Способ исследования реологических свойств эритроцитов

(51) Т СССРОТКРЫТИЙ ПИСАНИЕ ИЗОБРЕВТОРСНОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВ ЕНИ(21) (22) (46) (72) ощеюл.Ю.С.и А.Срден Тунян, С.Э.АкоЗограбянТрудового Крас венный медипов (71 тар ног 3) гзсЬ Н. 2 ззе 1- а., 1964,19 Ьагс 1р. 34(54) (57) ГИЧЕСКИХ определе гационно эритроци фотометр ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИ 10 ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ 3236713/2812.01. 8123.0785. БЭ,Е. Мхеян,Г.О. БакунцЕреванскийЗнамени гоский институт616.07(088.Быап 1 с К.2.,В 111. СПОСОБ ИССЛЕДОВАНИЯ РЕОЛО СВОЙСТВ ЭРИТРОЦИТОВ путем ия деформируемости и агреспособности обработанной тарной взвеси с последующим рованием, о т л и ч а ю -щ и й с я тем, что, с целью упр ния и ускорения способа, взвесь эритроцитов наносят на колонку, которую предварительно последовательно заполняют 0,24 М раствором сахарозы в 10 аМ трис-НС 1-буфере при рН 7,4 и смесью этого же рас вора сахарозы и 150(О М раствора хл ристого натрия в указанном трис-бу фере в соотношении 1:7, инкулируют колонку в течение 20+0,5 ч, затем сливают и фотометрируют верхнюю и нижнюю фракции колонки, определяют отношение первого значения к второ му и при значении этого параметра более 15,6 определяют патологичес,кое повышение способности эритроци тов к агрегации и понижение деформируемости.11682 мозгап=55 95,4+15, 1 миокарда 89,1+9,8 п=39Здоровые доноры 45 мл За - отношение искоцитов к эрироцитам с измеенной формой сфероциты,эхиоциты,сфероэхиоциты ). е р и меча Изобретение относится к медицине,а именно к способу оценки реологических свойств эритроцитов - их деформируемости и способности к агрегации, 5Цель изобретения - упрощение иускорение способа.Способ осуществляют следующимобразом.Кровь забирают из локтевой вены10в количестве 3-4 мл, стабилизируют3,8%-ным цитратом натрия в соотношении 9:1. Полученную пробу центриФугируют 10 мин при 1000 об/мин.Осадок эритроцитов трижды отмываютв изотоническом трис-НС 1-буфере(рН 7,4). Для опыта используют 1 млплотноотцентрифугированных эритроцитов.Разделение эритроцитов производят 20в градиенте плотности сахарозы. Вколонку длиной 45 см и диаметром1,6 см наливают 10 мл 0,24 рМ раствора сахарозы на 10 ъ М трис-НС 1 в буФере (рН 7,4). Сверху, по стенке,осторожно наслаивают 60 мл смеси из0,243 М раствора сахарозы и 150 Мраствора ИаС 1 на 10 М трис-НС 1-буФере (рН 7,4) в соотношении 1;7. Полученный ранее 1 мл эритроцитов ос- З 0торожно наслаивают на поверхностьжидкости в колонке, причем распределение эритроцитов должно быть равномерным. Следует помнить, что эритроциты должны быть свежими. Допустимоохранение эритроцитов при 4 С не более 30 мин,Заполненную колонку, избегаявстряхивания, помещают в холоцильник при 4 С на 20 ч. Необходимо стро го следить за температурным режимом - допустимы колебания темпераотуры не более + 1 С. По истечениивремеви инкубации отбирают две фракции эритроцитов следующим образом.Первые 10 мл сливают. Следующие 5собирают в пробирку (фракция 1).тем сливают следующие 50 мл и собирают оставшиеся 5 мл (фракция 2).Из обеих фракций берут факто 1 мл 50взвеси, добавляют 4 мл 10 П 1 М трисНС 1-буфера (рН 7,4). Пробы инкубируют 30 мин при комнатной температуре, насыщают гемолизат кислородомвоздуха и фотометрируют на ФЭК55при красном светофильтре,Из полученных данных рассчитывают величину й =0 /О 100%, где 0 и Р 03 2величины оптической плотности гемолизата из 1- и 2-й фракций соответственно. В таблице показаны структурно-функциональные параметры эритроцитов 1-й (нижней) и 2-й (верхней) фракций.Величина Ь характеризует деформируемость и способность к агрегации эритроцитов, так как в верхнем слое колонки собираются эритроциты с измененной формой (эхиноциты), плохо деформирующиеся и с повышенной ена:. собностью к агрегации, а в 1-й фракции сосредоточены дискоциты, хорошо деформирующиеся и с нормальной агрегирующей способностью,Величина параметрау больных с патологией мозгового и коронарного кровообращения, %:Вольные с инфарктом п=28 26,4+10,8У больных с ишемическим инсультом и инфарктом миокарда, у которых неоднократно показано повышение способности эритроцитов к агрегации и понижение их деформируемости, параметр Ь достоверно выше, чем у здоровых.Изобретение обеспечивает упроще ние и ускорение способа, его доступность для любой клинической лаборатории, пригодность для проведения массовых обследований как в стационаре, так и в амбулаторных условиях. Кроме того, способ может быть использован для контроля за эффективостью лечения. 1 0,1270,04 22,16,4 68 ф 7,12 83 0 9 59 9+73 395+4 2