Штамм вниигенетика-25-продуцент кислой протеиназы

(п) 443061 Союз Советских Социалистических Реслчбликисоединением заявкиГосударственный комитеСовета Министров СССРло делам изобретенийи открытий 2) Приоритетубликовано 15.09 53) УДК 577,15.0летень34 та опубликования описания 22.04.7 Л, И. Ерохина, И, М. Нестерова и С. П. Истошина есоюзный научно-исследовательский институт генети и селекции промышленных микроорганизмоврезультате -2 ультрасоттрофный дине и спотеиназу на ным штамступени селекции в ходного штамма 7лучами выделен ау нуждающийся в гист зировать кислую пр по сравнению с исхо ИИген ма А именен боты п аботки етикавыведен регр 11 цз асчатпоп ия генетико-селекри использовании мутагенными факНовыи штамм В из известного шт 78-2 в результате ционных методов двухступенчатой об торами,Изобретение относится к области млогии и микробиологическому синтезности к получению промышленных в микроорганизмов, к штамму - пр у у кислой протеиназы.Препараты кислой протеиназы (аваморина) с оптимумом действия рН 1,8 - 3,0 находят применение в пищевой промышленности для устранения белкового помутнения виноградных вин, для повышения стойкости пива, приготовления соусов, В животноводстве кислая протеиназа используется в комплексе с другими ферментами для повышения эффективности кормов. В медицине кислая протеиназа может применяться для замены пепсина.Известны штаммы плесневого гриба АзрегрИпз ачатпоп, продуцирующие кислую протеиназу,Предлагаемый штамм Азрега 111 пз аъатпоп ВНИИгенетика-мутант синтезирует в 3 - 3,5 раза больше кислой протеиназы в условиях глубинного выращивания и отличается рядом культурально-морфологичеаких особенностей. На первоиобработки ис 8фиолетовыми кмутант2и5 собный синте о40% больше дмом 78-2.На второй ступени селекции в результатеобработки биохимического мутанта2 гис 0 М-метил-К-нитро-М-нитрозогуанидином получен ревертантгис+, способный синтезировать кислую протеиназу в 3 - 3,5 раза больше по сравнению с исходным штаммом 78-2.Морфология. Мицелий состоит из коротких 5 искривленных разветвленных гифов с многочисленными поперечными перегородками, стенки клеток извилистые и зубчатые, форма клеток неправильная, часто уродливая.Клетки относительно короткие, утолщенные у 20 перегородок, содержат жировые включения ивакуоли, зернисты. Разор мицелия 3,2 - 8,4 К)(4,8 - 22,5 мм.Конидии круглые, диаметр 3,2 - 6,4 мк.Культурально-биохимические признаки.25 Сусло-агар. Посев уколом. При выращивании при 28 С в течение семи суток штамм образует круглые колонии диаметром 12 - 17 мм с плотным компактным воздушным мицелием. Поверхность колоний складчатая, бугри стая, серовато-темно-коричневого цвета. КраяЦНИИПИ Заказ 932,2 Изд. Мо 1165 Тираж 456 Подписное Типография, пр. Сапунова, 2 колоний более светлые, не 1 ровные. Мицелийврастает в агар. Обратная сторона колонийс вдавленным центром, складчатость выражена слабо. Среду не окрашивает.Синтетическая среда Ролен-Тома.При посеве уколом и выращивании при28 С в течение семи суток, Колонии такие же,как и на сусло-ага 1 ре, но среда окрашиваетсяв темно-бурый цвет,Синтетическая среда Чапека.При посеве уколом и выращивании в течение семи суток при 28 С колонии образуютсянеправильной формы, выпуклые, с возвышенным центром, серовато-зеленого цвета, краянеровные, врастающие в агар.Поверхность колоний морщинистая, чешуйчатая. Наибольшая длина колоний 7 - 10 мм.Среда ок 1 рашивается в зелено-бурый цвет.Ломтики картофеля.Посев штрихом. П 1 ри выращивании в течение семи суток при 28 С воздушный мицелийхорошо развит, пенообразный, темно-серый.Конидий образуется умвренное количество.Субстрат окрашивается в темно-зеленый цвет.Молоко.При засеве суспензией конидий растет наповерхности в виде пристеночного кольца.На двадцать первые сутки при 28 С молоко пептонизирует.Желати,на.При посеве уколом растет в виде пристеночного морщинистого кольца. Черездвадцать суток культивирования при 28 С половина столбика субстрата окрашивается втемно-бурый цвет, Желатину разжижает.При посеве спор на синтетическую среду снитратами и культивировании в течение 30 суток п 1 ри 28 С восстановления нитратов не наблкщается,.Для выращивания посевного материала используют сусловый агар (семь по Баллингу),а для ферментации жидкую среду, содержащую, /,: ржаную муку - 2,0; КНвР 04 - 0,5;Ре 04, Мд 504, 2 пЯО 4 по 0,002.Для засева ферментационной среды используют посевной материал в виде суспензии конидий двухнедельной культуры, выращеннойна косом сусло-агаре.Процесс ферментации проводят в колбахЭ 1 рленмейера на качалке с 200 - 220 об/минпри 28 С.Активность штамма ВНИИгенетиканасреде с ржаной мукой (в ед/мл культуральной жидкости по методу СЭВ) составляет1000 ед/мл к.ж. или 333,3/о.Предмет изобретенияШтамм Азрегр 11 цз атчашог 1 ВНИ 1 Лгенетика-продуцент кислой протеиназы. Морфология. Мицелий состоит из коротких искривленных разветвленных гифов с многочисленными поперечными перегородками. Стенки клеток извилистые и зубчатые, форма клеток неправильная, часто у 1 родливая, клетки относительно короткие, утолщенные у перегородок, содержат жировые включения и вакуоли, зернистые. Размер мицелия 3,2 - 8,4 К 4,8 - 22,5 мм. Конидии круглые, диаметр их 3,2 - 6,4 мк.Культурально-биохимические признаки. Сусло-агар. Посев уколом. При выращивании при 28 С в течение семи суток штамм об 1 разует круглые колонии диаметром 12 - 17 мм с плотным компактным воздушным мицелием. Поверхность колоний складчатая, бугристая, серовато-темно-коричневого цвета. Края колоний более светлые, неровные. Мицелий врастает в агар, Обратная сторона колоний с вдавленным центром, складчатость выражена слабо. Среду не Окрашивают. Синтетическая среда Ролен-Тома.При посеве уколом и выращивании при 28 С в течение семи суток колонии такие же, как и на сусло-агаре, но среда окрашивается в темно-бурый цвет.Синтетическая среда Чапека.При посеве уколом и выращивании в течение семи суток при 28 С колонии образуются неправильной формы, выпуклые, с возвышенным центром, серовато-зеленого цвета. Края неровные, врастающие в агар. Поверхность колоний морщинистая, чешуйчатая. Наибольшая длина колоний 7 - 10 мм, Среда окрашивается в зелено-бурый цвет. Ломтики ка 1 ртофеля. Посев штрихом. При выращивании в течение семи суток при 28 С воздушный мицелий хорошо развит, пенообразный, темно-серый. Конидий образуется умеренное количество. Субстрат окрашивается в темно-зеленый цвет.Молоко.При засеве суспензией конидий растет на поверхности в виде пристеночного кольца, На двадцать первые сутки при 28 С молоко пептонизирует.Желатина.При посеве уколом растет в виде пристеночного морщинистого кольца. Через двадцать суток культивирования при 28 С 1/2 столбика субстрата окрашивается в темно- бурый цвет. Желатину разжижает.При посеве суапензией спор на синтетическую среду с нитратами и культивировании в течение 30 суток при 28 С восстановления нигратов не наблюдается.