Способ определения нарушений липопротеидного обмена

СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИХРЕСПУБЛИК 09) (11) 61 В 10 00 ЕТЕЛЬСТ ГОСУДАРСТВЕННЫИ КОМИТЕТ СССРПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ ОПИСАНИ А ВТОРСКОМУ(54) (57) СПОСОБ РУШЕНИй ЛИП МЕНА путем вы высокой плотности что, с целью ускор следует в поляриз при наличии аниз ний определяют н ного обмена. ОПРЕДЕЛЕНИЯ НАОПРОТЕИДНОГО ОБ- деления липопротеидовотличающийся тем, ения способа, пробу исационном микроскопе и отропных микровключеарушения липопротеид1123644 1Изобретение относится к клинической биохимии и может быть использовано для определения липопротеидного обмена.Известен способ определения нарушения липидного обмена в организме путем измерения соотношения липидного и белкового компонента билологических мембран с помощью инфракрасной спектроскопии 11).Однако осуществление известного способа требует сложной аппаратуры,Наиболее близким к предлагаемому является способ фенотипирования дислипопротеидемий, состоящий из множества лабораторных методов 12.Известный способ осуществляют следующим образом.Натощак из вены забирают кровь, получают плазму центрифугированием в течение 30 мин при скорости 2000 об/мин, методом преципитации гепарином в присутствии хлористого марганца получают липопротеиды высокой плотности, в плазме крови определяют содержание холестерина методом Абеля и триглицериды методом Карлсона. В липопротеидах высокой плотности определяют содержание холестерина. Затем методом анализа определяют наличие или отсутствие дислипопротеидемий.Недостатками данного способа являются многочисленность методов исследования, их трудоемкость, необходимость использования дорогостоящего оборудования и длительность исследования, а также необходимость использования реактивов, вредно влияющих на организм,Цель изобретения - упрощение и ускорение способа,Поставленная цель достигается тем, что согласно способу определения нарушений липопротеидного обмена путем выделения липопротеидов высокой плотности, пробу исследуют в иоляризационном микроскопе и при наличии анизотропных микровключений определяют нарушения липопротеиодного обмена.Способ Ьсуществляют следующим образом,тИз локтевой вены утром, натощак, спустя 12 - 14 ч после последнего приема пищи, берут 1 мл крови, добавляют к ней антикоагулянт - динатриевую соль ЭДТА в концентрации 1 мг/мл и центрифугированием со скоростью 2000 об/мин в течение 30 мин полу чают плазму.Затем из плазмы получают липопротеиды высокой плотности методом предипитации: к 1 мл плазмы добавляют 0,04 мл раствора гепарина (5000 ЕД в 1 мл) и 0,05 мл 1 М хлористого марганца, затем после 30 мин стояния в ледяной бане 30 мин центрифугируют при скорости 5000 об/мин и температуре 4 С.После этого на чистое покровное стекло стекляной палочкой наносят каплю раствора липопротеидов высокой плотности и помешают на предметный столик поляризационного микроскопа,В случае нарушения липопротеидного обмена в капле раствора липопротеидов высокой плотности оптически видны анизотропные микровключения, представляющие собой фигуры типа мальтийских крестов.В случае отсутствия нарушения липопротеидного обмена анизотропные микро- включения отсутствуют.Аналогичная картина наблюдается в случае высушивания препаратов, что позволяет создавать архивы сухих липопротеидов высокой плотности. 15Пример 1. Пациент А., 40 лет, здоров.При исследовании предлагаемым способом обнаружены анизотропные включения, что свидетельствует о нарушении липопротеидного обмена.При обследовании известным способомфенотипирования дислипопротеидемий у пациента содержание холестерина в плазме 252 мго/о, триглицеридов - 102 мг %, холестерина липопротеидов высокой плотности 47 мг о/о, холестерина низкой плотности 185 мго/о.Эти показатели подтверждают нарушение ли поп ротеидного обмена по типу гиперлипопротеидемии. 30 Пример 2. Пациент В., 29 лет, здоров.Обследование предлагаемым способомне обнаружено анизотропных включений, что диагностирует отсутствие нарушения липопротеидного обмена.При обследовании известным способомфенотипирования дислипопротеидемий у пациента содержание холестеринна в плазме 157 мг о/О, триглицеридов 58 мг /о, холестерина дипопротеидов высокой плотности 44 мг /о. холестерина липопротеидов 40 низкой плотности 101 мг /о.Эти показатели подтверждают отсутствие у обследуемого пациента нарушения липопротеидного обмена.Предлагаемый способ диагностики нарушения липопротеидного обмена использован 45при профилактическом обследовании 125 пациентов.Результаты обследования подтвержденыизвести способом фанотипирования дислипопротеидемий.50 Применение предлагаемого способа позволяет в 2 раза быстрее выявлять у обследуемых нарушение липопротеидного обмена, что особенно ценно при проведении профилактических обследований больших групп населения.Предлагаемый способ прост, не требуетдорогостоящей аппаратуры, высококвалифицированных сотрудников и исключает использование вредных реактивов.