Способ восстановления серологически атипичных штаммов микроорганизмов в -форму

(51) С 12 Н СУДАРСТВЕННЫЙ, НОМИТЕТ ССС ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТЮПИ САНИ БРЕТ ТОРСК свидвсвъс Т(71) Днепропетровсо производству ба В 3и В.С.Сотниковое предприятиетерийных препара(088.8)ИЬа 11 оп ЭАсас 1 еппса 1 Ргосее ь.епсе",птов(54) (57) СПОСОБ ВОССТАНОВЛЕНИЯ СЕРОЛОГИЧЕСКИ АТИПИЧНЦХ ШТАММОВ МИКРООРГАНИЗМОВ В 5-ФОРМУ путем выращивания микроорганизмов в питательномбульоне, о т л и ч а ю щ и й с я темчто, с целью ускорения способа, микроорганизмы выращивают в питательномбульоне в присутствии 0,2-0,4 Х-нойдрожжевой РНК в течение 16-20 ч.Составитель Г,СмирноваРедактор Н,Егорова Техред А.Бабинец Корректор М.Леонтюк Заказ 10245/16 Тираж 525 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул, Проектная, 4 1 11357Изобретение относится к микробиологии и может найти применение впроизводстве бактерийных препаратов.Известен способ восстановлениясерологически атипичных штаммов бруцелл в 5 -форму путем выращивания всреде в присутствии смеси ДНК-ДНКазы,подавляющей размножение В-клетокИзвестен также способ восстановления серологически атипичных штаммов микроорганизмов в 5 -форму пу"тем выращивания микроорганизмов впитательном бульоне методом пассажей 2 .Однако известный способ длителен,а первый способ по эффективностивосстановления не имеет преимуществпо сравнению с методом пассажей и неэкономичен, так как требует использования двух препаратов. 20Целью изобретения является ускорение способа,Эта цель достигается тем, чтосогласно способу восстановлениясерологически атипичных штаммов микроорганизмов в 8 -форму путем выращивания микроорганизмов в питательном бульоне, выращивание микроорганизмов осуществляют в питательномбульоне в присутствии 0,2-0.,4 Е дрожжевой РНК в течение 16-20 ч.Способ предназначен для восстановления атиничнык штаммов микроорганизмов кишечной группы и синегнойной палочки.П р и м е р 1. Микробные штаммыкультивируют на питательной среде,которую готовят следующим образом:в стерильный питательный бульон(рН 7,6-7,7) вводят коммерческую40дрожжевую РНК в количестве 0,20,47, затем обогащенный бульон стерилизуют дробно текущим паром при100 С три дня подряд по 10 мин. Сре 0ду разливают в пробирки по 15 мл и 45под ватными пробками сохраняют при4-6 С в течение 2-3 мес.054 2Перед использованием пробирку с ,питательным бульоном подогревают до 37 С и бактериологической петлей вносят в бульон взвесь атипичной микробной культуры, помещают посевы в термостат при 37 С на 16-18 ч, В 927. случаев достаточно однократного выращивания в бульоне с РНК для восстановления атипичных культур в исходное состояние.Для сальмонелл и шигелл оптимальной концентрацией,РНК является 0,2- 0,37, а для энтеропатогенных коли- микроорганизмов и синегнойной палочки - 0,3-0,4 Е.П р и м е р 2. Для посева используют культуру Яа 1 шопе 11 а рагаурЬ В Ф 205 с атипичными свойствами - колонии на плотной среде мутные, шероховатые, с изъединенными краями, проба кипячения положительная, реакция агглютинации со специфическими и неспецифическими сыворотками, Микроорганизмы высевают в питательный бульон Хоттингера с 0,27 дрожжевой РНК, культивируют в течение 20 ч. Проверка культуры на плотной среде показывает, что колонии вырастают гладкие с ровными краями, проба кипячения отрицательная, реакция агглютинации положительная только со специфическими монорецепторными сыворотками. В Звстречаются колонии шероховатые. 1По известному способу методом пассажей этот эффект получен за 5 дней, Результаты восстановления стабильны,Использование предлагаемого способа позволяет восстановить атипичные штаммы в течение суток, что имеет большое значение при производстве бактерийных препаратов, экономить питательные среды, снизить себестоимость производства бактерийных препаратов.