Способ определения активности антибиотиков и антисептиков

(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АКТИВНОСТИАНТИБИОТИКОВ И АНТИСЕПТИКОВ(57) Изобретение относится к медицинской микроЬиологии и микробиологической промышленностиЦель изобретенияускорение способа. В способе в качестве тест-культуры микроорганизмаиспользуют штамм Васд 11 цв с 1)егпюпоп 1 щиеГас 1 епз ЦМПМ ) В. Исследуемый образец и культуру разводят вфизиологическом растворе. Определение проводят традиционным методомдиффузии в агар. Инкубирование посевов осуцествляют при температуре 6065 С и учитывают результаты по зонамугнетения роста тест-культуры через4-6 ч инкубации. Чувствительностьспособа на уровне стандартных методов. 1 табл. ицинскоческой Изобретение омикробиологии и носится к ме икробиолог частности риальных и ия - ускор к произепаратов. ние спопромышленности,водству антибактбрете Цель изособа.Способ оразом.КкранлиноМПА едуюцим обествляю ЦМПМЗС ВМПА под ваэна чашки с елассы либо руют 18 ч культур х недел амма ДУ"9 косяках свысеваю ием 0,53 и культив ыраценную ечение лв ультуру шяцуюся навым маслос доЬавлелбы с ПМБ55-67 о С,ранить в пре- Чашки у мож ь при ратов и ОСУДАРСТВЕКНЫЙ КОМИТЕПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТПРИ ГКНТ СССР(71) Всесоюзный научно"исследовательский институт особо чистых биопрепаратов и Бердский химический завод(56) Андреев О.А, и др. Характеристика термофильных бактерий, выделенныхиэ термальных источников Камчатки.Микробиология, Т 52, 1983, 11 3,с.496-504.Егоров Н.С, Микробы-антагонистыи биологические методы определенияантибиотической активности. М, Высшая школа, 965, с.120-130,4 С. Для выпют смыв в фисо свежегоПри этом питПетри разливслой (20 млсушивают прив течение 2рои слои (51 х 1 О) клеттемпературеВ застывшдиаметром 8по 0 1 мл ра олнения анализа использу зиологическом растворе ночного) высева на МПА. ательный агар на чашки ают в два слоя. Первый стерильного агара) подкомнатной температуре ч, а затем разливают вто мл агара, содержащего ок тест"культуры) при не выше 55 С.ем агаре делают лунки мм и в них закапывают створов стандартных пытуемого образца,Результаты определения концентрацийантибиотиков и антисептиков фчПри- Введено растмерворов, мкг/л Условия ин" кубации попредлагаемому способу Концентрация препарата, мкг/мл, поспособу предлагаемому известному 3 КанамицинасульФат "25 65 С6065 С65 о60 С65 С0 ОС ц6 ц,ц6 и,Ц/О чцц 128 + 3,1 26 + 0,.55 6,7 + 0,12 29,5 -:- 0,7 122 + 25,5+26 + 6,92 + 6,96 + 30 т 29,ч + 3,50,650,610,0080,110,80,9 Мертиолат 25 5 Перекись водорода 6,8Тетрациклин П р и м е ч а н и е, Условия инкубации по известномуспособу: 3 С, 18 ч. 3 15112инкубируют при 60-65 С в течение 16 ц, после чего определяют диаметрэон угнетения роста. Расчет проводятпо предварительно построенной калиб 5ровоцной кривой.П р и и е р 1. Определение бацитрацина в ветеринарном препаратебациллихин. Исходный препаратрастворяют в Физиологическом растворе и готовят серию разведений.Полученные растворы закапывают влунки питательного агара, зараженного Васх 11 ця йЬеппопоп 1 хццеГас 1 епяЦМПМ В"2945. Чашки инкубируют 6 ч 15при 65 С, затем определяют диаметрзон задержки роста и рассцитываютконцентрацию препарата по калибровоч-ной кривой, построенной при использовании стандартных растворов с концентрацией 5-100 мкг/мл.П р и м е р 2. Определение бацитрацина в культуральной жидкости,Культуральную жидкость центриФугируют для отделения клеток продуцента 25(В,1 сЬеп Гопп 1 я). ЦентриФугат разводят Физиологицеским раствором и затем проводят определение по примеру 1.Биологическая активность культуральной жидкости составляет 5200 мкг/ 30/мл (о известному спссобу определено 5250 мкг/мл).,П р и и е р ы 3"О. В подотоыленные чашки закапывают растворы, содержащие различные концентрации антибио- З;тиков (канамицина сульФат, тетрациклин) или антисептиков (мертиолат, перекис.ь водорода), по 0,1 мл на лунку.После инкубации чашек при 60 С втечение 6 ч или при 65 С в течениец измеряют диаметры ингибированиязон роста бактерий, после чего с помощью калибровочных кривых определяют концентрацию антибиотика или антисептика. Параллельно определяют концентрацию антибиотиков и антисептиковизвестным способом. Результаты представлены в таблице,Таким образом, предлагаемый способ позволяет уменьшить время, необходимое для определения биологическойактивности или концентрации антибиотика или антисептика, в 3-ч раза, беэухудшения точности определения посравнению с известным способом.Формула изобретенияСпособ определения активности антибиотиков и антисептиков методом дий"Фузии в агар, включающий инкубированиеисследуемых препаратов в присутствиитест культуры микроорганизма с использованием агаровой среды с последующим учетом результатов по наличиюи размерам зон угнетения роста тесткультуры, о т л и ц а ю щ и й с ятем, цто, с целью усксрения способа,в кацестве тест-культуры используютшгамм термоФильных бактерий Вас. 11 иясне:".щопоп 1 з.ццеГас лепя ЦМПМ 1" В,а инкубирование проводят при 60"65 ОС.