Состав для определения циклического аденозин-3, 5 монофосфата
Похожие патенты | МПК / Метки | Текст | Заявка | Код ссылки
Текст
,010-0, 01стальное ГОСУДАРСТ 8 ЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИ ОПИСАНИ.(54)(57) СОСТАВ ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЦИКЛИЧЕСКОГО АДБНОЗИН - 3 ,5-МОНОФОСФАТА, содержащий буфер, ингириторэфосфодиэстеразы, 8 . - Н-циклический аденоэин,5 -монофосфат и цикличесlкую аденоэин,5 -монофосфатэавиф,. симую протеинкиназу, оэ т л и ча ю - щ и й с я тем, что, с целью повышения точности определения, в качестве ингибитора фосфодиэстеразы исполь эуют теофиллин,а в качестве буфера - 0,02-0,05 М цитратный буфер рН 4,4- 4,8 при следующем соотношении компо. нентов, мас.Е:0,02-0,05 М цитратный буфер рН4,4-4,8 0,42-1,05 Теофиллин 0,10-1, 39 8-Н"Циклическийаденозин,5монофосфат-7 1, 2 х 10 Составитель Е.ЖитниконаТехред Л.Олейник Корректор М.Демчик Редактор А.Шишкина Тираж 778 ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета СССРпо делам изобретений и открытий113035, Москва, Ж, Раушская набд.4/5 Заказ 2123/4 1 Производственно-полиграфическое предприятиег. Ужгород, ул.Проектная 4 Изобретение относится к молекулярной биологии и медицинской биохимии, в частности к способам анализа биологически активных соединений, регулирующих ответ клеток на внешнее ноэдействие на уровне фосфорилирования белков цитоплазмы и генетического аппарата, и может быть яспользовано для определения содержания циклического аденозин, 5 -монофосфата (цАМФ) в клетках и в тканях организма, а также в биопсийном материале, сыворотке, форменных элементах крови, ликворе и моче животных и человека.Определение уровня цАМФ имеет диагностическое значение при болезнях эндокринной, сердечно-сосудистой, нервной систем, при аллергических, инфекционных заболеваниях и злокачественных новообразованиях.Цельизобретения - повышение точности определения. Способ при использовании предлагаемого состава осуществляют следующим образом.В серию пробирок вносят 100 мкл состава, содержащего мас,7.;0,02-0,05 М цитратный буфер рН4,4-4,8Теофиллин8- Н цАМФ цАМФ-зависимаяпротеинкиназа 0 010-0,015Вода ОстальноеВ часть пробирок нносят 50 мкл анализируемого образца. Содержимое всех пробирок перемешивают и инкубируют в течение 2 ч при 2-4 С.После проведения реакции для осаждения нуклеотид-белкового комплекса во все пробирки добавляют по 500 мкл насыщенного раствора сульфата аммония, охлажденного до 2 С, тщательно перемешивают и через 10-15 мин центо рифугируют в течение 10 мин при 4 С. Осадок растворяют в 500 мкл воды. Иэ каждой пробирки отбирают по 400 мкл раствора для измерения радиоактивности нуклеотид-белконого комплекса.Среднее значение радиоактивности н контрольных пробах беэ анализируемого образца (пробы 1-2) принимают за фоновую величину, которую вычитают из величины радиоактивности всех остальных проб. Среднее значение радиоактивности проб 3-4 обозначают как С 0 - это количество 8- Н ЦАМФ,3 связанное в отсутствии намеченного цАМФ. Значение радиоактивности в пробах 5-14 обозначаюткак С, Рассчитывают отношение С/С для каждой пробы. Строят калибровочную кривую, представляющую зависймость С /Сх от количества цАМФ в анализируемых пробах,по ней находят количество цАМФ в анализируемых пробах.
СмотретьЗаявка
3545404, 10.12.1982
ЛГУ ИМ. А. А. ЖДАНОВА
ВАСИЛЬЕВ ВАЛЕРИЙ ЮРЬЕВИЧ, ЛАЗЕБНИК ЮРИЙ АЛЕКСАНДРОВИЧ, МИЩЕНКО ВЛАДИМИР АНДРЕЕВИЧ, СЕВЕРИН ЕВГЕНИЙ СЕРГЕЕВИЧ, МИШИН ВЯЧЕСЛАВ ИВАНОВИЧ
МПК / Метки
МПК: G01N 33/48
Метки: аденозин-3, монофосфата, состав, циклического
Опубликовано: 23.04.1986
Код ссылки
<a href="https://patents.su/2-1226311-sostav-dlya-opredeleniya-ciklicheskogo-adenozin-3-5-monofosfata.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">Состав для определения циклического аденозин-3, 5 монофосфата</a>
Предыдущий патент: Способ определения смазочной способности смазочных материалов и устройство для его осуществления
Следующий патент: Способ определения хлорофиллида в растениях с повышенным содержанием органических кислот
Случайный патент: Функциональный преобразователь