Способ определения моноаминооксидазной активности тромбоцитов
Похожие патенты | МПК / Метки | Текст | Заявка | Код ссылки
Номер патента: 1146605
Авторы: Волошина, Горкин, Москвитина
Текст
.с ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТ лошина ой и медиче 1 еу;МАО асге, а ге34,ОПРЕДЕЛЕНИЯ МОТИВНОСТИ ТРОМБОЦсолюбилизата меиламином в качеи ч а ю щ и йю повышения точ(54) ( НООКС путем тромб субст тем,7) СПОСОБИДАЗНОЙ АК инкубации цитов бената, о т лто, с цел ОАМИИТОВ мбра стве носГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССРПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ СКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТ(71)Институт биологичесцинской химии АМН СССР(53) 616.07(088.8) (56) 1. М.Бапд 1 ег, Т.А,К Ч.С 1 очег. Нишап р 1 аге 1 ег ч 1 йу дп Ьеа 1 гЬ апд д 1 зеа чоп.-1.С 11 п, Раго 1, 198 р. 292-302. ти способа путем определения мнохест.венных форм моноаминооксидазы, солюбилизат мембран наносят. на колонну,заполненную в-аминогексил сефарозой-4 В, далее элюируют белковую фракцию0,1 М фосфатным буфером при рН 7,4,в полученном .элюате определяют с помощью субстрата форму моиоаминооксидазы активностью 0,0210,01 нмоль/мгбелка в минуту, далее элюируют темже фосфатным буфером с добавлениемритона Хв градиенте концентраций 0,001-0,253, в полученном элюатеопределяют форму моноаминооксидазыактивностью 1,9+0,2, нмоль/мг белка.в минуту, далее элюируют 0,4 М фосфатным буфером при рН 7,4 с добавлением 0,257.-ного тритона Х, в полученном элюате определяют форму моноаминооксидазы активностью 1 7Ю,2 нмоль/мг белка в минуту.Составитель С.КотеневцевРедактор Т,Кугрышева Техред М.Кузьма Корректор Е,Рошко Заказ 1357/34 Тираж 897 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, 3-35, Раушская наб., д. 4/5Филиал ППП "Патент", г.ужгород, ул,Проектная, 411466гИзобретение относится к области биохимии, биотехнологии имедицины,а именно .к способам определения активности фермента в организме, конкретно к способам определения моноаминооксидаэной (МАО) активности, и может быть использовано в медицинской и лабораторной практике, а также в научных целях.Целью изобретения является повы О шение точности способа путем опреде.ления.множественных форм моноамино-.оксидазы. Пример осуществления способа.500 мл донорской крови, содержащей 0,387 цитрата натрия, центрифугируют при 200 С в течение 10 мин. Осадок эритроцитов промывают 0,15 М НаС 1 два раза и отделяют центриф 3 гирова нием, Объединенные надосадочные жидкости центрифугируют в тех же условиях, отбрасывая осадок, надосадочную ,жидкость центрифугируют 20 мин при 650 я. Тромбоциты суспензируют в д 0,01 М К - На фосфатном буфере при 05 3рН 7,4, Смесь тромбоцитов центрифугируют 10 мин при 30 тыс.я, надосадочную жидкость отбрасывают, а осадок гомогенизируют в стеклянном гомогени заторе в солюбилиэирующей смеси,состоящей из 1,3 М мочевины, 1,33 тритона Хв 0,01 М фосфатном буфере при рН 7,4. Через 30 мин смесь центрифугируют 30 мин при 30 тыс.я, обессоливают на колонке с Сефадексом Г(23 1,2 см) и концентрируют .на ультрафильтре Амикон РМв 7 раз. Раствор наносят на колонку с афинным сорбентом АН-Сефарозой 4 В (13 1,2 см), промывают 0,01 М фосфатным буфером при рН 7,4; множественные формы МАО элюируют фосфатным буфером различной концентрации и градиентом концентрации тритона Х. Определяя белок и активность моноаминооксидазы (например, с бензиламином в качестве субстрата) в пробах, получают профиль элюции, характеризующий содержание (изоферментный состав) и величину активности трех множественных форм моноаминооксидазы.
СмотретьЗаявка
3593276, 04.04.1983
ИНСТИТУТ БИОЛОГИЧЕСКОЙ И МЕДИЦИНСКОЙ ХИМИИ АМН СССР
МОСКВИТИНА ТАТЬЯНА АЛЕКСАНДРОВНА, ВОЛОШИНА ОЛЬГА НИКОЛАЕВНА, ГОРКИН ВЛАДИМИР ЗИНОВЬЕВИЧ
МПК / Метки
МПК: G01N 33/48
Метки: активности, моноаминооксидазной, тромбоцитов
Опубликовано: 23.03.1985
Код ссылки
<a href="https://patents.su/2-1146605-sposob-opredeleniya-monoaminooksidaznojj-aktivnosti-trombocitov.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">Способ определения моноаминооксидазной активности тромбоцитов</a>
Предыдущий патент: Устройство для определения электрофоретической подвижности фракций белка
Следующий патент: Устройство для измерения группового времени запаздывания тракта промежуточной частоты понижающих преобразователей частоты свч диапазона
Случайный патент: 410941