Состав для определения циклического аденозин-3, 5 монофосфата
Похожие патенты | МПК / Метки | Текст | Заявка | Код ссылки
Текст
,010-0, 01стальное ГОСУДАРСТ 8 ЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИ ОПИСАНИ.(54)(57) СОСТАВ ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЦИКЛИЧЕСКОГО АДБНОЗИН - 3 ,5-МОНОФОСФАТА, содержащий буфер, ингириторэфосфодиэстеразы, 8 . - Н-циклический аденоэин,5 -монофосфат и цикличесlкую аденоэин,5 -монофосфатэавиф,. симую протеинкиназу, оэ т л и ча ю - щ и й с я тем, что, с целью повышения точности определения, в качестве ингибитора фосфодиэстеразы исполь эуют теофиллин,а в качестве буфера - 0,02-0,05 М цитратный буфер рН 4,4- 4,8 при следующем соотношении компо. нентов, мас.Е:0,02-0,05 М цитратный буфер рН4,4-4,8 0,42-1,05 Теофиллин 0,10-1, 39 8-Н"Циклическийаденозин,5монофосфат-7 1, 2 х 10 Составитель Е.ЖитниконаТехред Л.Олейник Корректор М.Демчик Редактор А.Шишкина Тираж 778 ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета СССРпо делам изобретений и открытий113035, Москва, Ж, Раушская набд.4/5 Заказ 2123/4 1 Производственно-полиграфическое предприятиег. Ужгород, ул.Проектная 4 Изобретение относится к молекулярной биологии и медицинской биохимии, в частности к способам анализа биологически активных соединений, регулирующих ответ клеток на внешнее ноэдействие на уровне фосфорилирования белков цитоплазмы и генетического аппарата, и может быть яспользовано для определения содержания циклического аденозин, 5 -монофосфата (цАМФ) в клетках и в тканях организма, а также в биопсийном материале, сыворотке, форменных элементах крови, ликворе и моче животных и человека.Определение уровня цАМФ имеет диагностическое значение при болезнях эндокринной, сердечно-сосудистой, нервной систем, при аллергических, инфекционных заболеваниях и злокачественных новообразованиях.Цельизобретения - повышение точности определения. Способ при использовании предлагаемого состава осуществляют следующим образом.В серию пробирок вносят 100 мкл состава, содержащего мас,7.;0,02-0,05 М цитратный буфер рН4,4-4,8Теофиллин8- Н цАМФ цАМФ-зависимаяпротеинкиназа 0 010-0,015Вода ОстальноеВ часть пробирок нносят 50 мкл анализируемого образца. Содержимое всех пробирок перемешивают и инкубируют в течение 2 ч при 2-4 С.После проведения реакции для осаждения нуклеотид-белкового комплекса во все пробирки добавляют по 500 мкл насыщенного раствора сульфата аммония, охлажденного до 2 С, тщательно перемешивают и через 10-15 мин центо рифугируют в течение 10 мин при 4 С. Осадок растворяют в 500 мкл воды. Иэ каждой пробирки отбирают по 400 мкл раствора для измерения радиоактивности нуклеотид-белконого комплекса.Среднее значение радиоактивности н контрольных пробах беэ анализируемого образца (пробы 1-2) принимают за фоновую величину, которую вычитают из величины радиоактивности всех остальных проб. Среднее значение радиоактивности проб 3-4 обозначают как С 0 - это количество 8- Н ЦАМФ,3 связанное в отсутствии намеченного цАМФ. Значение радиоактивности в пробах 5-14 обозначаюткак С, Рассчитывают отношение С/С для каждой пробы. Строят калибровочную кривую, представляющую зависймость С /Сх от количества цАМФ в анализируемых пробах,по ней находят количество цАМФ в анализируемых пробах.
СмотретьЗаявка
3545404, 10.12.1982
ЛГУ ИМ. А. А. ЖДАНОВА
ВАСИЛЬЕВ ВАЛЕРИЙ ЮРЬЕВИЧ, ЛАЗЕБНИК ЮРИЙ АЛЕКСАНДРОВИЧ, МИЩЕНКО ВЛАДИМИР АНДРЕЕВИЧ, СЕВЕРИН ЕВГЕНИЙ СЕРГЕЕВИЧ, МИШИН ВЯЧЕСЛАВ ИВАНОВИЧ
МПК / Метки
МПК: G01N 33/48
Метки: аденозин-3, монофосфата, состав, циклического
Опубликовано: 23.04.1986
Код ссылки
<a href="https://patents.su/2-1226311-sostav-dlya-opredeleniya-ciklicheskogo-adenozin-3-5-monofosfata.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">Состав для определения циклического аденозин-3, 5 монофосфата</a>
Штамм бактерий jersinia реsтis продуцент цамф связываюшего белка
Номер патента: 1668386
Опубликовано: 07.08.1991
МПК: C12N 1/21
Метки: jersinia, бактерий, белка, продуцент, реsтis, связываюшего, цамф, штамм
...белка в надосадочной жидкости, вносимой в пробу для определения цАМФ, составляет40 - 60 мкг.При определении цАМФ инкубацию образцов проводят на ледяной бане в течение 2 ч. Отделение белок-связанного цАМФ от несвязанного нуклеотида осуществляют адсорбцией свободного нуклеотида на угле марки "НоритА", для чего в каждую пробу добавляют 100 мкл угольной суспензии (2,60 раствор угля, 2 раствор БСА в буфе ре "А") с последующим центрифугированием при 10000 9 в течение 1 мин, Равные количества суспернатанта (200 миа)иэ аликвот помещают во флаконы и просчитывают на жидкостном сцинтилляционном счетчи ке, С помощью "слепой" пробы определяютуровень неспецифически сорбирующейся радиоактивности. Этот фон вычитают из значения радиоактивности в каждой...
Лабораторное устройство для дробления и просеивания радиоактивных почвенных проб
Номер патента: 1186253
Опубликовано: 23.10.1985
Авторы: Павлов, Шкрибтиенко
МПК: B02C 19/12
Метки: дробления, лабораторное, почвенных, проб, просеивания, радиоактивных
...д, 4/ илиал ППП "Патент жгород, ул. Прое Изобретение относится к лаборатооным устройствамобеспечивающим иэмельчение радиоактивных почв до заданного гранулометрического состава,Цель изобретения - сохранение чистоты окружающей среды и повышение эффективности процесса дробления.На фиг, 1 показана кинематическая схема устройства, на фиг. 2 - один корпус устройства; разрез. Лабораторное устройство содержит корпуса 1, каждый из которых разделен решеткой 2 на раэмольную камеру 3 с прозрачной крьппкой 4, например иэ оргстекла, герметично прижатой к камере 3 винтами 5 и приемную камеру б, герметично состыкованную с размольной камерой 3 при помощи пружин 8 и пластин 9 )иксируемую упорами 10, Раэмольная камера 3 загружена мелющими телами 7....
Способ получения -интерферона лошади
Номер патента: 1701114
Опубликовано: 23.12.1991
Авторы: Адольф, Петер, Рудольф
МПК: C12N 15/23
Метки: интерферона, лошади
...гена в плазмиду рйН,10 мкг плазмиды рВНрасщепляют рестриктазой Зас 1 в 100 мкл реакционного буфера и этим инактивируют путем 10-минутного нагрева до 70 С. ДНК обрабатывают фрагментом Кленова при 25 С в течение 30 мин в присутствии всех четырех дезоксинуклеотидтрифосфатов, каждый из которых берут в количестве 10 мкМ, Реакцию прекращают зкстракцией смесью фенола с хлороформом, ДНК концентрируют осаждением этанолом, В результате этой обработки за триптофановым промотором образуется ту50 55 пой конец ДНК, который заканчивается трансляционным стартовым кодоном АТО, Линеаризированную плазмидную ДНК расщепляют рестриктазой ВащН 1 и векторную часть выделяют электрофорезом в агарозном геле.50 нг подготовленного таким образом плазмидного вектора...
Способ экспрессии цепей химерного антитела
Номер патента: 1780541
Опубликовано: 07.12.1992
Авторы: Барбара, Лайза, Роберт, Томас
МПК: C12N 15/13
Метки: антитела, химерного, цепей, экспрессии
...ОАСАТСАТЛЬ и и и и и и и и и и и и и и и и и и и и и и и и и СЛСТТССССС ТСАССОСАЛС СССТАТТАСА АЬЬЬЬССЯСО СТСТАСТЬТТ220 ггЬгго 240 220СОСТТССССС АААТАТТСТС ЬАЬТСАССТО ТТСАСААТТЬ АТСЛТССЬЛС пинии пинии пинии пинии пинии СССАЬССССС ТТТАТАДСАС ТТТАСТССАС ААСТСТТААТ ТАСТЛССТТС200 г 1 0 2 2 0 2 2 гТАСТТААСТА СТАСССААСТ ТСТССТАЛ БЬ ЬСССТЬТ пинии пинии иии 2 иииЯТСААТТСАТ СЛТСССТТСА ЯСЬССЛТТТТ ТСССЛТАСС"5 15Таким образом, для построения плазмиды РВС около 2 мкг плазмиды рКС 7 в 10 мклбуфера ТЕ прибавляют к 2 мкл 10 Х буфераС 1 а 1(0,5 М МаС 1, 60 мМ трис-НС 1, рН 7,9, 60мМ МдС 12 и 1 мг/мл БСА) и 6 мкл воды, 20Около 3 мкл (около 10 единиц) рестрикционного фермента С 1 а 1 прибавляют к растворуДНК плазмиды рКС 7, полученную реакционную...
Способ получения лейкоцитарных интерферонов человека
Номер патента: 1414319
Опубликовано: 30.07.1988
МПК: C12N 15/00
Метки: интерферонов, лейкоцитарных, человека
...5,5 г борной кислоты,0,09 г Ма - ЭДАТУК в 1 л воды), Вод.4 Б ный раствор собирают из диализатор.ного бачка, экстрагируют фенолом,экстрагируют хлороформом, делают0,2 М раствор хлористого натрия иизвлекают ДНК в воце после осаждения этанолом, содержащий ген игрпромотор-оператор с липкими концамиЕсо ЕЕ идентифицируют по указаннойниже процедуре, которая вызь,ваетвставление Фрагментов в чувствительную к тетрациклину плазмиду, которая ЗВпри вставлении промотор-операторастановится устойчивой к тетрациклину.Плазмида рВРНЕ экспрессирует ампициллиновую устойчивость и содермощью ПАГЭ н нзолнру,от после электроэлюирования, Этот ДНК-фрагмент изрН Б 32 (0,2 мкг;) связывают в условиях, подобных указанным выше, с ЕсоК 1-Тар 1-фрагментом триптофанавого...
Предыдущий патент: Способ определения смазочной способности смазочных материалов и устройство для его осуществления
Следующий патент: Способ определения хлорофиллида в растениях с повышенным содержанием органических кислот
Случайный патент: Способ сборки конструкции типа фильтр-пресса или электролизера фильтр-прессного типа