамнез беэ особенностей, В анамнезеотмечены эпидемический паротит, корь,тонзилэктомия по поводу хронического тонзиллита,В родословной случаев ПБ не обнаружено. Заболевание началось в 3-летнем возрасте с приступов болей в животе иповышения температуры до 39,5 С, 15Приступы заболевания чаще возникают всвязи с приемом пищи, простуды, За несколько часов, иногда за сутки до началаприступа проявлялась нейровегетативнаяаура: общая слабость, недомогание, Длительность приступов обычно составляет 2 - 3дня, в течение месяца они проявлялись от 1до 3 раз, в год - до 12.При приеме состояние средней тяжести, кожные покровы бледные, сухие. Зев 25спокойный. В легких отклонений нет. Наверхушке сердца нежный систолическийшум. Живот мягкий, пальпация безболезненная, печень выступает иэ-под ребернойдуги на 2 см, Во время приступа пальпация 30невозможна из-за резких болей и выраженного дефанса мышц, Анализы; Нв - 126 ед.Эр 3,71 10/л, Л - 9,9 10 /л, сегм, 69 О,лимф, 28%, мон, 2 ф 6, СОЭ - 22 мм/ч, общийбелок - 80 г/л, ост. азот 21,4 ммоль/л, /3 35-липопротеиды - 55 ед. трансаминазы, АСТ- 0,5 ммоль/л, АЛТ ,75 ммоль/л, СРП ,СК 300 ед, опт. плоти.; анализ мочи Аддисса-Каковского-Л10, Эр 30 10, проба4 44 П Зимницкого - склонность к никтурии. Урохолецистография: моторика желчного пузыря не нарушена. Пилоэктазия справа, а слева - стазирование чашечек средних полюсов. Мочеточник и мочевой пузырь в норме, Эзогастродуоденоскопия; картина поверхностного гастрита,дуоденита, дуоденогастрального рефлюкса (ДГР),У ребенка диагностирована периодическая болезнь, абдоминальная форма, Осложнение: поверхностный гастродуоденит, ДГР,Итак, на основании приведенных данных состояние больного средней тяжести, активность фосфолипазы А в сыворотке крови - 2,0, что указывает на тяжелую степень заболевания и высокую степень активности воспалительного процесса, что и подтверждает в дальнейшем осложнение заболевания амилоидоэом,Обобщая все изложенное, можно заключить, что введение нового показателя (фосфолипазы А) позволяет уточнить степень активности. воспалительного процесса и степень тяжести заболевания,Формула изобретения Способ определения активности воспалительного процесса при периодической болезни у детей, включающий медико-биологическое обследование и биохимический анализ крови, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью повышения точности способа, в сыворотке крови дополнительно измеряют активность фосфолипаэы А и при ее значении 1,25, 1,55 и 1,84 - 2,0 усл. ед. вне приступа определяют соответственно легкую, среднюю и тяжелую степени активности воспалительного процесса,1654686 и ицл г ти ни: т 11 фии.фл( и 1 ри . яр сии при нор;еГ к Пе ни ч детг ;и и нГ н при и, и 11 1 ни) Здиргцыеиражго комитета по и 5, Москва, Ж, еьский комбина Подписноеетениям и открытиям при ГКНТ СССР ская наб, 4/5