Способ диагностики кардиосклероза

СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИХРЕСПУБЛИК А 1 ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ ДЕТЕЛЬСТ К АВТОРСКОМ хи кс Сапрыгим-заде СачЖоч а вс1-554. г ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССРпО делАм изОБРетений и ОтнРытий(54) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ КАРДИОСКПЕРОЗА (57) С целью повышения точности и ускорения способа ткань миокарда взвешивают, измельчают и помещают в гомогенизаторДобавляют 20-кратный объем среды выделения: 0,1 М фосфатный буфер, рН 7,3, с 0,1 Ж тритона Х. Гомогенизируют при 0 С 2,5 мин при 900 об/ мин. Иэ гомогената отбирают аликвоту.для определения креатина (100 мкл). Гомогенат центрифугируют при 4 С 20 мин при 10000 . При необходимости гомогенат перед измерением разводят 0,05 М трис-НС 1, рН 7,3, с 0,5 Х бычьим сывороточным аль- ф бумином до 500- н 2000-кратного разведения по отношению к массе ткани. Строят калибровочную кривую и при С снижении уровня креатина относительно нормы диагностируют кардиосклероз.1 12853Изобретение относится к медицине,точнее к кардиологии.Цель изобретения - повышение точности и ускорение способа за счетопределения креатина в биоптате миокарда,Способ осуществляют следующим образом.Ткань миокарда взвешивают, измельчают ножницами и помещают в гомогени Озатор "тефлон-стекло", Добавляют 20"кратный объем среды выделения: 0,1 Мфосфатный буфер рН 7,3 с 0,17 тритоона Х, Гомогенизируют при 0 С2,5 мин при 900 об/мин. Из гомогената отбирают аликвоту для определениякреатина 100 мкл. Гомогенат центрифугируют при 4 С 20 мин при 10000 я,При необходимости гомогенат перед измерением разводят 0,05 М трис-НС 1рН 7,3 с 0,5 Х бычьим сывороточнымальбумином до 500- и 2000-кратногоразведения по отношению к весу ткани,П р и м е р 1, При операции наоткрытом сердце у больного А, взяты25биоптаты из шести участков миокарда,Биоптаты больного А. измельчают ножницами и помещают в гомогенизатор"тефлон - стекло". Добавляют 20-кратный объем среды выделения: 0,1 Мфосфатный буфер рН 7,3 с 0,17 тритона Х. Гомогениэируют при 0 С2,5 мин при 900 об/мин, затем 1 ентрифугируют при 4 С 20 мин при 10000 я.Из гомогената отбирают аликвоту для 35определения креатина 100 мкл. Принеобходимости гомогенаты перед измерением разводят 0,5 М трис"НС 1 буфером рН 7,3 с 0,57 бычьего сывороточ"ного альбумина до 500- и 2000-кратного разведения по .отношению к весуткани . 100 мкл исходного гомогенатадепротеинизируют добавлением 100 мкл123 трихлоруксусной кислоты, Через30, мин гомогенат центрифугируют 10 мин 45при 3000 я. Дпя построения калибровочной кривой используют растворыкреатина в концентрации 0; 2,5; 5; 10и 20 мкГ/мл. Измерение концентрациикреатина в депротеиииэированных образцах производят по известной методике. Полученные реэ ультатц, выраженные в мкГ/мя, пересчитывают в мг/гткани умножением на 60, Измеренное содержание креатина в миокарде больного А, равно 1,45+0,06 мг/г. Диагноз: кардиосклероз.П р и м е р 2, 11 ри операции на открытом сердце у больного Н. взяты биоптаты иэ семи участков миокарда, Гомогенизацию биоптатов и определение содержания креатина в них производят согласно примеру 1. Измеренное содержание креатина в миокарде боль" ного Н, равно 1,73+0,07 мг/г. Диагноз: кардиосклероз.П р и м е р 3. Во время операциис использованием искусственного кровообращения и кардиоплегии у больного Д. взяты биоптаты из пяти участковмиокарда, Гомогенизацию биоптатов и определение содержания креатина в них производят согласно примеру 1.Измеренное содержание креатина в миокарде больного Д. равно 2,11+ +0,3 мг/г, Диагноз: кардиосклероз.100 мкл.исходного гомогената депротеиниэируют добавлением 100 мкл 123 трихлоруксусной кислоты. Через 30 мин гомогенат центрифугируют 10 мин при 3000 я, Дпя построения калибровочной кривой используют растворы креатина в концентрации 0;2,5; 5 10 и 20 мкг/мп. Измеренйе концентрации креатина производят в депротеинизированных образцах. Полу" ченные результаты, выраженные в мкГ/мп, пересчитывают в мг/г ткани, умножением на 60.формула и э о б р е т е н и яСпособ диагностики кардиосклероза, включающий взятие биоптата миокарда и определение в пробе концентрации азотсодержащего компонента, отличающийся тем, что, с целью повышения точности и ускорения способаопределяют уровень креатина и при снижении этого показателя относительно нормы диагностируют кардиосклероз.