Способ получения иммуноглобулина м
Формула | Описание | Похожие патенты | МПК / Метки | Текст | Заявка | Код ссылки
Номер патента: 1732518
Автор: Зорин
Формула
Способ получения иммуноглобулина М путем обработки препарата крови, встряхивания, осаждения полиэтиленгликолем 6000, хроматографического выделения целевого продукта с последующим его диализом и лиофилизацией, отличающийся тем, что, с целью увеличения выхода и чистоты целевого продукта, целевой продукт выделяют хроматографией на 6%-ной цинковой форме иминодиуксусной агарозы и 6%-ной поперечно-сшитой агарозе.
Описание
Целью изобретения является повышение выхода целевого продукта и его чистота.
Способ осуществляют следующим образом.
Из иммуноглобулинсодержащих жидкостей экстрагируют липиды гексаном, осаждением полиэтиленгликолем (ПЭГ6000) при конечной концентрации 6% подвергают афинной хроматографии на колонке цинкового производного иминодиуксуснокислой агарозы и гель-хроматографии на колонке 6%-ной поперечно-сшитой агарозы с последующей лиофилизацией.
Препарат I М, очищенный вышеописанным способом, давал одну линию при электрофорезе в градиенте пор полиакриламидного геля. При электрофорезе в тех же условиях с додецилсульфатом натрия белок образовал две полосы с относительными мол. массами 65 кД и 20 кД, соответствующими мол, массам тяжелых и легких цепей I М. Молекулярная масса нативной молекулы белка составляла около 900 кД (гель-хроматография, электрофорез в градиенте пор полиакриламидного геля). Выход его составлял 0,6 г/л плазмы крови с чистотой 95%
П р и м е р 1. Плазму крови (200 мл) смешивали с 200 мл гексана. Смесь помещали на 1 ч на встряхиватель, а затем переносили в делительную воронку. После расслоения растворителя и плазмы крови последнюю отделяли. К ней добавляли 0,136 объема 50%-ного водного раствора ПЭГ-6000. Смесь встряхивали 45 мин при комнатной температуре. Осадок отделяли центрифугированием и растворяли в 20 мл 0,02М натрий-фосфатного буфера, рН 8,0, содержащего 1 моль хлористого натрия. Раствор наносили на колонку (2,5
20 см) 6%-ной иминодиуксуснокислой агарозы в цинковой форме, уравновешенную тем же буфером, со скоростью 200 мл/ч. Материал, вышедший в свободном объеме колонки, наносили на колонку (5х90 см) 6%-ной поперечносшитой агарозы в вышеуказанном буфере со скоростью 100 мл/ч. I М элюируется в первом пике. Очищенный продукт диализовали против 0,05M раствора бикарбоната аммония и лиофилизовали. Выход препарата составляет 0,4 г 1 л плазмы крови (27%) с чистотой 95%Полученные препараты использовали для иммунизации животных. В результате получены антисыворотки, содержащие до 1 мг/мл моноспецифических антител. Препарат, полученный по способу прототипа, не позволил достигнуть моноспецифичности антисывороток из-за наличия иммуногенных примесей.
Предложенный способ реализует следующие преимущества по сравнению с прототипом:
сокращается время получения целевого продукта на 48 ч;
степень чистоты и нативность препарата позволяют использовать его для получения моноспецифических антисывороток, не требующих адсорбции;
удаление липидов гексаном позволяет в 3-5 раз увеличить срок службы хроматографических колонок, при этом расходы на получение высокоочищенного препарата сокращаются на 50%
технология очистки позволяет перерабатывать значительные количества исходного сырья с получением свыше 0,5 г белка из 1 л нативной плазмы крови;
увеличивается выход целевого продукта на 7-12% с повышением его чистоты на 5%
Изобретение относится к биологической химии, а точнее к биотехнологии, и может бить использовано для получения иммуноглобулинов М. Цель изобретения - повышение выхода и чистоты целевого продукта. Препараты крови обрабатывают гексаном, осаждают 6%-ным раствором полиэтиленгликоля 6000, с последующей хроматографией с использованием 6%-ной иммунодиуксусной или надуксусной агарозе в цинковой форме и с помощью 6%-ной поперечно-сшитой агарозы. После чего целевой продукт подвергают лиофилизацин. По сравнению с прототипом увеличивается выход целевого продукта на 7-12%, а его чистота на 5%.
Заявка
4828616/14, 24.05.1990
Новокузнецкий институт усовершенствования врачей
Зорин Н. А
МПК / Метки
МПК: A61K 39/395
Метки: иммуноглобулина
Опубликовано: 20.06.1996
Код ссылки
<a href="https://patents.su/0-1732518-sposob-polucheniya-immunoglobulina-m.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">Способ получения иммуноглобулина м</a>
Способ контроля выхода пенного продукта
Номер патента: 1808385
Опубликовано: 15.04.1993
Автор: Таюпов
МПК: B03B 13/00
Метки: выхода, пенного, продукта
...а соединены с входами первого и второго программного блоков 16 и 17 и измерителей 18, 19, 20 времени. Выход блока 21 задержки соединен с четвертым управляющим входом коммутатора, а выход блока 14 соединен с входом 21.Программные блоки 16, 18 измеряют, соответственно, толщину слоя пены и уровень пульпы, а измерители 18, 20 и 19 времени фиксируют, соответственно толщину пены от ее уровня Ук, фиксированной электропроводности до нижнего ее уровня Ун, по границе пена-пульпа, толщину прослойки пены от уровня Ук до уровня ее разгрузки черпания Ур лопастями пеногона и уровень пульпы. Выходы блоков 16 и 17 соединены с контрольными входами коммутатора 15,Устройство работает следующим образом,С момента реверса двигателя 4 и начала движения поплавка...
Способ получения фосфонитрилхлоридов
Номер патента: 254511
Опубликовано: 01.01.1969
Авторы: Живухин, Киреев, Колесников
МПК: C07F 9/22
Метки: фосфонитрилхлоридов
...условия проведеня реакцп, ВозхОж.ность полученя кристаллических продуктов с большим выходом, а также доступность искодных продуктов (силазаны производят в 15 промышленном масштабе) и возможностьпростой регенерацисилазанов.П р и м е р 1. В четырехгорлую колбу, снабженную мешалкой, капельой воронко, термометром и соединенными последовательно 20 игольчатым дефлегматором (15 сл), ловушкойДина - Стараобрати.и .холодильнко, загружают 62,4 г РС 1;200,л хлорбензола и по каплям принтенсивном перемешиванп приливают 21,9 г гексаметлциклотрсилаза на. Реакционную массу выдерживают 18 часпри 128 - 132 С, собирая в ловушке Дина - Старка диметилдихлорсилан и поглощая в колонке выделяющийся НС 1. После отфильтровывания осадка, отгонки...
Способ получения 1-ментола
Номер патента: 420163
Опубликовано: 15.03.1974
Авторы: Акира, Иностранна, Иностранцы, Сатохико, Юзо
МПК: C12P 7/22
Метки: 1-ментола
...в течение 48 час при 30 С реакционный продукт экстрагируют эфиром. Выход продукта реакции составляет 4,8 г, анализ с помощью газовой хроматографии показал наличие 13,4% 1-ментола и 3,4% 1-изоментола, После хроматографирования на кремнеземной колонке для разделения 1-ментола и 1-изоментола от непрореагировавших эфиров, получают 0,5 г смеси 1-ментола с 1-изоментолом. Эту смесь превращают в монохлоруксусный эфир, который охлаждают до - 20 С и получают 0,41 г монохлоруксусного эфира 1-ментола, который гидролизуют и получают 0,23 г 1-ментола с т, пл. 42,7 С (а) о = - 50,2 (С = 1,5, этаод).П р и м с р б, 50 мл обработанной ультразвуком жидкости из примера 5 пропускают через колонку Ссфадекс-С(диаметр 3,5 см, длина 75 см) для отбора эстеразы,...
Способ получения ацетонциангидрина
Номер патента: 486506
Опубликовано: 30.09.1975
Авторы: Масаси, Хидеки, Ясумаса, Ясунобу
МПК: C07C 121/36
Метки: ацетонциангидрина
...трубопровод 1, через насос 2, трубопровод 3 и подогреватель 4 в колонну мгновенного испарения 5. Кислые газы, примеси с низкой температурой кипения, цианистоводородная кислота, ацетон и небольшое количество ацетонциангидрина отгоняют из верхней части этой колонны 5 и конденсируют в конденсаторе 6.Сконденсированную таким образом жидкость подают через трубопровод 7 в колонну десорбции 8. Кислые газы и вещества с низкой температурой кипения, оказывающие вредное влияние на протекание химической реакции, удаляют из верхней части колонны 8 через трубопровод 9, и цианистоводородная кислота и ацетон, которые не содержат этивещества, оказывающие вредное влияние на протекание химической реакции, извлекают из нижней части колонны 8 и рециркулируют...
Способ получения плазмозаменителя
Номер патента: 539040
Опубликовано: 15.12.1976
Авторы: Абаева, Аймухамедова, Алтымышев, Шелухина
МПК: C08B 37/06
Метки: плазмозаменителя
...пропусканием гидролизата через анионпт в муравьинокислой форме и целевой продукт осаждают ацетоном в соотношении 1:1 - 1:2.Гидролиз пектиновых веществ проводят при рН 1 путем добавления концентрированной серной кислоты уд. вес 1,830. Преимуществом предлагаемого способа является зьсокий выход пектиновых веществ (80%), хорошая растворимость препарата в воде, более низкий молекулярный вес и следовательно отсутствие кумулятивного действия, а также почти повсеместное наличие большого количества сырья (жома сахарной свеклы).П р и м е р 1. 50 г свекловичного жома заливают 1900 мл дистиллированной воды, нагретой до 55 С и доводят рН полученной смеси до 1 концентрированной серной кислотои (2,7 мл). Затем поднимают температуру до 78 С и...
Предыдущий патент: Способ получения фторалкилсодержащих гидроксикетонов
Следующий патент: Устройство для неразрушающего контроля диэлектриков
Случайный патент: Бездиафрагменный электролизер для получения магния и хлора