Способ определения активности оксидазы -аминокислот

Номер патента: 1217879

Авторы: Березов, Лукашева, Смирнова, Хадуев

ZIP архив

Текст

СОЮЗ СОВЕТСКИХСЭИЛаювнипРЕСПУБЛИК ЯО 121-7879 - - А)4 РЕТЕНИ САНИЕ И Т КТИВ- путем о тли ью сокращ активност и рН 7,5, пероксида е ления дят п трата ианид ни опр ю п ве суб ферро ияе ГОСУДМфСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИ Н АВТОРСНОМУ СВИДЕ 7 В 1(54)(57) НОСТИ ОК инкубаци кащей ф пероксид с послед плотност тем, что СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ИДАЗЫ, -АИИНОКИСЛ Фермента в среде сфатный буфер, Ь- зу и субстрат пер ющим измерением о содерлизин, оксидазы птической щ и й с я ения времен, инкубаа в качезы использу12 Составитель Н.ГуляеваРедактор Т.Парфенова Техред С.Мигунова Корректор Т.Колб Заказ 1083/31 Тираж 490 ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва,Ж, Раушская наб д. 4/5Филиал ППП "Патент", г.Ужгород, ул.Проектная, 4 Изобретение относится к биохимии, а именно к биохимическим способам определения активности ферментов, в частности оксидазы-Ь-аминокислот.Цель изобретения, - сокращение времени определения активности.П р и м е р. Для определения ак" тивности взяли раствор фермента, выделенного из ТгсЬодегша зр., после частичной очистки фракционированным осаждением сульфатом аммония, и разбавили его в 100 раз. Определение ферментативной активности осуществляли в кювете спектрофотомет" ра. Жакционная смесь содержала, об.7:Натрий-фосфатный буфер0,1 М, рН 7,5 76 Ь-лизин 0,1 М 4 Пероксидаза 0,043 1 Ферроцианид калия 0,1 М 4 Раствор оксидазы-Ь-аминокислот 15 Реакцию нницируют добавлением раствора фермента.Смесь инкубировали при комнатной температуре 5 мин,после чего добав 17879ги- у три оруксусную кисл -ту до концентрации 37 Измеряли оптическую плотность раствора при .420 нм(П,р,=0,21), В кювету контроля вмес/3 то раствора Ь-лизина внесли буферный раствор. Через 5 мин оптическаяплотность в кювете контроля составляла П =0,022, Нашли разность оптических плотностей10 Р=Рра-Рр =0,21-0,022=0,188За единицу активности фермен"та, (Е) принято такое его количество,которое катализирует, образование1 мкМ перекиси водорода в минуту при.о15 25 С. Калибровочную кривую построили, принимая ойтическую плотностьокрашенного продукта - феррицианидакалия, равной 1040 М см " . 20 По калибровочной кривой определили, что концентрация фермейта в реакционной смеси составляет 0,038 Е/мл,Учитывая степень разбавления, вычислили, что ферментативная активность 25 раствора после осаждения сульфатомаммония и диализа составляет 0,0386,7100=25,5 Е/мл.

Смотреть

Заявка

3642649, 03.06.1983

УНИВЕРСИТЕТ ДРУЖБЫ НАРОДОВ ИМ. ПАТРИСА ЛУМУМБЫ

БЕРЕЗОВ ТЕМИРБОЛАТ ТЕМБОЛАТОВИЧ, ЛУКАШЕВА ЕЛЕНА ВАСИЛЬЕВНА, СМИРНОВА ИРИНА ПАВЛОВНА, ХАДУЕВ СУЛТАН ХАМИДОВИЧ

МПК / Метки

МПК: C12Q 1/02, G01N 33/48

Метки: активности, аминокислот, оксидазы

Опубликовано: 15.03.1986

Код ссылки

<a href="https://patents.su/2-1217879-sposob-opredeleniya-aktivnosti-oksidazy-aminokislot.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">Способ определения активности оксидазы -аминокислот</a>

Похожие патенты