Способ определения этилортотолуидина в биологических жидкостях

СОЮЗ СОВЕТСНИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ лин заза 01 Н 3 К АВТОРСНО идительст 358188/28 б 11. 815. 11. 83. Бюл(71) Пеоли хни киститут: Химический анализ воздуха проленных предприятий. Л., фХим1970, с. 126-127.2. Быховская М,С., ГинзбуХалиЗова О.Д, Методы определвредных веществ в воздухе.игих .средах. М., Медгиэ, 1961с. 166-167,80105478(54) (57) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЭТИЛ-ОТОЛУИДИНА В БИОЛОГИЧЕСКИХ ЖИДКОСТЯХ путем добавления к исследуемой пробе. окрашивающего реагента с последующим фотометрированием полученного окрашенного продукта, о т л и ч а ю щ.и й с я тем, что, с з(елью повьвмния чувствительности способа, в качестве "окрашивающего реагента ;:используют аммонийную соль бис-(4- -диметиламинофейол -4 (1.ГР-сульФофенил-метилпиразолонил - карбинол, причем рН реакционной средй доводят до 4,5-5,0 добавлением раст вора серной кислоты, насъценного хлористым натрием. Фе1054786 Изобретение относится к медицинской токсикологии и может быть использовано, в частности, в санитарной токсикологии для количественного определения этил-о-толуидина..Известен способ ойределения ароматических аминов в воздухе, включающий реакцию азосочетания диазотированного амина в щелочной среде с. -нафтолом и фотометрирование образующегося при этом окрашенного продукта 13Известен способ определения в крови первичных аминов, включающий предварительную подготовку отобранногодля анализа материала, обработку 3- 15ным раствором фенола и гипохлоританатрия, фотометрирование полученногоокрашенного продукта 2,Рднако известный способ не обеспечивает высокую чувствительность опре деления этил-о-толуидина.,. Цель изобретения - повышение чувствительности способа.Поставленная цель достигается тем,что при осУшествлении способа определения этил-о-толуидина в биологических жидкостях путем добавления кисследуемой пробе окрашивающего реагента с последующим фотометрированием полученного окрашенного продукта в качестве окрашивающего реаген-.та. используют аммонийную соль бисат- (4-диметиламинофенол -4- (1- -сульфофенил"мЬтилпиразолон-ил)-карбинол,причем рН реакционной среды доводятдо 4,5-5,0 добавлением раствора серной кислоты, насыщенного хлористымнатрием.Способ осуществляют следующим образом.к 1 мп исследуемой пробы (после 40предварительной подготовки биологического материала.для анализа ) добавляют 1 мл 0,02-ного раствора красителя бис-(4-диметиламинофенол)-4-.(у- -сульфофенил-метилпиразолонф-.5-ил)-карбинол (Аминон ) и 1 мл10-ного раствора серной кислоты,насажденного хлористым натрием. Затемприбавляют 3 мл хлороформа и содержимое интенсивно встряхивают в течение 5 мин. Смеси дают отстоятьсядо полного расслоения хлороформаСлой хлороформа сливают в пробирку.Через 20"25 мин измеряют оптическуюплотность окрашенного раствора наспектрофотометре при длине волны475 нм,толщине поглбщающего слоя1 смеПри концентрациях Зтил-о-толуиДинав.диапазоне. 0,1 - 3,0 мг 7 Гнаблюдается линейная зависимость оптической плотности от концентрации этил-отолуидина. Минимальная концентрафиия. которую можно определять,0,1 мг/л.и р и м е р, Анализируют пробыкрови с содержанием этил-о-, толуидина 0,0, 0,2 р. 1,0, 2,0 мг/л. К 2 млисследуемой крови добавляют 1 мн10-ного раствора трихлоруксусной кислоты для осаждения белков.Полученный раствор центрифугируюти к 1 мл надосадочной жидкостидобавляют 1 мл 0,02-ного растворакрасителя Рющнон, 1 мл 10-ного раствора серной кислоты, насыщенногохлористым натрием, до создания оптимальной реакции среды в пределахрН 4,5-5,0, При других величинахрН наблюдается уменьшение чувствительности способа. Смесь тщательно перемешивают. Затем добавляют3 мл хлороформа и содержимое интенсивно встряхивают в течение .5 мин.Смеси дают отстояться до полногорасслоения хлороформа. Слой хлороформа сливают в пробирку. Через20 мин проводят измерение оптической плотности окрашенного растворана спектрофотометре при длине волны 475 нм и толщине поглощающегослоя 1 см, Результаты анализовпредставлены в таблице,Ошибкаопределе"ния,Заданная концентрация, мг/л Определяемая концентрация+1,5 2,03 Из таблицы видно, что собственные, амины биологического происхождения не влияют на определение этол-о-толу одина предложенным способом.Способ позволяетповысить Чувствительность определения этил-отолуидина в биологических жидкостях по. сравнению с известным в 10 раз ( 0,1 против 10 мг/л ). филиал ППП "Патентф, г.ужгород,ул.Проектная,4 ЭНИИПИ Заказ 9099/52 Тираж 873 Подписное